蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾幼蟲的影響

高軍 顧愛祥 周福才 李傳明

摘要 [目的]了解不同生育期蓖麻葉片乙醇提取物對斜紋夜蛾的影響，為蔬菜斜紋夜蛾的生物防治提供參考。[方法]研究了3個生育期（初果期、盛果期、成熟前期）蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾幼蟲的嗅覺反應、取食行為和幼蟲成活率的影響。[結(jié)果]提取物對斜紋夜蛾幼蟲2齡和5齡幼蟲的驅(qū)避率均在69%以上;和對照相比，幼蟲對處理包菜的取食量下降了42.46%～47.08%，取食活動次數(shù)和取食時間減少，幼蟲的成活率下降了38.10%～52.39%。3個生育期的提取物對斜紋夜蛾幼蟲的驅(qū)避作用強弱順序依次為成熟前期、盛果期、初果期，但在斜紋夜蛾幼蟲的取食量、成活率上沒有明顯差異。[結(jié)論]蓖麻葉片對斜紋夜蛾具有一定的驅(qū)避作用和抗生作用。

關(guān)鍵詞 蓖麻;提取物;斜紋夜蛾;嗅覺反應;取食行為;存活率

中圖分類號 S482.3 ?文獻標識碼 A ?文章編號 0517-6611（2014）34-12102-02

Effects of Extracts from Castor Plant Leaves against Spodoptera litura Fabricius Larva

GAO Jun1， GU Aixiang2， ZHOU Fucai2* et al

（1. Yangzhou Hanjiang River Street office Han Comprehensive Agricultural Service Center， Yangzhou， Jiangsu 225127; 2. ?College of Horticulture and Plant Protection， Yangzhou University， Yangzhou， Jiangsu 225009）

Abstract [Objective] The aim was to understand effects of extracts from castor plant leaves against Spodoptera litura Fabricius larva to provide reference for biocontrol of Spodoptera litura. [Method] The olfactory response of extracts from castor leaves at early fruitsetting stage， full fruitsetting stage and fruit premature stage on Spodoptera litura were studied， and effects of the extracts on the feeding behavior of S. litura larvae and larval survival rate were also studied. [Result]The extracts from castor bean leaves had significant repellent effects on S. litura. The repellent rates of both 2nd and 5th larvae exceeded 69%. Compared with the control， larvae treated cabbage food intake decreased by 42.46%-47.08%， the number of feeding activity and feeding time was reduced， and the survival rate of larvae was decreased by 38.10%-52.39%. The repellent intension of the extracts of the three growth stages to S. litura were premature period > full fruiting period > early fruitsetting period. But， there was no significant difference between S. litura larvaes food consumption and the survival rate. [Conclusion] The castor bean leaves have good repellent and antibiosis effects on S. litura.

Key words Castor plant; Extract; Spodoptera litura Fabricius; Olfaction response; Feeding behavior; Survival

斜紋夜蛾（Spodoptera litura Fabricius）寄主廣泛，且具有間歇性暴發(fā)成災的特點，是我國蔬菜上的重要害蟲。斜紋夜蛾1年發(fā)生4～9代，世代重疊，無滯育現(xiàn)象，在云南、廣東、福建、臺灣等地全年均可發(fā)生[1]。斜紋夜蛾常用的防治方法主要有生物防治、物理防治、農(nóng)業(yè)防治和化學防治等，但以化學防治為主。長期以來，由于過分依賴化學防治，不僅造成害蟲抗藥性的快速上升，而且給農(nóng)產(chǎn)品的安全帶來隱患。目前，斜紋夜蛾的非化學防治技術(shù)得到快速發(fā)展，如昆蟲性信息素[2]、斜紋夜蛾核型多角體病毒[3]、誘捕器誘捕[4]等，這些技術(shù)的推廣應用對我國無公害蔬菜的生產(chǎn)以及無公害性食品體系的建立起到積極作用。

蓖麻（Ricinus communi L.）是大戟科1年生落葉植物，蓖麻葉片中含有一種三萜烯類的蓖麻堿，它對多種農(nóng)業(yè)害蟲[5-7]、鼠類[8]表現(xiàn)出一定的生物活性，但由于多種原因，其進一步的開發(fā)利用研究進展緩慢。趙斌等將蓖麻提取物用作設施番茄煙粉虱的驅(qū)避劑，收到較好效果[9]。蓖麻作為一種重要的生物質(zhì)能源植物，近幾年在我國沿海地區(qū)較大面積地推廣種植。為了進一步開發(fā)利用蓖麻在害蟲治理，特別是蔬菜害蟲無公害治理方面的資源，提高蓖麻種植的綜合效益，筆者研究了不同生育期蓖麻葉片乙醇提取物對斜紋夜蛾幼蟲的影響，旨在為蔬菜斜紋夜蛾的生物防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1

供試植物。蓖麻品種為揚蓖1號，由揚州大學農(nóng)學院提供。蓖麻露地栽培，常規(guī)管理。初果期、盛果期和成熟前期分別為7月15日、8月5日和8月25日。取完全成熟的中上部蓖麻葉片若干，洗凈，晾干，放入40～50 ℃烘箱恒溫干燥，粉碎后過40～80目篩。

1.1.2 供試害蟲。斜紋夜蛾，在實驗室用包菜繁殖后選擇2齡和5齡幼蟲供試，供試時饑餓6 h。

1.2 方法

1.2.1 蓖麻葉片乙醇提取物的制備。 采用索氏提取法抽提。取50 g蓖麻葉片粉末包好，放入提取器中（不超過虹吸管），然后加入5倍植物粉末量的95%乙醇，抽提24 h后取出抽濾液，旋轉(zhuǎn)濃縮至濃度為1 g（DW）/ml的物質(zhì)，裝在棕色玻璃瓶中，備用。

1.2.2 斜紋夜蛾對抽提物的嗅覺反應測定。利用“Y”形嗅覺儀測定。將葉片提取物和95%乙醇分別稀釋250倍，各取10 μl滴加于濾紙上，自然干燥后分別置于嗅覺儀兩臂端作誘源和對照，測定斜紋夜蛾對提取物的反應。

試驗在溫度25 ℃左右、相對濕度80%左右的室內(nèi)進行。在嗅覺儀上方0.5 m處放置1盞40 W日光燈提供均勻光照。嗅覺儀臂端氣體流量設定為30 ml/min，將經(jīng)過饑餓4 h左右的斜紋夜蛾引入嗅覺儀，5 min內(nèi)進入臂端1/3者記為反應，否則記為無反應。每頭斜紋夜蛾作為1個處理，每測5頭將方向?qū)Q，并將測試區(qū)域先用無水乙醇擦拭，然后用蒸餾水擦拭，之后重新放入樣品。每頭斜紋夜蛾只受試1次，每一處理測試1頭斜紋夜蛾，試驗前用空氣吹洗嗅覺儀10～20 min。試驗重復10次。

分別用反應率和驅(qū)避率[9]評價斜紋夜蛾對供試樣品的嗅覺反應。

反應率=兩臂端反應總蟲量/試驗總蟲數(shù)×100%

驅(qū)避率=（對照蟲量-處理蟲量）/對照蟲量×100%

1.2.3 蓖麻提取物對斜紋夜蛾取食量和存活率的影響測定。在直徑12 cm的培養(yǎng)皿中鋪墊1層濾紙。將供試包菜葉片放入不同處理的蓖麻葉片乙醇提取物中浸透，取出晾干，放入培養(yǎng)皿中，然后每皿接入1頭斜紋夜蛾幼蟲，24 h后測定取食葉面積。以清水浸泡為對照，重復15次。取食葉面積測定采用數(shù)字圖像處理的方法[10]。在待測樣品的周圍放置標尺，將待測樣品用數(shù)碼照相機照相，照片輸入計算機后，用Photoshop軟件測定面積。

1.2.4 蓖麻提取物對斜紋夜蛾取食行為的影響觀察。參照李云壽等的方法[11]。試蟲處理同“1.2.3”，將培養(yǎng)皿放在26～28 ℃的室內(nèi)，第2天開始觀察其取食行為，連續(xù)觀測3 d，夜間觀察在暗紅燈下進行，記錄幼蟲在24 h內(nèi)取食開始和停止的時間，數(shù)據(jù)整理成取食活動和取食間隔的次數(shù)和時間，分析蓖麻提取物對斜紋夜蛾取食行為的影響。試驗光暗周期為14∶10 h。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用DPS 7.05統(tǒng)計軟件進行處理。用Duncans多重比較方法檢驗各處理的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同生育期蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾的嗅覺反應

蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾幼蟲有明顯的嗅覺驅(qū)避作用（表1），3個生育期葉片提取物對幼蟲的驅(qū)避作用強弱依次為成熟前期、盛果期、初果期。蓖麻葉片提取物對2齡幼蟲的作用大于對5齡幼蟲，盛果期和成熟前期葉片提取物對2齡和5齡幼蟲的驅(qū)避率分別達到88.10%、93.78%和78.33%、91.00%。

表1 斜紋夜蛾對蓖麻葉片提取物的嗅覺反應

%

生育期2齡幼蟲反應率驅(qū)避率5齡幼蟲反應率驅(qū)避率

初果期56.67±0.080 a69.94±0.138 b48.00±0.065 a69.33±0.095 c

盛果期49.33±0.034 a88.10±0.054 ab34.67±0.025 ab78.33±0.097 b

成熟前期48.00±0.053 a93.78±0.046 a26.67±0.047 b91.00±0.056 a

注：數(shù)據(jù)為平均數(shù)±標準誤;同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示處理間在0.05水平差異顯著。

2.2 不同生育期蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾取食量的影響

蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾取食量有明顯影響（表2）。處理各齡幼蟲的取食量均顯著小于對照，和對照相比，幼蟲對處理包菜的取食量下降了42.46%～47.08%。斜紋夜蛾幼蟲對不同生育期蓖麻葉片提取物處理的包菜葉片的取食量無顯著差異。

表2 斜紋夜蛾幼蟲對蓖麻葉片提取物處理的包菜葉片的取食量

g

生育期幼蟲齡期

1齡2齡3齡4齡5齡6齡總計

初果期0.10±0.011 b0.14±0.006 b0.16±0.003 c0.26±0.015 b0.43±0.027 b0.78±0.034 b1.87±0.052 b

盛果期0.10±0.009 b0.14±0.005 b0.16±0.008 c0.22±0.005 c0.38±0.017 b0.72±0.023 b1.71±0.049 b

成熟前期0.10±0.004 b0.13±0.009 b0.19±0.003 b0.20±0.003 c0.42±0.010 b0.69±0.039 b1.72±0.048 b

CK0.22±0.020 a0.21±0.001 a0.23±0.003 a0.39±0.008 a0.71±0.105 a1.48±0.057 a3.25±0.169 a

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標準誤;同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示處理間在0.05水平差異顯著。

2.3 不同生育期蓖麻葉片對斜紋夜蛾取食活動次數(shù)和時間的影響

用經(jīng)過不同生育期蓖麻葉片提取物處理過的包菜飼喂斜紋夜蛾5齡幼蟲，發(fā)現(xiàn)斜紋夜蛾的取食活動次數(shù)和每次取食活動用于取食的時間均明顯少于對照（表3）。其中，對經(jīng)成熟前期蓖麻葉片提取物處理的包菜葉片斜紋夜蛾5齡幼蟲24 h 的取食活動次數(shù)和每次取食活動用于取食的時間分別為對照的27.9%和26.23%。

3個不同生育期蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾5齡幼蟲的取食行為也存在一定差異，對取食活動次數(shù)和每次取食活動用于取食的時間影響大小依次為初果期、盛果期、成熟前期，其中對成熟前期提取物處理的食物取食活動次數(shù)僅為初果期的75.7%。

2.4 蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾存活率的影響

蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾幼蟲的存活率有明顯影響，斜紋夜蛾5齡幼蟲取食經(jīng)蓖麻葉片提取物處理的包菜葉片后，幼蟲的成活率下降幅度在38.10%～52.39%。但3個不同生育期的蓖麻葉片提取物對斜紋夜蛾幼蟲存活率的影響無顯著差異（表4）。

表3 斜紋夜蛾5齡幼蟲24 h內(nèi)取食次數(shù)和取食時間

生育期取食活動∥次每次取食活動用于取食的時間∥min

初果期12.33±0.49 b6.87±0.15 b

盛果期10.17±0.79 bc6.52±0.16 bc

成熟前期9.33±0.72 c6.02±0.18 c

CK33.50±0.99 a8.16±0.25 a

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標準誤;同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示處理間在0.05水平差異顯著。

3 討論

在長期的協(xié)同進化過程中，植物利用自身的次生代謝物質(zhì)防御外來有害生物的入侵，同時也促進了昆蟲對特定植

物的嗜好性差異的分化，使植物獲得了對特定昆蟲的抗性。