四棱筋骨草等對小鼠抗運動疲勞比較研究

程 鵬，陳 飛，何先元.*， 周卯勤，明拂曉

(1.重慶醫(yī)科大學(xué) 實驗管理中心 ，重慶 401331；2.重慶醫(yī)科大學(xué) 中醫(yī)藥學(xué)院， 重慶 401331；3.重慶市藥物種植研究所，重慶 408435)

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四棱筋骨草等對小鼠抗運動疲勞比較研究

程 鵬1，陳 飛2，何先元1.2*， 周卯勤3，明拂曉2

(1.重慶醫(yī)科大學(xué) 實驗管理中心 ，重慶 401331；2.重慶醫(yī)科大學(xué) 中醫(yī)藥學(xué)院， 重慶 401331；3.重慶市藥物種植研究所，重慶 408435)

目的：研究四棱筋骨草水浸液對小鼠的抗運動疲勞作用。方法：通過對小鼠分組灌胃四棱筋骨草、紅參、肉蓯蓉、太子參水煎液和生理鹽水后小鼠的游泳時間、血尿素氮、肝糖原和肌糖原的測定，觀察比較四棱筋骨草、肉蓯蓉、太子參和紅參水浸液對小鼠抗運動疲勞作用。結(jié)果：四棱筋骨草、紅參、肉蓯蓉、太子參水煎液均能增強(qiáng)小鼠抗運動疲勞的作用。結(jié)論：民間草藥四棱筋骨草與傳統(tǒng)補(bǔ)益類中藥紅參、肉蓯蓉、太子參一樣可明顯提高機(jī)體抗運動疲勞的能力，可以作為提高機(jī)體運動適應(yīng)性藥物開發(fā)和應(yīng)用的資源植物。

四棱筋骨草；水浸液；運動疲勞

四棱筋骨草是唇形科基源四齒四棱草(Schnabeliatetrodonta(Sun) C. T. Wu et G. Chen)干燥的全草。四棱筋骨草作為一種民間草藥，具有祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、散瘀止痛的功效，常用于風(fēng)濕疼痛、四肢麻木、腰膝酸痛、跌打損傷、閉經(jīng)痛經(jīng)和月經(jīng)不調(diào)等癥，使用廣泛，需求量很大，然而有關(guān)四棱筋骨草對運動疲勞的影響研究報道還沒有[1-10]。本研究采用常用補(bǔ)益類中藥紅參、肉蓯蓉、太子參等作為陽性對照比較，初步考察四棱筋骨草以及其它三味中藥對運動疲勞影響的差異，同時紅參、肉蓯蓉、太子參也無人專門比較研究它們的抗疲勞作用差異。本研究旨在為四棱筋骨草資源的開發(fā)利用和另三味中藥在抗疲勞方面的臨床運用提供參考。

1 資料與方法

1.1 材料與試劑

四棱筋骨草(采自重慶市南川區(qū)金佛山自然保護(hù)區(qū))、紅參、肉蓯蓉、太子參等從市場購買，水煎液從藥店采購，水煎液(按一般水煎液方法制備)，每毫升相當(dāng)于原生藥2g。

肌/糖元試劑盒(規(guī)格100T/96樣，生產(chǎn)批號：20131025，南京建成生物工程研究所)，尿素氮(BUN)試劑盒(規(guī)格50T/48樣，生產(chǎn)批號：20131105，南京建成生物工程研究所)，雙蒸水。

1.2 儀器設(shè)備

小鼠游泳裝置：圓柱型不銹鋼盆(50cm×50cm，內(nèi)裝冰水混合物，水深40cm，水溫0℃ )；300mL 磨口廣口瓶(凡士林密封)。紫外光分光光度計(UV-1200)、高速離心機(jī)(H1650-W)、數(shù)顯恒溫水浴鍋(榮華HH-4)、勻漿器。

1.3 實驗動物

昆明種健康小鼠由重慶醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，動物許可證號：SCXK(渝)2002-0001，重慶醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供。

1.4 實驗方法

1.4.1 實驗分組 選小鼠50只，體重(20±2)g，隨機(jī)分為5組，即生理鹽水組、四棱筋骨草水煎液組、紅參水煎液組、太子參水煎液組、肉蓯蓉水煎液組，每組10只，劑量按0.3mL/10g灌胃給藥。其中4只作為運動疲勞實驗小鼠，6只做肝糖原及肌糖原和血尿素氮測定。

1.4.2 小鼠運動疲勞實驗 本方法是根據(jù)低溫實驗和小鼠游泳實驗兩種方法綜合得出的檢測小鼠運動疲勞的實驗方法。各組給藥后1h，然后將小鼠放入游泳裝置，木棒敲打不銹鋼盆邊緣，刺激小鼠快速游動；記錄小鼠游泳開始至嗆水的時間。

1.4.3 小鼠耐缺氧實驗 將上述開始嗆水的小鼠轉(zhuǎn)移到300 mL磨口廣口瓶中(每瓶一只)，瓶內(nèi)預(yù)先置新鮮鈉石灰10g，用凡士林密封瓶口后開始計時，記錄小鼠從瓶口密封到小鼠呼吸停止耐缺氧的時間。

1.4.4 生化指標(biāo)測定方法 ①血清尿素氮含量：灌胃1h后受試動物，水中游泳疲勞后，斷頭采血，高速離心分離血清，二乙酰-肟比色法測定；②肝糖原含量：灌胃1h后受試動物，水中游泳疲勞后，取肝臟150mg勻漿，比色法測定；③肌糖原含量：灌胃1h后受試動物，水中游泳疲勞后，取后腿肌肉150mg勻漿，比色法測定。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

所有實驗數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件包進(jìn)行處理，新復(fù)極差測驗(LSR法)字母標(biāo)記法，凡有一個相同字母的即為差異不顯著，凡沒有相同標(biāo)記字母的即為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞的影響

四棱筋骨草、紅參、肉蓯蓉、太子參水煎液與生理鹽水對小鼠運動疲勞經(jīng)方差分析，見表1，處理間F值大于F0.05及F0.01值，說明不同中藥水煎液處理之間差異大，不同水煎液對小鼠對運動疲勞影響具有不同的作用。

表1 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞的方差分析

對本實驗研究數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，采用新復(fù)極差分析法，結(jié)果見表2，四棱筋骨草、紅參和肉蓯蓉水煎液對小鼠運動疲勞均與生理鹽水比較存在顯著差異，太子參水煎液與生理鹽水比較無差異，四棱筋骨草、紅參和肉蓯蓉三者的水煎液對小鼠運動疲勞不存在差異。

表2 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞的新復(fù)極差分析

2.2 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞血尿氮的影響

四棱筋骨草、紅參、肉蓯蓉、太子參水煎液與生理鹽水對小鼠運動疲勞血尿氮的影響經(jīng)方差分析，結(jié)果見表3，處理間F值大于F0.05及F0.01值，說明不同中藥水煎液處理之間差異大，不同水煎液對小鼠運動疲勞后血尿氮存在不同的影響。

表3 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞血尿氮影響的方差分析

對本實驗研究數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，采用新復(fù)極差分析法，結(jié)果見表4，太子參、肉蓯蓉、四棱筋骨草、紅參水煎液對小鼠運動疲勞后的血尿氮的影響均與生理鹽水比較存在極顯著差異的影響，太子參、肉蓯蓉、四棱筋骨草、紅參四種水煎液相互之間對小鼠運動疲勞后的血尿氮也存在極顯著影響。

表4 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞血尿氮影響的新復(fù)極差分析

2.3 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞肝糖原的影響

四棱筋骨草、紅參、肉蓯蓉、太子參水煎液與生理鹽水對小鼠運動疲勞后肝糖原的影響經(jīng)方差分析，結(jié)果見表5，處理間F值大于F0.05及F0.01值，說明不同中藥水煎液處理之間差異大，不同水煎液對小鼠運動疲勞肝糖原存在不同的影響。

表5 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞肝糖原影響的方差分析

對本實驗研究數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，采用新復(fù)極差分析法，結(jié)果見表6，太子參、肉蓯蓉、四棱筋骨草、紅參水煎液對小鼠運動疲勞后肝糖原的影響均與生理鹽水比較存在極顯著差異，四棱筋骨草、太子參、肉蓯蓉、紅參四種水煎液之間對小鼠運動疲勞后肝糖原存在顯著影響，四棱筋骨草與太子參、肉蓯蓉和紅參之間存在極顯著影響，肉蓯蓉與太子參和紅參之間存在極顯著影響，太子參和四棱筋骨草之間不存在極顯著影響。

表6 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞肝糖原影響的新復(fù)極差分析

2.4 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞肌糖原的影響

四棱筋骨草、紅參、肉蓯蓉、太子參水煎液與生理鹽水對小鼠運動疲勞后肌糖原的影響經(jīng)方差分析，結(jié)果見表7，處理間F值大于F0.05及F0.01值，說明不同中藥水煎液處理之間差異大，不同水煎液對小鼠運動疲勞后肌糖原存在不同的影響。

表7 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞肌糖原影響的方差分析

對本實驗研究數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，采用新復(fù)極差分析法，結(jié)果見表8，肉蓯蓉、太子參、紅參水煎液對小鼠運動疲勞后肌糖原的影響與生理鹽水比較存在顯著差異，四棱筋骨草與生理鹽水比較不存在顯著差異，太子參與紅參水煎液比較不存在差異，肉蓯蓉與四棱筋骨草、紅參和太子參水煎液之間存在極顯著差異，紅參與肉蓯蓉水煎液之間存在極顯著差異，太子參與紅參之間、太子參和四棱筋骨草水煎液之間不存在極顯著差異。

表8 四棱筋骨草等水煎液對小鼠運動疲勞肌糖原影響的新復(fù)極差分析

3 討論

四棱筋骨草與紅參和肉蓯蓉補(bǔ)益類中藥水煎液一樣能顯著提高小鼠運動疲勞的時間，太子參作用不明顯，值得進(jìn)一步探討。

血尿素氮是蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物，當(dāng)機(jī)體長時間運動而不能通過糖、脂肪分解代謝獲得足夠能量時，蛋白質(zhì)和氨基酸分解代謝加強(qiáng)，血尿素氮可以作為評價機(jī)體體力超負(fù)荷時承受能力的指標(biāo)。本研究表明紅參、四棱筋骨草、肉蓯蓉、太子參水煎液能顯著降低小鼠血尿素氮含量，說明這4種藥物具有提高機(jī)體對抗運動疲勞的適應(yīng)能力，作用效果順序是紅參>四棱筋骨草>肉蓯蓉>太子參，也說明四棱筋骨草可以作為抗運動疲勞的資源藥物應(yīng)用和開發(fā)。

體內(nèi)肌糖原是運動時能量的來源，肌糖原儲備充足，供應(yīng)的能量就越多，耐力就越好；肝臟中肝糖原的儲備增多，可以維持運動時血糖水平，從而為機(jī)體提供更多的能量來達(dá)到抗疲勞的目的。本實驗結(jié)果可以看出，肉蓯蓉、太子參、紅參、四棱筋骨草水煎液均顯著高于生理鹽水對照組，提高了小鼠機(jī)體肌糖原和肝糖原的儲備，增強(qiáng)機(jī)體對疲勞運動的適應(yīng)能力。

中藥成分中的皂甙、多糖、黃酮和多種氨基酸等多種物質(zhì)均能提高機(jī)體抗疲勞的能力，作為民間草藥的四齒四棱筋骨草所具有的抗疲勞作用主要是哪一類物質(zhì)在起作用，有待進(jìn)一步研究。

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(責(zé)任編輯：宋勇剛)

Comparative Study on Anti-sports Fatigue Effect of Herbs Schnabelia Tetrodonta in Mice

Cheng Peng1,Chen Fei2,He Xianyuan1，2*,Zhou Maoqin3,Ming Fuxiao2

(1. Experimental management center of Chongqing Medical University，Chongqing 401331，China; 2.College of Traditional Chinese Medecine，Chongqing Medical University，Chongqing 401331，China; 3. Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435，China)

Objective:Study on anti-sports fatigue effect of water infusion of herbs Schnabelia tetrodonta in mice.Methods:The mice were randomly divided into five groups by intragastric administration water infusion of herbs Schnabelia tetrodonta, red ginseng, cistanche, radix pseudostellariae and saline then the swimming time, blood urea nitrogen, liver glycogen and muscle glycogen of mice were determinated.Anti-sports fatigue effects were compared mutual between herbs Schnabelia tetrodonta, red ginseng, Cistanche, radix pseudostellariae and saline in mice.Results:The decoction of herbs Schnabelia tetrodonta, red ginseng, Cistanche, radix pseudostellariae can enhance the anti-sports fatigue effect in mice.Conclusion:The folk medicinal herb Schnabelia tetrodonta can obviously improve the anti-fatigue ability of body in common with the traditional Chinese medicine ginseng, cistanche,radix pseudostellariae.The herb Schnabelia tetrodonta can be used as the plant resources of improving body movement adaptability drug development and application.

Schnabelia Tetrodonta;Water Infusion;Sports Fatigue

2014-03-11

重慶市衛(wèi)生局科技項目(2012-2-144)

程鵬(1964-)，男，重慶醫(yī)科大學(xué)實驗管理中心實驗師，研究方向為中藥質(zhì)量控制。

何先元(1963-)，男，重慶醫(yī)科大學(xué)教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向為中藥資源開發(fā)利用及中藥材GAP。

R285.5

A

1673-2197(2014)13-0009-03