苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒懸浮劑防治臺(tái)灣乳白蟻的效果研究

張順瑜，周云，鄧亞芳，朱娜，張晨冬，莫建初

(1.杭州市余杭區(qū)白蟻防治所，浙江 杭州 311100;2.浙江大學(xué)昆蟲科學(xué)研究所，浙江 杭州 310058)

白蟻是目前世界范圍內(nèi)的重要害蟲，在適宜的環(huán)境條件下繁殖能力強(qiáng)，給許多國家造成了極大的經(jīng)濟(jì)損失。我國南方地區(qū)由于氣候溫暖濕潤特別適宜白蟻生存，因而白蟻危害更為嚴(yán)重。為了防治白蟻，人們利用毒死蜱、氰戊菊酯、聯(lián)苯菊酯、氟蟲腈、吡蟲啉、氟鈴脲、伊維菌素等對其種群進(jìn)行控制[1］。然而，這些化學(xué)藥劑對環(huán)境或多或少有一些負(fù)面影響。為了獲得更加環(huán)境友好的白蟻防治藥劑，我們在室內(nèi)測定了AcMNPV懸浮劑對臺(tái)灣乳白蟻的毒殺效果。

AcMNPV懸浮劑是一種新型的生物殺蟲劑。上世紀(jì)60年代后期，Vail等從美國加利福尼亞洲1頭苜蓿銀紋夜蛾幼蟲體內(nèi)分離出1株多粒包埋的核型多角體病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus，AcMNPV)，因它能交錯(cuò)感染30多種鱗翅目害蟲而受到重視[2］。

臺(tái)灣乳白蟻Coptotermes formosanus Shiraki是一種典型的土木兩棲性白蟻，它既能棲居地下，又能生活在地上，也能在特定的環(huán)境中如樹干、船體內(nèi)等處營巢，擴(kuò)散和適應(yīng)力很強(qiáng)。但它需要不斷獲得水分，因此它的巢一般筑在接近水源的地方，在主巢至水源之間有粗大的吸水線[1］。

本研究主要是通過濾紙浸藥法和松木粉混藥法來測定不同濃度的AcMNPV對臺(tái)灣乳白蟻的毒殺效果。

1 材料和方法

1.1 供試白蟻 供試的臺(tái)灣乳白蟻巢挖取自浙江省諸暨市的行道樹內(nèi)。搬回室內(nèi)后飼養(yǎng)在黑暗的環(huán)境中，飼養(yǎng)溫度為(25±1)℃，相對濕度為(65±5)%。試驗(yàn)時(shí)，用濕潤濾紙從巢內(nèi)誘取健康成熟的工蟻。

1.2 供試藥劑 AcMNPV懸浮劑的商品名為奧綠1號(hào)懸浮劑，其有效成分為10億PIB/mL，由安徽績溪慶豐農(nóng)化有限公司生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 含藥濾紙對白蟻的毒殺效果 參考劉自力等[3］的方法，用純凈水將藥劑稀釋10倍、100倍、500倍、1000倍、1500倍和10000倍，以不加藥的純凈水作對照。在培養(yǎng)皿(D=90 mm)內(nèi)放置1張清潔的濾紙(D=90 mm)，用移液管將1.2 mL藥液或純凈水均勻地滴加在濾紙上，使濾紙剛好濕潤。然后，將30只健康成熟的工蟻移入培養(yǎng)皿內(nèi)。每個(gè)藥液濃度及對照各設(shè)3個(gè)重復(fù)。每天定時(shí)檢查，記錄培養(yǎng)皿中白蟻的死亡情況，檢查時(shí)根據(jù)濾紙的濕潤情況滴加適量的水。

1.3.2 混藥松木粉對白蟻的毒殺效果 用過40目篩的松木粉將藥劑稀釋500倍、1000倍和1500倍。用松木粉稀釋藥劑時(shí)，先將松木粉放在攪拌機(jī)內(nèi)，然后將需要量的藥劑滴加在松木粉中，用攪拌機(jī)充分?jǐn)嚢杌靹?。對照松木粉則滴加相同量的純凈水，并攪拌均勻。

試驗(yàn)分強(qiáng)迫取食和選擇取食2種方式進(jìn)行[4］。1)強(qiáng)迫取食。將10 g過20目篩的細(xì)沙均勻鋪在培養(yǎng)皿(D=90 mm)內(nèi)，形成薄薄的沙層，并用純凈水將沙潤濕。稱取0.2 g的餌劑或?qū)φ账赡痉壑糜谒芰媳∑希缓蠓旁谂囵B(yǎng)皿內(nèi)的細(xì)沙上。在培養(yǎng)皿內(nèi)放入30只健康成熟的工蟻。每種處理各設(shè)3個(gè)重復(fù)。每天定時(shí)檢查，記錄培養(yǎng)皿內(nèi)白蟻的死亡情況，檢查時(shí)根據(jù)需要滴加適量的水于細(xì)沙中以供白蟻飲用。2)選擇取食。將40 g過20目篩的細(xì)沙均勻鋪在培養(yǎng)皿(D=160 mm)內(nèi)，形成薄薄的沙層，并用純凈水將沙潤濕。在細(xì)沙表面放置2個(gè)塑料薄片，一個(gè)塑料薄片上放0.2 g的無藥松木粉，另一個(gè)塑料薄片上放0.2 g的餌劑或無藥松木粉。在培養(yǎng)皿內(nèi)放入40只健康成熟的工蟻。每種處理各設(shè)3個(gè)重復(fù)。每天定時(shí)檢查，記錄培養(yǎng)皿內(nèi)白蟻的死亡情況，檢查時(shí)根據(jù)需要滴加適量的水于細(xì)沙上。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 采用Excel軟件、DPS軟件等統(tǒng)計(jì)軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總和方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度藥劑處理濾紙時(shí)白蟻的死亡情況

AcMNPV懸浮劑的稀釋倍數(shù)不同，對白蟻的毒殺效果差別明顯。從死亡率均值大小來看，稀釋倍數(shù)越低，對白蟻的毒殺能力越強(qiáng)，說明這種藥劑對白蟻的毒殺效果與藥液的濃度有關(guān)(表1)。

表1 不同濃度藥劑處理下白蟻的死亡率%

2.2 不同濃度藥劑處理松木粉時(shí)白蟻的死亡情況

2.2.1 強(qiáng)迫取食含藥松木粉時(shí)白蟻的死亡情況用松木粉將AcMNPV懸浮劑稀釋500～1500倍，然后用它們分別飼喂臺(tái)灣乳白蟻工蟻時(shí)，取食病毒處理松木粉的白蟻均在8～9 d的時(shí)間里全部死亡，但在供試的濃度條件下，藥劑對白蟻的致死效果差異不明顯(表2)。

表2 強(qiáng)迫取食含藥松木粉時(shí)白蟻的死亡率%

2.2.2 選擇取食含藥松木粉和對照松木粉時(shí)白蟻的死亡情況 在同時(shí)提供無藥松木粉和病毒處理松木粉給白蟻取食的情況下，3種濃度處理的白蟻均在10多天的時(shí)間內(nèi)基本全部死亡，且3種處理濃度間白蟻死亡的速度差異不很明顯，只相差2～3 d(表3)。與強(qiáng)迫取食相比，選擇取食條件下白蟻的死亡速度要慢一些。

表3 選擇取食含藥松木粉和對照松木粉時(shí)白蟻的死亡率 %

4 討論

本研究采用含藥濾紙飼喂法和含藥松木粉飼喂法在室內(nèi)測定了AcMNPV懸浮劑對臺(tái)灣乳白蟻的毒殺效果。研究結(jié)果表明，AcMNPV懸浮劑的500倍至1500倍稀釋液，對臺(tái)灣乳白蟻工蟻具有良好的毒殺效果，取食病毒液處理食物的白蟻會(huì)在幾天至十幾天的時(shí)間內(nèi)死亡，說明AcMNPV懸浮劑可在生產(chǎn)上用于防治白蟻。不過在現(xiàn)場條件下，AcMNPV懸浮劑能否滅殺白蟻巢群，則需進(jìn)一步的研究驗(yàn)證。AcMNPV懸浮劑是一種微生物農(nóng)藥，目前的研究結(jié)果表明，這種病毒對一些鱗翅目害蟲具有良好的致死效果[5－6］，但其對白蟻的毒殺效果在現(xiàn)有的文獻(xiàn)中未見報(bào)道。在害蟲的生物防治中，病原微生物的利用是重要的一環(huán)。其中，從病原微生物的種類來看，以病毒為最多，在后效作用及安全性方面也以病毒為最好。因此，許多人認(rèn)為病原病毒是最有發(fā)展前途的微生物農(nóng)藥之一。

目前，各國科學(xué)家已從鞘翅目、雙翅目、半翅目、同翅目、膜翅目、等翅目、鱗翅目、脈翅目、蜻蜓目、直翅目和毛翅目等11個(gè)目的900多種昆蟲中發(fā)現(xiàn)了1300余種病毒和病毒樣粒子，它們分屬于桿狀病毒科、痘病毒科、虹色病毒科、細(xì)小病毒科、腸孤病毒科、微核糖核酸病毒科、彈狀病毒科、松大蠶蛾β病毒科和野田病毒科等9個(gè)科[7］。在這些昆蟲病毒中，特別是來源于等翅目昆蟲的病毒中，可能存在對白蟻具良好致病效果的病毒，如果對它們開展深入的研究，則可望研發(fā)出具應(yīng)用前景的防治白蟻的病毒產(chǎn)品。

謝鳴榮等[8］從死亡的黑翅土白蟻體內(nèi)分離到了1種屬于微核糖核酸科的昆蟲病毒，將該病毒提純液(濃度為109/mL)配制成誘餌供白蟻取食時(shí)，所有供試白蟻均在7 d后死亡。對死亡白蟻所做的電鏡檢查結(jié)果表明，蟲體內(nèi)含有供試的病毒顆粒，證明白蟻是被該病毒感染致死。在國外，Gibbs等[9］從鼻白蟻科乳白蟻屬的白蟻Coptotermes lacteus(Froggatt)體內(nèi)分離到了1種可致該種白蟻染病的病毒，這種病毒與導(dǎo)致蜜蜂Apis mellifera Linnaeus急性麻痹的病毒相似。從鱗翅目夜蛾科昆蟲灰翅夜蛾Spodoptera littoralis Boisduval體內(nèi)分離得到的1種核型多角體病毒對木白蟻科歐洲木白蟻Kalotermes flavicollis(Fabricius)的室內(nèi)巢群具有較強(qiáng)的感染性，被病毒感染的白蟻會(huì)在2～10 d內(nèi)死亡[10］。進(jìn)一步的組織形態(tài)學(xué)研究結(jié)果表明，該種病毒主要感染歐洲木白蟻的前腸、賁門瓣、幽門瓣、后腸、腸道肌肉、脂肪體、神經(jīng)組織、肌肉、輸卵管、翅芽若蟻、氣管皮膜組織、馬氏管和真皮等，對中腸的感染能力有限。不過，當(dāng)白蟻被病毒嚴(yán)重感染時(shí)，其中腸上皮細(xì)胞會(huì)脫落到腸腔液中[11］。因此，Al Fazairy和Hassan[11］認(rèn)為可利用這種核型多角體病毒在現(xiàn)場防治歐洲木白蟻，但現(xiàn)場防治效果有待進(jìn)一步研究。

目前，國內(nèi)外有關(guān)病毒防治白蟻的研究比較少。到目前為止，病毒防治白蟻的研究仍局限于室內(nèi)試驗(yàn)，野外試驗(yàn)尚未開展，因?yàn)椴《颈旧淼囊恍┤毕?如在暴露環(huán)境下易受外界溫濕度的影響、病毒的生產(chǎn)易受活體宿主的限制、成本較高等)限制它的開發(fā)和應(yīng)用[12］。在今后的研究工作中，應(yīng)加強(qiáng)病毒產(chǎn)品如病毒餌劑的研究，以便為生產(chǎn)上的白蟻防治工作提供新的手段。

[1]林樹青，宋曉鋼，高道蓉，等.中國白蟻防治專業(yè)培訓(xùn)教程[M］.北京:中國物價(jià)出版社，2004:80－526.

[2]侯建文，趙燁烽，蔣偉民.復(fù)合型AcMNPV制劑[J］.植物保護(hù)學(xué)報(bào)，1999，26(4):343 －346.

[3]劉自力，黃雷，易俊驥，等.氟鈴脲在家白蟻誘餌中最適量的室內(nèi)外試驗(yàn)[J］.中南林學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，24(1):74 －77.

[4]林愛壽，馮亮和，陳靜，等.氟啶脲餌劑滅殺白蟻效果測定[J］.中國森林病蟲，2011，30(4):34 －36.

[5]敖成光，王金良，朱曉群，等.幾種殺蟲劑防治斜紋夜蛾田間藥效試驗(yàn)[J］.長江蔬菜，2002，10(S1):32 －33.

[6]陳桂華，許渭根，盛仙俏，等.豇豆豆野螟藥劑防治效果試驗(yàn)[J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003(4):204 －205.

[7]劉岱岳.世界上昆蟲病毒的種類[J］.西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，1987，2(1):134－136.

[8]謝鳴榮，謝保國，胡遠(yuǎn)楊，等.林木白蟻病毒復(fù)合制劑研究初報(bào)[J］.江蘇林業(yè)科技，1998，25(1):38 －39.

[9]Gibbs A J，Gay F J，Wetherly A H.A possible paralysis virus of termites[J］.Virology，1970，40:1063 －1065.

[10]Al Fazairy A A，Hassan F A.Infection of termites by Spodoptera littoralis nuclear polyhedrosis virus[J］.Insect Science and its Application，1988，9:37 －39.

[11]Al Fazairy A A，Hassan F A.Histopathology of termite Kalotermes flavicollis Fabr.infected with a nuclear polyhedrosis virus[J］.Insect Science and its Application，1993，14:127 －134.

[12]徐冬，宋曉鋼，阮冠華.白蟻生物防治發(fā)展現(xiàn)狀分析[J］.中華衛(wèi)生殺蟲藥械，2013，19(3):244 －246.