豬附紅細(xì)胞體感染途徑的探討及臨床治療藥物的篩選

齊向濤 許追 齊亞銀

（石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832000）

豬附紅細(xì)胞體感染途徑的探討及臨床治療藥物的篩選

齊向濤 許追 齊亞銀*

（石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832000）

為了探討豬附紅細(xì)胞體的感染途徑和臨床常用的幾種藥物對(duì)豬附紅細(xì)胞體的治療效果，本試驗(yàn)利用幾種常用藥物對(duì)新疆石河子150團(tuán)某豬場(chǎng)24頭感染豬附紅細(xì)胞體的仔豬進(jìn)行臨床治療試驗(yàn)，結(jié)果表明，在每組治療的6頭患病豬中，青鏈霉素治療組僅有2頭痊愈，長(zhǎng)效土霉素治療組有5頭痊愈，1頭患病豬附紅細(xì)胞體的感染率為20%，強(qiáng)力霉素治療組6頭均痊愈，貝尼爾治療組有5頭痊愈，1頭患病豬附紅細(xì)胞體的感染率為60%，表明除青鏈霉素外，其他三種藥物治療效果差異不明顯，強(qiáng)力霉素治療效果略優(yōu)于長(zhǎng)效土霉素和貝尼爾。另外，本試驗(yàn)還采用5種不同感染途徑對(duì)小鼠進(jìn)行感染試驗(yàn)，結(jié)果表明靜脈注射組、傷口感染組、口服組、呼吸道感染組和皮下接種組的感染率分別為94%、91%、90%、78%、23%，表明附紅細(xì)胞體可通過上述5種途徑感染動(dòng)物。小鼠感染后第30天血液鏡檢結(jié)果表明，附紅細(xì)胞體感染率降低了70%～80%，表明本試驗(yàn)分離的附紅細(xì)胞體致病性較弱。

附紅細(xì)胞體；感染；治療

豬附紅細(xì)胞體病是由寄生于紅細(xì)胞表面或者游離于血漿的附紅細(xì)胞體引起豬的以發(fā)熱、貧血和黃疸為主要癥狀的人獸共患病，可造成仔豬的虛弱和貧血、母豬的繁殖障礙和育肥豬的生長(zhǎng)緩慢[1-4]，嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)的發(fā)展。該病多呈隱性感染，所以一般不表現(xiàn)出臨床癥狀，但當(dāng)機(jī)體的抵抗力下降，其他病原菌混合感染時(shí)，可造成動(dòng)物死亡[5-7]。由于各個(gè)年齡段、各種品種的豬均能感染豬附紅細(xì)胞體病，且仔豬由于免疫機(jī)能發(fā)育不全，抵抗力差，發(fā)病率高，死亡率也高。有些病豬自愈或治愈后生長(zhǎng)受阻，成為僵豬。因此，如不能及時(shí)有效地控制該病的傳播，無疑會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)帶來十分慘重的損失[5]。

近幾年來豬附紅細(xì)胞體病在石河子地區(qū)時(shí)常有發(fā)生，本病或者與本病混合感染等多重感染給生豬生產(chǎn)造成很大損失。筆者根據(jù)該病的流行情況、發(fā)病特點(diǎn)，對(duì)治療藥物進(jìn)行了有效篩選；采用靜脈注射、皮下接種、傷口感染、口服和呼吸道感染等5種途徑感染小鼠，以確定附紅細(xì)胞體的傳播途徑；并提出了該病的綜合防治措施，為該地區(qū)豬附紅細(xì)胞體病的診斷和治療提供科學(xué)參考。

1 材料與方法

1.1 材料

病料組織：2013年8月5號(hào)新疆石河子150團(tuán)某規(guī)?；i場(chǎng)發(fā)現(xiàn)斷奶仔豬腹下和股內(nèi)有出血斑點(diǎn)，過幾天結(jié)痂，有的仔豬突然死亡，全身紅紫，經(jīng)過對(duì)該場(chǎng)部分仔豬抽血化驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)有的病豬抽血血流不止，有的仔豬四肢抽搐后死亡，注射氨芐西林、林克霉素、頭孢噻呋鈉發(fā)現(xiàn)病情并未好轉(zhuǎn)，6天內(nèi)死亡了8頭仔豬，還有24頭病豬未治愈。

1.2 方法

1.2.1 血液推片觀察

將從部分豬群身上采集的新鮮血液在載玻片上進(jìn)行推片，待推片自然干燥后，滴加瑞氏染液，染色3分鐘，然后滴加等量的蒸餾水染色5分鐘，用蒸餾水沖洗，待干燥后用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。通過觀察顯微鏡視野下紅細(xì)胞形態(tài)以及紅細(xì)胞表面豬附紅細(xì)胞體的形態(tài)、大小、折光性并以百分率來表示感染率。

1.2.2 藥物治療試驗(yàn)

將未治愈的24頭豬，根據(jù)病情嚴(yán)重程度及精神狀況平均分為4組，第1組使用長(zhǎng)效土霉素進(jìn)行治療；第2組使用強(qiáng)力霉素進(jìn)行治療；第3組使用貝尼爾進(jìn)行治療；第4組使用青鏈霉素進(jìn)行治療。觀察4組病豬的治療情況。

1.2.3 小鼠感染豬附紅細(xì)胞體試驗(yàn)

1.2.3.1 細(xì)胞液的制備

采集經(jīng)染色鏡檢鑒定為感染附紅細(xì)胞體的患病豬血液放入離心管中，經(jīng)1 500～1 800轉(zhuǎn)/分鐘離心8分鐘，棄去上清液，加入20%pH 7.2，0.01 mol/L PBS溶液，用吸管反復(fù)吹打混勻后保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3.2 感染試驗(yàn)

將預(yù)先準(zhǔn)備的30只小鼠均勻分為6組，每組5只，進(jìn)行感染豬附紅細(xì)胞體試驗(yàn)。第一組為空白對(duì)照組，其他各組分別依次為靜脈注射組：尾根靜脈直接注射0.5mL/只的紅細(xì)胞液；皮下接種組：皮下注射0.5mL/只的紅細(xì)胞液；口服組：灌胃接種0.5 mL/只的紅細(xì)胞液；傷口感染組：體側(cè)薄皮部劃痕接種0.5 mL/只的紅細(xì)胞液；呼吸道感染組：5只小鼠和紅細(xì)胞液一并放置于密閉的通風(fēng)櫥內(nèi)一側(cè)，其中將紅細(xì)胞液放置于冰盒上的平皿中7天，每6小時(shí)更換一次冰袋，感染后第9天從小鼠尾靜脈采集血液推片染色，在400倍光學(xué)顯微鏡下觀察并記錄、統(tǒng)計(jì)豬附紅細(xì)胞體在小鼠體內(nèi)的感染情況。

2 結(jié)果

2.1 感染附紅細(xì)胞體豬臨床癥狀

感染附紅細(xì)胞體的病豬耳廓邊緣呈紫色，腹部及四肢末端明顯發(fā)紺（圖1、圖2）。

圖1 病豬耳廓邊緣呈紫色

圖2 病豬四肢明顯發(fā)紺

2.2 血液推片鏡檢結(jié)果

染色鏡檢發(fā)現(xiàn)，與正常豬群的紅細(xì)胞相比，患病豬的紅細(xì)胞邊緣不整，表面可見大小不等、形狀不一的紫紅色蟲體，即為附紅細(xì)胞體，附紅細(xì)胞體在鏡下有折光性。該病豬感染附紅細(xì)胞體較為嚴(yán)重，計(jì)算得到其感染率達(dá)到95%以上（圖3）。

圖3 感染附紅細(xì)胞體的紅細(xì)胞（左）與正常紅細(xì)胞（右）的比較

2.3 藥物治療試驗(yàn)結(jié)果

通過對(duì)4組患病豬進(jìn)行7天的連續(xù)治療后，采集其血液進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)第1組中有5頭患病豬痊愈，附紅細(xì)胞體檢測(cè)為陰性，1頭患病豬紅細(xì)胞附紅細(xì)胞體的感染率為20%；第2組6頭患病豬均痊愈，附紅細(xì)胞體檢測(cè)為陰性；第3組中有5頭患病豬痊愈，附紅細(xì)胞體檢測(cè)為陰性，1頭患病豬紅細(xì)胞附紅細(xì)胞體的感染率為60%；第4組只有2頭患病豬痊愈，附紅細(xì)胞體檢測(cè)為陰性，其他4頭患病豬紅細(xì)胞附紅細(xì)胞體的感染率分別為40%、20%、40%和50%。

2.4 小鼠感染豬附紅細(xì)胞體試驗(yàn)結(jié)果

通過靜脈注射、皮下接種、傷口感染、口服和呼吸道感染等5種途徑對(duì)小鼠進(jìn)行附紅細(xì)胞體感染試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，上述幾種方式均可以感染小鼠。在感染后第9天，采集小鼠血液、涂片、鏡檢觀察結(jié)果，其中靜脈注射組的感染效果最好，感染率高達(dá)94%，其次是傷口組感染率為91%，口服組感染率為90%，呼吸道組感染率為78%，皮下接種組的感染率較低，為23%。但是在感染后30天采血、鏡檢發(fā)現(xiàn)，高感染率組附紅細(xì)胞體感染率降低了70%～80%不等。

3 分析與討論

3.1 治療附紅細(xì)胞體感染的4種藥物的療效對(duì)比

對(duì)4種治療附紅細(xì)胞體的藥物的療效進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，除青鏈霉素外，長(zhǎng)效土霉素、強(qiáng)力霉素、貝尼爾都能對(duì)豬附紅細(xì)胞體進(jìn)行有效的治療，但是強(qiáng)力霉素臨床治療效果優(yōu)于長(zhǎng)效土霉素和貝尼爾，該藥療效迅速，可以在短時(shí)間內(nèi)使病情趨于穩(wěn)定。長(zhǎng)效土霉素是四環(huán)素類廣譜抗生素，該藥具有穩(wěn)定、副作用小、可以通過母體胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)等特點(diǎn)，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于附紅細(xì)胞體的防治。實(shí)踐證明，在飼料中添加土霉素可以降低附紅細(xì)胞體病的發(fā)病率，但是不能有效防止本病的發(fā)生。貝尼爾可以使發(fā)病動(dòng)物貧血、黃疸、腹瀉等臨床癥狀恢復(fù)正常，但是該藥的副作用大，使用時(shí)應(yīng)注意劑量和次數(shù)，對(duì)懷孕母豬使用該藥常常導(dǎo)致流產(chǎn)等，因此選擇該藥應(yīng)慎重。

3.2 附紅細(xì)胞體的感染途徑

通過小鼠感染附紅細(xì)胞體試驗(yàn)可知，豬附紅細(xì)胞體可以通過血液、傷口、口服、呼吸道及皮下注射等5種途徑傳播。由于該病為人畜共患病，人類同樣也可以經(jīng)過這5種途徑感染，因此獸醫(yī)工作者、屠宰場(chǎng)工作人員、飼養(yǎng)員等應(yīng)加強(qiáng)自身防護(hù)。本研究發(fā)現(xiàn)，靜脈注射組、傷口感染組、口服組、呼吸道感染組和皮下接種組的附紅細(xì)胞體感染率分別為94%、91%、90%、78%、23%。附紅細(xì)胞體可以經(jīng)過上述途徑直接或者間接進(jìn)入血液循環(huán)，由于進(jìn)入血液循環(huán)的途徑不同，所以導(dǎo)致該病的感染速度不同。但是對(duì)感染30天后的小鼠進(jìn)行采血、鏡檢發(fā)現(xiàn)，附紅細(xì)胞體感染率降低了70%～80%不等，表明本試驗(yàn)分離的附紅細(xì)胞體致病性較弱，這與馮會(huì)權(quán)等[8]關(guān)于不同季節(jié)附紅細(xì)胞體的致病性也不同的研究結(jié)果基本相符。豬附紅細(xì)胞體病為季節(jié)性疾病，多發(fā)性季節(jié)為9、10月份[9]，但是本次發(fā)病為8月初，這可能與新疆晝夜溫差大的氣候條件有一定關(guān)系。

4 綜合防治措施

豬附紅細(xì)胞體是主要寄生于豬血液及骨髓中的一種微生物。在我國(guó)的大部分豬場(chǎng)豬體內(nèi)都可以檢測(cè)到附紅細(xì)胞體，只是感染比例不同。附紅細(xì)胞體類似于機(jī)體內(nèi)的正常菌群，在畜群健康的時(shí)候，它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)維持一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的平衡狀態(tài)；但當(dāng)畜群自身的免疫能力下降或者受外界條件刺激，這種平衡狀態(tài)可能被破壞，附紅細(xì)胞體會(huì)大量繁殖，從而引起該病的發(fā)生。

豬附紅細(xì)胞體病沒有典型的病理變化和臨床癥狀，該病的診斷容易和豬瘟、仔豬副傷寒、豬弓形體病等混淆，所以很難被及時(shí)診斷出并治療。到目前為止，防治豬附紅細(xì)胞體病的疫苗還未出現(xiàn)，所以控制該病的理念是“防重于治”。

創(chuàng)造良好的衛(wèi)生環(huán)境，建立科學(xué)的飼養(yǎng)管理方法是控制豬附紅細(xì)胞體病的有效手段。在實(shí)施免疫注射、斷尾、打耳號(hào)、閹割等飼養(yǎng)管理程序時(shí)，器械要嚴(yán)格消毒。該病對(duì)各階段的豬群均有危害，在北方地區(qū)該病一般在9、10月份多發(fā)，所以應(yīng)在本病的流行季節(jié)給予預(yù)防用藥，有的養(yǎng)殖戶使用土霉素堿粉、磺胺嘧啶粉進(jìn)行拌料預(yù)防取得了一定的效果。另外平時(shí)應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少對(duì)豬群的各種應(yīng)激，及時(shí)殺滅蚊蟲等各種吸血昆蟲。

對(duì)感染附紅細(xì)胞體的母豬進(jìn)行及時(shí)監(jiān)測(cè)及有效防治是控制本病的重要措施。在對(duì)感染附紅細(xì)胞體的母豬進(jìn)行調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)，感染附紅細(xì)胞體的母豬會(huì)將該病傳給仔豬，這可能是導(dǎo)致仔豬附紅細(xì)胞體病高發(fā)的重要原因。另外，該病還經(jīng)常通過注射針頭傳播，因此，在注射疫苗或藥物時(shí)，應(yīng)注意及時(shí)更換針頭。

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S852.7

B

1673-4645(2014)04-0042-04

2013-10-21

齊向濤（1987-），男，陜西西安人，碩士研究生，主要從事獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)工作*

齊亞銀（1980-），男，副教授，主要從事動(dòng)物傳染病的診斷與防治工作