Y染色體微缺失對(duì)卵胞漿內(nèi)單精子注射胚胎發(fā)育和妊娠結(jié)局的影響

郭 麗

上海解放軍455醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心（上海 200052）

Y染色體微缺失對(duì)卵胞漿內(nèi)單精子注射胚胎發(fā)育和妊娠結(jié)局的影響

郭 麗

上海解放軍455醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心（上海 200052）

目的探討 Y 染色體微缺失對(duì)卵胞質(zhì)內(nèi)單精子注射（ICSI）胚胎發(fā)育和妊娠結(jié)局的影響。方法回顧19 例Y 染色體微缺失患者（研究組）進(jìn)行的23 個(gè)治療周期的胚胎和臨床結(jié)局資料, 與同期無(wú)Y 染色體微缺失（對(duì)照組）的少弱精子癥或無(wú)精子癥的86個(gè)治療周期的相應(yīng)資料進(jìn)行比較，分析兩組患者在受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、生化妊娠率、臨床妊娠率、胚胎種植率、早期流產(chǎn)率的差異。結(jié)果研究組和對(duì)照組相比，受精率（85.0% vs 89.2%）、卵裂率（96.0% vs 95.3%）、優(yōu)質(zhì)胚胎率（68.3% vs 66.7%）、生化妊娠率（47.8% vs 50.0%）、臨床妊娠率（43.5% vs 41.6%）、胚胎種植率（22.9% vs 20.8%）、早期流產(chǎn)率（10.0% vs 7.5%）差異比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 Y染色體微缺失對(duì)胚胎質(zhì)量和妊娠結(jié)局無(wú)顯著性影響。

Y染色體微缺失; 精子注射, 細(xì)胞質(zhì)內(nèi); 胚胎發(fā)育; 妊娠結(jié)局

人類(lèi)Y染色體長(zhǎng)臂上存在著無(wú)精子基因（azoospermia factor, AZF），它由AZFa、AZFb 和AZFc 3個(gè)區(qū)域構(gòu)成，這些區(qū)域中的任何一個(gè)出現(xiàn)缺失都可引起少弱精子癥或無(wú)精子癥，在無(wú)精子癥或嚴(yán)重

少弱精子癥患者中發(fā)病率在7%～15%[1]。Y染色體微缺失患者可通過(guò)卵胞漿內(nèi)單精子注射（intracytoplasmi sperminjection, ICSI）-胚胎移植（embryo transfer ET）技術(shù)獲得下一代，但在ICSI -ET中AZF基因微缺失是否影響體外受精患者的胚胎質(zhì)量和治療結(jié)局的報(bào)道不多，故本研究回顧性分析了19 例Y染色體微缺失患者在我院生殖中心進(jìn)行的23個(gè)ICSI周期，分析Y染色體微缺失對(duì)胚胎質(zhì)量及妊娠結(jié)局的影響。

材料與方法

一、研究對(duì)象

收集2012年1月至2014年7月間在本中心進(jìn)行ICSI -ET助孕患者夫婦中男方檢測(cè)顯示為Y 染色體微缺失且排除女方不孕的19例23個(gè)周期病例資料為研究組，并收集同期以男方嚴(yán)重少精子癥或無(wú)精子癥為不孕因素的無(wú)Y 染色體微缺失的96個(gè)周期為對(duì)照組。所有患者均進(jìn)行常規(guī)的染色體核型分析和Y 染色體微缺失的檢測(cè)。

二、IVF-ET治療

均采用常規(guī)長(zhǎng)方案超促排卵，在黃體中期使用促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑（GnRHa，商品名：達(dá)菲林，3.75 mg/支，瑞士雪蘭諾公司）1.25 mg進(jìn)行降調(diào)節(jié)，到下次月經(jīng)第3～5日開(kāi)始使用促性腺激素（商品名：果納芬，75 IU/支，瑞士雪蘭諾公司）150～225 IU啟動(dòng)促排卵, 當(dāng)主導(dǎo)卵泡直徑達(dá)18mm時(shí)注射人絨毛膜促性腺激素（hCG，麗珠醫(yī)藥）4 000～10 000 U，36h后陰道B超介導(dǎo)下穿刺取卵?；颊卟捎肐CSI受精，在取卵后第3天移植胚胎，移植14d后驗(yàn)?zāi)騢CG,陽(yáng)性者為生化妊娠。4周后陰道B超檢查, 檢測(cè)到孕囊者確診為臨床妊娠。

三、分析指標(biāo)

受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、生化妊娠率、臨床妊娠率、胚胎種植率、早期流產(chǎn)率。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差或率表示，應(yīng)用SPSS 17.軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析, 兩組參數(shù)采用t檢驗(yàn)，兩組率的比較采用x2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、缺失類(lèi)型

19例Y染色全微缺失患者缺失類(lèi)型分為4類(lèi)：（1）AZFa部分缺失 （1例） ；（2）AZFb部分或全部缺失（3例）；（4）AZFc部分或全部缺失（1例）；（4）AZFb區(qū)缺失伴c區(qū)缺失 （2例）。

二、研究組和對(duì)照組的基本情況比較

兩組患者基本情況比較見(jiàn)表1。兩組男、女方在年齡、不孕年限、基礎(chǔ)卵泡刺激素（FSH）、促性腺激素（Gn）用量相近，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

三、兩組治療結(jié)局比較

兩組患者ICSI 治療結(jié)局比較見(jiàn)表2。兩組患者的平均獲卵數(shù)和移植周期數(shù)差異比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組的受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、生化妊娠率、臨床妊娠率、胚胎種植率差異比較也均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），研究組的流產(chǎn)率稍高于對(duì)照組，但差異比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 兩組患者一般情況的比較（±s）

表1 兩組患者一般情況的比較（±s）

年齡(歲) 周期數(shù) 不孕年限 自然流產(chǎn)史 基礎(chǔ)FSH Gn用量男 女 (個(gè)) (年) n(%) (mIU/mL) (IU)研究組 33.2±4.1 33.2±4.1 23 4.1±2.3 8.7(2) 8.3±2.3 1881.6±204對(duì)照組 33.2±4.1 30.5±4.0 96 3.8±2.1 10.5(10) 7.5±3.3 1806.6±214

表2 兩組患者治療結(jié)局的比較

討 論

Y 染色體長(zhǎng)臂的AZF 區(qū)是微缺失的好發(fā)區(qū)域，AZF不同區(qū)域的基因缺失可導(dǎo)致精子在不同的形成階段發(fā)生障礙，令精子數(shù)量減少，主要表現(xiàn)為少弱精子癥、嚴(yán)重少弱精子和無(wú)精子癥。

IVF-ET技術(shù)能解決配偶卵子的受精問(wèn)題，但染色體微缺失是否影響其合子的卵裂、發(fā)育、著床、繼續(xù)妊娠能力，目前的報(bào)道不一。本研究結(jié)果表明AZF 缺失患者ICSI 周期的受精率、卵裂率及胚胎質(zhì)量與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與國(guó)內(nèi)學(xué)者王麗娟等[2]、吳畏等[1]、及國(guó)外學(xué)者Patrat等[3]的研究結(jié)論相同。而Van Golde 等[4]研究Y 染色體微缺失與無(wú)Y 染色體微缺失ICSI 治療者比較，前者受精率、胚胎質(zhì)量明顯低于后者，提示Y 染色體AZFc 微缺失影響ICSI 治療者的受精率和胚胎質(zhì)量。因此關(guān)于這個(gè)問(wèn)題仍需要大量的研究來(lái)證實(shí)。

Y染色體的完整性在維持胚胎妊娠中是否發(fā)揮作用，國(guó)內(nèi)外學(xué)者得出了不同的結(jié)論。Mateu 等[5]認(rèn)為Y 染色體微缺失患者非整倍體精子比例增高,導(dǎo)致非整倍體胚胎的比例增加，流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)增加。Dewan 等[6]研究發(fā)現(xiàn)AZFc 區(qū)微缺失的流產(chǎn)發(fā)生率明顯高于男性不育患者及無(wú)流產(chǎn)史的正常生育男性；而吳畏等[1]、Karaer等[7]均認(rèn)為, Y 染色體的微缺失與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)無(wú)關(guān)聯(lián)。本研究顯示研究組和對(duì)照組之間早期流產(chǎn)率并沒(méi)有顯著性差異,提示Y染色體微缺失沒(méi)有影響配偶的繼續(xù)妊娠。Dewan 等[6]認(rèn)為AZF缺失是否會(huì)導(dǎo)致妊娠丟失的不同結(jié)論可能與選擇的序列標(biāo)簽位點(diǎn)（sequencetagged site, STS）或與人種的差異有關(guān)。Komori等[8]和McLachlan等[9]研究表明, Y染色體微缺失可以通過(guò)ICSI 傳遞給男性后代并且可能在傳遞過(guò)程中出現(xiàn)擴(kuò)大。這提示我們需關(guān)注AZF 區(qū)部分缺失患者配偶的繼續(xù)妊娠情況。并建議在進(jìn)行試管嬰兒前行遺傳學(xué)咨詢(xún)。

1 張雅君, 盧實(shí), 劉琳, 等. 無(wú)精子癥、重度少弱精子癥患者染色體核型與Y染色體微缺失發(fā)生率的研究. 中國(guó)男科學(xué)雜志 2014; (7): 44-48

2 王麗娟, 宋成, 黃菊, 等. Y染色體微缺失對(duì)卵胞質(zhì)內(nèi)單精子注射胚胎情況和臨床結(jié)局的影響. 生殖與避孕2012; 32(7): 457-463

3 Patrat C, Bienvenu T, Janny L,et al. Clinical data and parenthood of 63 infertile and Y-microdeleted men.Fertil Steril2010; 93(3) : 822-832

4 Van Golde RJ, Wetzels AM, de Graaf R,et al. Decreased fertilization rate and embryo quality after ICSI in oligozoospermic menwith microdeletions in th azoospermia factor region of the Ychromosome.Hum Reprod2001; 16(2) : 289-292

5 Mateu E, Rodrigo L, Martinez MC,et al. Aneuploidies inembryos and spermatozoa from patients with Y chromosome microdeletions.Fertil Steril2010; 94(7) 2874-2877

6 Dewan S, Puscheck EE, Coulam CB,et al. Y-chromosome microdeletions and recurrent pregnancy loss.Fertil Steril2006; 85(2): 441-445

7 Karaer A, Karaer K, OzaksitG,et al.Ychromosome azoospermia factor region microdeletions and recurren pregnancy loss.Am J Obstet Gynecol2008; 199(6):662. e1-e5

8 Komori S, Kato H, Kobayashi S,et al. Transmission of Y chromosomal microdeletions from father to son through intracytoplasmic sperm injection.J Hum Genet2002; 47(9): 465-468

9 McLachlan RI, O'Bryan MK. Clinical Review #: State of the art for genetic testing of infertile men.J Clin Endocrinol Metab2010; 95(3): 1013-1024

（2014-09-28收稿）

Effects of the Y Chromosome microdeletions on the embryo development and clinical outcome of the ICSI treatment cycle

Guo Li
Center for Reproductive Medicine, 455 Hospital of PLA, Shanghai 200052, China

ObjectiveTo determine the effects of Y chromosome microdeletion on the embryo development and clinical outcome of the ICSI treatment cycle.MethodsThe embryo development and clinical outcome of 19 patients with Y microdeletions who attempted 23 ICSI cycles at our center were retrospectively analyzed in the study. The patients in study group were matched to 86 cycles at the same time who had either severe oligozoospermia or azoospermia with normal Y chromosomes (control group). The differences between the two groups were compared including the average age, duration of infertility, the rate of natural abortion history, number of oocytes retrieved, fertilization rates、good embryo rate, number of embryos transferred, implantation rate, clinical pregnancy rate，early abortion rate.ResultsThere were no signif cant differences between Groups in the rates of fertilization (85.0% vs 89.2%), the cleavage (96.0% vs 95.3%), good embryos (68.3% vs 66.7%), biochemical pregnancy (47.8% vs 50.0%), clinical pregnancy (43.5% vs 41.6%), implantation (22.9% vs 20.8%), and early abortion. (10.0% vs 7.5%) (P>0.05).ConclusionY chromosome microdeletion has no signif cant effect on the embryo development and clinical outcome of the ICSI treatment cycle.

Y-microdeletion; sperm injections, intracytoplasmic; embryonic development; pregnancy outcome

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.12.004

R 698.2