常用顯現(xiàn)技術(shù)對汗?jié)撝赣≈屑谆奖窚y定的影響初探

張 婷 楊瑞琴

（中國人民公安大學(xué) 北京 100038）

常用顯現(xiàn)技術(shù)對汗?jié)撝赣≈屑谆奖窚y定的影響初探

張 婷 楊瑞琴

（中國人民公安大學(xué) 北京 100038）

探討并比較了汗?jié)撝赣★@現(xiàn)技術(shù)對指印中甲基苯丙胺檢測的影響。在對經(jīng)粉末刷顯法、“502”薰顯法等6種方法顯現(xiàn)后指印中甲基苯丙胺的提取方法和儀器分析條件進行考察基礎(chǔ)上，建立了指印顯現(xiàn)處理后，其中痕量毒品成分的檢簽擦拭，超聲波液-液提取，液相色譜-質(zhì)譜法（LC-MS/MS）測定方法。

汗?jié)撝赣?顯現(xiàn) 甲基苯丙胺 LC-MS/MS

在刑事案件中，發(fā)現(xiàn)和提取指紋對于獲取案件證據(jù)、提供案件線索具有重要意義?，F(xiàn)場汗?jié)撝赣〉陌l(fā)現(xiàn)和提取首先要通過物理法、化學(xué)法或激光法等顯現(xiàn)方法處理后，并經(jīng)拍照、膠帶轉(zhuǎn)印等方法固定指印物證。但是在一些毒品案件中，對接觸毒品的指印除了進行指紋形態(tài)比對外，還要進行指印中毒品成分的分析。因此對常見顯現(xiàn)技術(shù)處理后的指印中毒品成分的分析具有實際應(yīng)用價值。有資料表明對于可疑現(xiàn)場指印，經(jīng)茚三酮浸泡或者涂抹處理顯現(xiàn)后的牛皮紙袋上的指印中可以繼續(xù)進行DNA檢測。顯現(xiàn)技術(shù)處理后對指印中甲基苯丙胺分析的影響程度，很少有人進行研究。

常見毒品的分析方法有氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、光譜法、化學(xué)成像和質(zhì)譜成像法等。這些分析方法均可以對指紋中接觸性化學(xué)物質(zhì)進行分析，此研究將在刑事偵查、嫌疑人行為刻畫、司法訴訟等領(lǐng)域發(fā)揮潛在的重要作用。

1 實驗部分

1.1 實驗材料

甲醇（色譜純）購自天津市四友精細化學(xué)品有限公司；乙酸銨購自Dima公司；乙酸（分析純）購自天津市化學(xué)試劑六廠；KQ-200VDE型雙頻數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；HC-3018R高速冷凍離心機（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司）。銀粉、金粉、磁性粉、502膠水、指印提取膠帶均購自公安部物證鑒定中心、二氧化鈦納米粉末由本實驗室制備。

1.2 儀器及其設(shè)置

液相色譜-電噴霧離子阱質(zhì)譜系統(tǒng)由Finnigan液相色譜儀（San Jose，CA，USA）和LXQ離子阱質(zhì)譜儀（Thermo Fisher，USA）組成；色譜柱為Thermo Gold ODS C18（150mm×2.1mm，5μm）；柱溫為35℃；流動相為甲醇-0.2%冰乙酸水溶液（含有5mM乙酸銨，pH為4.0）（70∶30，v/v），流速為0.2mL/min；進樣量為2μL。

質(zhì)譜條件：電噴霧離子化源（ESI），正離子方式檢測，全離子掃描模式，掃描范圍為50～200Da；毛細管溫度為350℃，霧化氣、加熱輔助氣和吹掃氣流量分別為30.00、8.00和2.00L/min；源電壓、毛細管電壓和套管透鏡補償電壓分別為5.00kv、1.00v和5.00v，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式。

1.3 實驗方法

樣品制備：取適量甲基苯丙胺鹽酸鹽與味素、食鹽、砂糖、咖啡因按照一定比例（1∶9，v/v）混合后，研磨成粉末狀，得到1號、2號、3號和4號樣品。

樣品前處理：志愿者手指分別用肥皂、清水清洗干凈后，用潔凈毛巾擦干后，將其食指在制樣品中按捺10s后，用干濾紙擦掉多余的晶體（肉眼觀察無晶體可見），隨后，將食指捺印在潔凈載玻片上30s后用6種常見方法顯現(xiàn)潛指印。棉簽經(jīng)100μL水潤濕后，擦拭刷顯指印30次，將棉簽放入塑料離心管中，加入0.25mL甲醇，超聲3min，經(jīng)0.22μm過濾后，供LC-MS/MS分析。

顯現(xiàn)潛指印方法：金粉、銀粉、二氧化鈦粉、磁性粉，用粉刷刷顯法；502膠水用濾紙貼附薰顯法；膠帶直接轉(zhuǎn)印顯現(xiàn)潛指印。

空白對照指印：未接觸甲基苯丙胺毒品的指印，經(jīng)顯現(xiàn)及處理技術(shù)后，供對照實驗使用。

2 實驗結(jié)果

2.1 指印顯現(xiàn)結(jié)果

含有毒品的汗?jié)撝赣≡诓Ａ鲜褂贸Ｓ玫闹赣》椒@現(xiàn)后，在自然光下拍照（1200萬像素），結(jié)果見圖1所示。

圖1 玻璃上含有毒品的汗指印顯現(xiàn)結(jié)果

2.2 顯現(xiàn)后提取指印中毒品的LC-MS/MS檢測

每組含有毒品成分的指印平行進行2次操作，按照“1.3實驗方法”顯現(xiàn)及處理后，在優(yōu)化實驗條件下進行LC-MS/MS分析后，得到甲基苯丙胺的色譜峰面積，見表1。

3 討論

3.1 LC-MS/MS分析方法考察

LC-MS/MS分析甲基苯丙胺，在正離子模式下得到準(zhǔn)分子離子[M+H]+，m/z為150，將該分子離子進行碰撞誘導(dǎo)解離（CID） 分析，得到二級全掃描質(zhì)譜，甲基苯丙胺的子離子為m/z119、m/z91、m/z 58，由此確定定性分析離子對為m/z150/119、m/z 150/91，定量離子對為m/z150/119，如圖2所示。

圖2 甲基苯丙胺的SRM圖

3.2 提取條件考察

取濃度為5μg/mL的甲基苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)溶液10μL，添加在濕潤的棉簽上后，將棉簽轉(zhuǎn)移至塑料管中加入0.25mL甲醇，考察超聲波提取條件。通過正交實驗設(shè)計L（33），對超聲時間（1min，3min和10min）、超聲溫度（15℃、25℃、35℃）和超聲頻率（2000w、1600w、1000w）進行了考察。結(jié)果表明：溫度對提取率影響較大，溫度高則提取效率高，超聲時間對提取率影響也較大，超聲時間較長時提取率有降低，最佳提取條件為35℃，2000W，超聲3min。

為了考察指印提取材料的影響，實驗中選擇10μg/mL甲基苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加在比色白瓷板孔中5μL，待溶液自然干燥后，用濾紙、棉簽、濕巾、一次性PCE塑料4種提取材料，在6種狀態(tài)下提取毒品，經(jīng)超聲波提取、離心、過膜后，取上清液進LC-MS/MS分析。同樣濃度的甲基苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)溶液直接添加在提取材料上，經(jīng)超聲提取等操作后，LC-MS/MS分析計算峰面積。根據(jù)孔板中擦拭與直接添加測得的峰面積相比，計算各種提取材料的提取效率，見表2。

表2 不同提取材料的提取效率（添加濃度50ng，n=2）

擦拭或者塑料薄膜靜電吸附在提取能力上差別很大。干燥材料擦拭發(fā)的提取率不到7%，因此后來采用去離子水潤濕濾紙和棉簽擦拭的方法，其中提取率最高的為濕潤濾紙，其次為濕巾、濕潤棉簽，但從實踐的方便性上選擇濕潤棉簽擦拭法。

3.3 顯現(xiàn)方法考察

本文選取了6種常用指印顯現(xiàn)方法，均是最為常用的物理顯現(xiàn)法和化學(xué)顯現(xiàn)法，其中物理顯現(xiàn)法通過粉末與汗液中的多種成分發(fā)生吸附作用而顯現(xiàn)指印，“502”化學(xué)顯現(xiàn)法通過502的主要成分α-氰基丙烯酸乙酯與指印中的水進行聚合，形成固體狀的聚合物從而顯現(xiàn)指印。這些顯現(xiàn)方法顯現(xiàn)指印后，提取與處理指印后，進行液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析，結(jié)果見表1。結(jié)果表明：選用的6種顯現(xiàn)材料和顯現(xiàn)方法對指印接觸性甲基苯丙胺成分的定性測定無影響。

3.4 基質(zhì)效應(yīng)考察

為了考察指印汗液的基質(zhì)效應(yīng)，本文首先分別在含有空白指印痕量汗液的濕棉簽上添加濃度為10μg/mL的甲基苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5μL和1μL，同樣在不含有指印汗液的濕棉簽上添加同樣量的甲基苯丙胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，通過比較有汗液棉簽和無汗液棉簽兩種情況下甲基苯丙胺含量測定是否有影響。結(jié)果表明：指印痕量汗液中的干擾雜質(zhì)很少，不影響分析檢測。另外，顯現(xiàn)材料在濕棉簽擦拭的前處理過程中，經(jīng)過高速離心和過膜處理后，不影響分析檢測。

3.5 指印捺印次數(shù)考察

選擇光滑玻璃作為指印承載體，分別以指印樣本按壓單次和連續(xù)按壓5次后的樣品作為分析對象。將潛指印按照1.3的指紋顯現(xiàn)和檢材前處理方法進行操作，經(jīng)LC-MS/MS檢測，以回收率作為縱坐標(biāo)，如圖3所示。

圖3 連續(xù)5次捺印并顯現(xiàn)后的甲基苯丙胺檢測變化

4 結(jié)論

汗?jié)撝赣≈卸酒芳捌浯x物成分的檢測可通過靈敏的分析儀器實現(xiàn)。本研究發(fā)現(xiàn)：汗?jié)撝赣〗?jīng)過顯現(xiàn)后毒品的量均減少，但通過與空白指印樣本的比較，即使少量的接觸性毒品成分的指印與空白指印也是有非常顯著的差異。本文分析方法在公共安全、邊防檢查、刑事案件偵查等領(lǐng)域具有潛在且重要的應(yīng)用價值。本文所建立的方法，準(zhǔn)確性高、靈敏度好，同時具有分析時間短、操作簡便的優(yōu)點。

[1]吳維蓉．刑事物證技術(shù)學(xué)[M]．北京：警官教育出版社，1998.

[2]郝金萍，邵麗芳，樸相杰，等．茚三酮顯現(xiàn)汗?jié)撝赣〉娜N操作方法對DNA檢測的影響[J]．刑事技術(shù)，2013，(2).

[3]A.Girod，R.Ramotowski，C.l.Weyermann et al.Composition of fingermark residue：A qualitative and quantitative review[J].Forensic Science International, 2012，223.

[4]N.E.Archer,Y.Charles，S.Jickells，et al. Changes in the composition of latent fingerprint residue with time after deposition on the surface[J].Forensic Sci. Int，2005，154.

[5]K.A.Mountfort,H.Bronstein，S.M.Jickells,et al.Identification of oxidation products of squalene in solution and in latent fingerprints by ESI-MS and LC/APCI-MS[J].Anal.Chem，2007，79.

[6]王繼芬，余靜，孫興龍，等．毒品及其常見添加成分的拉曼光譜快速分析[J].光散射學(xué)報，2012, 24(3).

[7]王繼芬，余靜，孫興龍．紅外吸收光譜法快速分析甲基苯丙胺毒品中的添加成分[J]．光散射學(xué)報，2010，22(4).

[8]M.I.Szynkowska，K.Czerski，J.Rogowski，et al.ToF-SIMS application in the visualization and analysis of fingerprints after contact with amphetamine drugs[J].ForensicSciInt.2009，184.

[9]D.R.Ifa，N.E.Manicke，R.G.Cooks，et al. Mass spectrometric imaging of lipids using desorption electrospray spary iron[J].Science，2008.

[10]F.Rowell，K.Hudson，J.Seviour.Detection of drugs and their metabolites in dusted latent fingermarks by massspectrometry[J].Analyst，2009，134.

（責(zé)任編輯：于 萍）

D918.39

A

2014-4-25

張婷（1975-），女，遼寧沈陽人，中國刑警學(xué)院法化學(xué)系講師，中國人民公安大學(xué)2012級博士研究生，主要從事毒物及毒品方面的教學(xué)、科研和鑒定工作。