不同產(chǎn)地、不同生長期紅景天中總多糖的含量分析

何寶佳，魏 蔚

（皖南醫(yī)學院，安徽 蕪湖 241000）

不同產(chǎn)地、不同生長期紅景天中總多糖的含量分析

何寶佳，魏 蔚

（皖南醫(yī)學院，安徽 蕪湖 241000）

目的：測定不同產(chǎn)地、不同采收期紅景天總多糖含量變化，以確定其最佳采收期.方法：采用蒽酮-硫酸比色法，以葡萄糖作為對照品，在620nm波長下測定吸光度，對不同產(chǎn)地、不同采收期紅景天多糖含量進行測定.結(jié)論：不同產(chǎn)地紅景天的總多糖含量不同，西藏大花紅景天的含量最高，然后依次是青海大花紅景天，西藏圣地紅景天，四川大花紅景天，臨江高山紅景天.臨江不同采收期的高山紅景天的總多糖含量有差異，建議采收高山紅景天的適宜時間為7-9月，尤以9月左右為宜.從回收率和精密度可看出,蒽酮－硫酸比色法是一種常用的測定方法，該方法簡便、可靠、易行.

紅景天；總多糖；含量分析

紅景天系薔薇目景天科（Crassulaceae）紅景天屬（Rhodiola），多年生草本或亞灌木植物的干燥根及根莖[1]，紅景天屬植物,素有“高原人參”和“雪山仙草”之稱.長期以來,民間用其根莖熬水、泡酒可消除疲勞,抵御嚴寒，公元1200年的著名藏醫(yī)經(jīng)典《四部醫(yī)典》中就記載紅景天“性涼、清熱、滋補元氣”,稱紅景天治病具有神效；《晶珠本草》、《藏藥圖鑒》中記載紅景天能治療咳血和婦女白帶等病癥；《本草綱目》草部第20卷中注明紅景天為“草本上品”,主要功效是扶正固本、補氣養(yǎng)血、清熱潤肺[2].在國外前蘇聯(lián)將紅景天作為“適應(yīng)原”樣藥物，用于宇航員、飛行員、潛水員、運動員等消除疲勞，增強體力.在此啟迪下，近年來國內(nèi)將紅景天作為強身健體的藥物逐步進行深入研究和開發(fā)，已有了多種制劑、保健品及飲料[3].現(xiàn)代藥理學研究也證明紅景天屬植物具有抗輻射、預防高原反應(yīng)、抗缺氧[4]、抗衰老[5]、抗腫瘤[6]、提高記憶力[7]等作用.王秀清等[48]研究了灌喂紅景天提取物后感染柯薩奇B5病毒的小鼠脾臟NK細胞活性及血清酶學變化，發(fā)現(xiàn)紅景天對柯薩奇B5病毒有一定的抵抗作用.樸花等[8]研究表明紅景天多糖對增強免疫功能有顯著作用，并認為紅景天多糖可作為一種免疫調(diào)節(jié)劑進行開發(fā).閻奇等[9]也證實紅景天多糖對抗病毒有明顯效果.因此，本文研究不同產(chǎn)地、不同采收期紅景天總多糖的含量變化，以確定其最佳采收期，為更好的開發(fā)利用紅景天資源提供理論依據(jù)，并建立其分析方法,為紅景天藥材的鑒定、質(zhì)量標準的建立以及質(zhì)量控制提供一定的實驗依據(jù).

1 儀器設(shè)備與試劑

1.1 儀器

722 S分光光度計(Spectrophotometer)(上海精密科學儀器有限公司),KQ-250DB型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司),電子計數(shù)天平(500g/0.001g)(金羊天平儀器廠),百靈LAI14型電子天平(110g/0.0001g)(常熟市百靈天平儀器有限公司) 101-2A型數(shù)顯電熱鼓風干燥箱(上海錦屏儀器儀表有限公司通州分公司)

1.2 試劑

蒽酮、葡萄糖、濃硫酸、鹽酸、無水乙醇等，均為分析純.

2 實驗方法

2.1 樣品來源

西藏大花紅景天、青海大花紅景天、西藏圣地紅景天、四川大花紅景天、臨江高山紅景天，臨江不同采收期高山紅景天分別為：8月25日、8月30日、9月5日、9月15日、9月25日、9月30日；以上均由吉林農(nóng)業(yè)大學胡全德教授鑒定為景天科（Crassulaceae）紅景天屬（Rhodiola）植物紅景天(Rhodiola crenulata).

2.2 紅景天多糖類物質(zhì)的提取

2.2.1 可溶性多糖的提取

精密稱取紅景天粉末(恒重)0.500g,每個樣品都稱取三份（三次平行）,分別置于100ml具塞三角瓶中，加80%EtoH 45ml，浸泡30min，超聲提取30min，靜置過濾，重復提取1次，過濾(保存濾渣)，兩次濾液置100ml容量瓶中，以80%EtoH定容至刻度，備用.

2.2.2 粗多糖的提取

將上步中提取后的濾渣蒸干，加2%的鹽酸45m l，置沸水浴中提取lh,充分放冷，于100ml容量瓶中濾過，重復提取1次，過濾，洗滌濾紙，以2% HC1定容至刻度,備用.

2.3 顯色劑（蒽酮-濃硫酸）的制備

取98%的濃硫酸76m1，稀釋成l00ml溶液；精密稱取蒽酮0.1000g，放入100ml容量瓶中，逐漸加入上述配制的硫酸溶液至刻度并搖勻，冷卻至室溫，備用(需臨用前現(xiàn)配).

2.4 標準曲線的制備

2.4.1 標準曲線試液的制備

葡萄糖標準液:將葡萄糖于60℃烘1h，再逐漸升溫至105℃干燥至恒重.精密稱取10.55mg,置100ml容量瓶中,用蒸餾水溶解并稀釋至刻度，取16支試管，除空白試液外,其余5組都做三次平行實驗,按表2加試劑，于620nm處測定吸光度，記錄數(shù)據(jù),見表1，得回歸方程：Y=7.8038X+0.0015，R2= 0.9991.

表1 標準曲線試液的制備(單位:ml)

2.4.2 標準曲線的繪制

圖1 標準曲線圖

2.4.3 樣品溶液的制備與測定

2.4.3.1 可溶性多糖的測定 各取可溶性多糖提取液5.0ml,分別置于25m1容量瓶中，用80%的乙醇定容至刻度，混勻.分別取1.0ml可溶性多糖提取液加入具塞試管中,再加入蒽酮-濃硫酸試劑5.0ml，混勻.同時另取一支具塞試管加80%EtoH，再加入蒽酮-濃硫酸試劑5.0m l,作為空白實驗.置沸水浴中加熱10min，冷卻至室溫.于620nm處測定吸光度.

2.4.3.2 粗多糖的測定 各取粗多糖提取液2.0ml，分別置于25m1容量瓶中，用2%的鹽酸定容至刻度，混勻，分別取1.0ml粗多糖提取液加入具塞試管中,再加入蒽酮-濃硫酸試劑5.0m1,混勻，同時另取一支具塞試管加入2%的鹽酸1.0m1，再加入蒽酮-濃硫酸試劑5.0ml,混勻,作空白實驗.置沸水浴中加熱10min，冷卻至室溫，于620nm處測定吸光度.

3 結(jié)果

表2 紅景天樣品中不同產(chǎn)地總多糖含量(%)測定結(jié)果

不同產(chǎn)地不同采收期紅景天可溶性多糖及粗多糖含量比較

不同產(chǎn)地不同采收期紅景天總多糖含量比較

4 討論

4.1 不同產(chǎn)地紅景天的總多糖含量不同，其中西藏大花紅景天的含量最高，然后依次是青海大花紅景天，西藏圣地紅景天，四川大花紅景天，臨江高山紅景天.臨江不同采收期的高山紅景天的總多糖含量有差異，建議采收高山紅景天的適宜時間為7-9月，尤以9月左右為宜.實驗中9月15日所測總多糖含量存在較大誤差，粗多糖測定結(jié)果偏差很大，可重復平行實驗以校正之.紅景天多糖含量較高，而對多糖的藥用價值研究尚淺，值得以后進一步研究.

4.2 由于紅景天中其主要有效成分為黃酮類、苷類和多糖，所以不能只通過多糖的含量來評價藥材質(zhì)量，應(yīng)以多指標綜合評價藥材的質(zhì)量.綜合其他實驗數(shù)據(jù)，從藥用價值來看，西藏大花紅景天的藥用價值要優(yōu)于其他產(chǎn)地紅景天，而臨江地區(qū)紅景天的藥用價值還需要進一步深度研究.

4.3 從回收率和精密度可看出,采用蒽酮－硫酸比色法，此方法是一種常用的方法，其原理是利用糖類遇濃硫酸脫水后生成糖醛或其衍生物，可與蒽酮試劑縮合，反應(yīng)后溶液呈藍綠色，于620nm處有最大吸收，顯色深度與多糖的含量呈線性關(guān)系；該方法簡便，可靠、易行.

〔1〕龔晨睿，李字紅，馬良.紅景天復合制劑抗疲勞作用研究[J].衛(wèi)生研究,2002，31(5)：397．

〔2〕崔艷梅，婁安如，趙長琦.紅景天屬植物化學成分及藥理作用研究進展[J].北京師范大學學報(自然科學版)，2004，44（3）：17.

〔3〕宋桂英,李九丹.不同的紅景天不盡一樣的療效[J].中國民族民間醫(yī)藥雜志，2004，67(3)：9～12.

〔4〕Furmanova M．，B．Kedzia，M．Hartw ieh，et a1．Phytochemical and pharmacological properties of Rhodiolarosea L[J]．Herba Poloniea XLV，1999，2：108-113．

〔5〕Saratikov A.S．，Krasnov E．A.，Chnikina L.A.，et a1．Rhodioloside，a new glycoside from Rhodiola rosea and its pharmacological properties[J]．Pharmazie，1968，23：392-395．

〔6〕Udiintsev S N，Shakhov V Pt The role of humoral factors ofregenerating liver in the development of experimental tumors and the effect of Rhodiola rosea rxtract on this process [J]．Neoplasma，1991，38：323．

〔7〕V．D．Petkov，D．Yonkov，A．M osharoff，et a1．Effects ofalcohol aqueous extract from Rhodiola rosea L roots onlearning and memory[J]．Acta Physiological etPharmacological Bulgarica．1986，12(1)：3-16．

〔8〕樸花.高山紅景天多糖對小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用[J].延邊大學醫(yī)學學報,2000,23(4):251～255.

〔9〕閻奇.硫酸化高山紅景天多糖對感染病毒小鼠血液SOD和IPO的影響[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學雜志,1997,3(6):28～31.

R284

A

1673-260X（2014）02-0039-03