當(dāng)歸-川芎配伍對急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響

孔德平吳穎湯倩吳德康

（1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院，江蘇南京 210004；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇南京 210029）

當(dāng)歸-川芎配伍對急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響

孔德平1吳穎2湯倩1吳德康2

（1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院，江蘇南京 210004；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇南京 210029）

目的：比較當(dāng)歸-川芎藥對不同配比對急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響。方法：SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組和歸芎不同配比給藥組，分別灌胃相應(yīng)藥物或生理鹽水，連續(xù)7d，于灌胃第3日除空白組外其余各組采用皮下注射鹽酸腎上腺素和冰水浴復(fù)制急性血瘀證模型，第7日給藥后30min測定各組大鼠全血黏度、血漿黏度、血沉和紅細(xì)胞壓積。結(jié)果：與空白組比較，模型組血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)均有明顯升高；與模型組比較，歸芎不同配比組均能明顯降低全血黏度值（1s-1）、血漿黏度值、血沉，其中歸芎3∶2組有極顯著作用。結(jié)論：當(dāng)歸-川芎不同配比對急性血瘀證大鼠血液流變學(xué)均有不同程度的改善，為闡明當(dāng)歸-川芎藥對配伍的科學(xué)性提供一定依據(jù)。

血瘀 當(dāng)歸 川芎 血液流變學(xué) 實(shí)驗(yàn)研究

痛經(jīng)為婦科血瘀證臨床常見多發(fā)病癥，常影響婦女正常工作和生活。當(dāng)歸-川芎配伍是臨床常用的養(yǎng)血活血藥對，具有養(yǎng)血補(bǔ)血、活血祛瘀的功效，大凡血虛、血瘀之證均可選用，尤為血虛兼血瘀者所宜。當(dāng)歸偏養(yǎng)血和血，川芎偏行血散血，二藥配對使用，可增強(qiáng)養(yǎng)血活血之功效。許多養(yǎng)血類方劑如佛手散、四物湯及其衍化方、八珍湯等都含有歸芎藥對，并且該藥對也獨(dú)自成方如佛手散、神驗(yàn)胎動方和芎歸散[1-3]。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，本院中醫(yī)科治療婦科血瘀證亦常用此藥對。當(dāng)歸-川芎藥對根據(jù)病情的不同，常采用不同配比。本實(shí)驗(yàn)選取本院中醫(yī)科治療婦科血瘀證痛經(jīng)時(shí)五種常用配比（當(dāng)歸-川芎2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2）以及當(dāng)歸、川芎單味藥進(jìn)行研究，觀察不同配比歸芎藥對對急性血瘀證模型大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響，為研究婦科血瘀證方劑的配伍規(guī)律提供一定依據(jù)，進(jìn)一步驗(yàn)證歸芎藥對配伍使用的科學(xué)性與合理性。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動物SD大鼠90只，雌性，體重（200±20）g，由上海斯萊克動物實(shí)驗(yàn)有限責(zé)任公司提供，合格證號：SCXK（滬）2008-0033。

1.2 藥物當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸的干燥根（泰州仁濟(jì)中藥飲片有限公司，批號：20110210）；川芎為傘形科植物川芎的干燥根莖（泰州仁濟(jì)中藥飲片有限公司，批號：20110401）。藥材均經(jīng)南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室吳德康教授鑒定。

1.3 試劑鹽酸腎上腺素（上海禾豐制藥有限公司，批號：W110102）；肝素鈉注射液（常州千紅生化制藥股份有限公司，批號：110518）；水合氯醛（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：20100709）。

1.4 實(shí)驗(yàn)器材LG-R-80電腦血液黏度測試儀（北京世帝科學(xué)儀器公司），Anke LXJ-IIB離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 藥材提取按當(dāng)歸-川芎1∶0、0∶1、2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2不同配比稱取當(dāng)歸、川芎飲片適量，先用8倍量蒸餾水浸泡30min后，回流提取2次，每次2h，合并濾液，濃縮，冷藏備用。

2.2 造模大鼠給予鹽酸腎上腺素注射液0.8mg/kg共2次，間隔時(shí)間為4h。第1次皮下給予鹽酸腎上腺素0.8mg/kg后2h，將大鼠置于0～2℃冰水中游泳4min，造成大鼠急性血瘀模型。第2次皮下注射鹽酸腎上腺素后，大鼠禁食不禁水飼養(yǎng)，12h后頸總動脈取血，測血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)確定造模效果[4]。

2.3 分組與給藥將SD大鼠隨機(jī)分為9組，分別為空白組、模型組、給藥組（歸芎1∶0、0∶1、2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2組，按臨床等效量的5倍進(jìn)行給藥，8.10g/kg），每組10只。給藥組取不同配比提取液每日按0.2mL/10g體重灌胃，空白組和模型組每日灌胃等劑量的生理鹽水，連續(xù)7d。于第3天對除空白組外的各組進(jìn)行造模。動物給藥劑量按體表面積換算系數(shù)計(jì)算：人臨床用量×0.018/200×1000×臨床等效量的倍數(shù)[4]。

2.4 血液流變學(xué)指標(biāo)檢測各組大鼠于第7天給藥后30min頸總動脈取血，測定血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)。大鼠在10%水合氯醛麻醉下，頸總動脈插管取血，以1%肝素鈉抗凝，用溫氏管法測定血沉（ESR）和紅細(xì)胞壓積（HCT），使用LG-R-80B電腦血液黏度測試儀測定全血黏度（WBV）、血漿黏度（PV）。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

如表1所示，與空白組比較，模型組大鼠全血黏度值、血漿黏度值和血沉均有明顯升高，呈現(xiàn)顯著性差異（P＜0.01），說明造模成功。與模型組比較，當(dāng)歸、川芎單味藥與不同配比歸芎藥對對急性血瘀大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)均有不同程度的改善。

4 討論

血瘀證是指離經(jīng)之血不能及時(shí)排出或消散，而停留于人體某部，或血液運(yùn)行不暢，瘀積于經(jīng)脈或器官之內(nèi)所出現(xiàn)的證候。現(xiàn)代研究認(rèn)為，血液流變學(xué)、血液循環(huán)及血液理化性質(zhì)的改變?yōu)檠鲎C發(fā)生的主要生化基礎(chǔ)[5]。其中，血液流變學(xué)指標(biāo)的改變多早于臨床表現(xiàn)，恢復(fù)正常又晚于臨床癥狀和體征的消失，因此藥物治療血瘀證的療效確定是以血液流變學(xué)指標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)的[6]。不同病種的血瘀證其血液流變性的改變有共同的特征，主要為血液流變性皆呈“濃”、“黏”、“凝”、“聚”狀態(tài)?！皾狻?，紅細(xì)胞壓積增加，球蛋白、β-脂蛋白、膽固醇、甘油三酯明顯增加；“黏”，全血黏度、血漿黏度、還原黏度增加；“凝”，血液凝固性增加，纖維蛋白原含量增加，纖溶活性降低，血漿復(fù)鈣時(shí)間縮短；“聚”，紅細(xì)胞及血小板在血漿中電泳速度減慢，血小板對ADP類誘導(dǎo)物質(zhì)的聚集性增加[7]。

當(dāng)歸和川芎均為臨床常用的活血散瘀藥物。當(dāng)歸長于補(bǔ)血，有“補(bǔ)血之圣藥”之稱；川芎長于行氣，有“血中氣藥”之稱，活血兼行氣，有良好的活血祛瘀之功。兩者同用，體現(xiàn)了補(bǔ)血藥常配伍行氣活血藥的配伍規(guī)律。其配伍比例的不同，其藥物活性也略有不同，如佛手散中當(dāng)歸和川芎組方比例為當(dāng)歸四兩、川芎六兩，芎歸散中當(dāng)歸和川芎組方比例為當(dāng)歸、川芎等分。黃美艷等[8]研究發(fā)現(xiàn)歸芎藥對的配比在2∶1到1.3∶1之間時(shí)，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同作用（協(xié)同作用強(qiáng)度為：－0.9）；當(dāng)歸劑量在2~3.5g，川芎劑量在7~9g區(qū)域內(nèi)，表現(xiàn)出拮抗作用（拮抗作用強(qiáng)度為：0.2）。本實(shí)驗(yàn)采用血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)，選擇當(dāng)歸-川芎1∶0、0∶1、2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2不同配比，來考察歸芎藥對對血瘀模型大鼠的活血祛瘀功效。研究結(jié)果顯示當(dāng)歸、川芎單用與不同配比使用均可不同程度改善急性血瘀證大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)，而不同配比歸芎藥對配伍應(yīng)用時(shí)各項(xiàng)指標(biāo)的改善較單用更為顯著，其中歸芎3∶2組改善作用最為顯著，可能與歸芎藥對產(chǎn)生協(xié)同作用有關(guān)，為驗(yàn)證歸芎藥對配伍的科學(xué)性和合理性提供了一定依據(jù)。

表1 各組大鼠處理后血液流變學(xué)指標(biāo)結(jié)果（±s，n=8）

表1 各組大鼠處理后血液流變學(xué)指標(biāo)結(jié)果（±s，n=8）

注：GX表示當(dāng)歸∶川芎。與空白組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

[1]劉培，宿樹蘭，周衛(wèi)，等．香附四物湯與四物湯對急性血瘀模型大鼠血液流變性及卵巢功能的影響．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16（8）：124

[2]Tang Y P，Zhu M，Yu S，et al.Identification and comparative quantification of bio-active phthalides in essential oils from si-wu-tang，fo-shou-san，radix angelica and rhizoma chuanxiong.Molecules，2010，15（1）：341

[3]王歡，唐于平，郭建明，等．當(dāng)歸－川芎藥對不同配比組方對家兔血小板聚集和凝血功能的影響．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16（2）：73

[4]李偉霞，黃美艷，唐于平，等．大鼠急性血瘀模型造模方法的研究與評價(jià)．中國藥理學(xué)通報(bào)，2011，27（12）：1761

[5]朱文鋒．中醫(yī)診斷學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：1

[6]秦任甲．臨床血液流變學(xué).北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2003：9

[7]高健，顧振綸，王天佑.血淤證與血液流變學(xué)的關(guān)系及其中藥研究進(jìn)展.中國血液流變學(xué)雜志，2003，2（13）：183

[8]黃美艷，唐于平，尚爾鑫，等．基于響應(yīng)曲面分析法對歸芎藥對活血效應(yīng)相互作用研究．中國藥理學(xué)通報(bào)，2012，28（10）：1407

R271.113.05

：A

：1672-397X（2014）12-0085-02

孔德平（1986-），女，生藥學(xué)碩士，中藥師，從事中藥復(fù)方研究。

湯倩，njfytq@126.com

2014-08-14

編輯：吳寧

南京市科技發(fā)展計(jì)劃（藥學(xué)項(xiàng)目）（2011YX011）