不同形態(tài)氮對掌葉半夏生長及塊莖主要化學成分的影響

王 乾, 王康才，鄭晨曦， 朱碧春， 王藝霖， 楊嘉偉， 王 偉

(南京農(nóng)業(yè)大學中藥材研究所, 江蘇南京 210095)

掌葉半夏(PinelliapedatisectaSchott.)又名獨角蓮，為天南星科多年生草本，以干燥的球狀塊莖入藥，藥材名為“虎掌南星”。通常生長于山坡、 田野陰濕處，主要分布在我國河北、 長江流域以及西南各地。在古書《南京民間藥草》和《廣西中藥志》中分別記載，掌葉半夏可以“治腫毒”、“療痹癥”。隨藥理研究深入，掌葉半夏有擴張冠狀血管，防止心律失常、 降血壓、 抗凝血和減弱心肌收縮力等作用，受到更多研究者的關(guān)注。目前，掌葉半夏研究成果多集中于本草考證、 化學成分[1-2]及藥理作用等方面； 而栽培生理方面鮮有報道。

1 材料與方法

1.1 實驗設(shè)計

1.2 測定項目與方法

生長量的測定: 掌葉半夏生長2個月后，每個處理隨機采集10株，洗凈，稱量植株地上部和地下部的鮮重，殺青，60℃烘干至恒重后，稱量其干重。

超氧化物岐化酶(SOD)、 過氧化氫酶(CAT)活性的測定: 在噴施2次處理液后(即生長45天)，每處理隨機選擇長勢一致的10株成熟幼苗，取其中間葉片，采用氮藍四唑(NBT)法測定SOD活性，高錳酸鉀滴定法測定CAT活性，MDA含量測定采用硫代巴比妥酸法。

NR酶活性: 采用活體法測定，取樣0.5 g放入磷酸緩沖液(pH 7.5) 中，反復抽氣至葉片完全軟化沉底，置于25℃下黑暗保溫30 min，加入1%三氯乙酸終止反應，磺胺顯色，在540 nm波長下測定吸光值，酶活性單位以μg/(g·h)，F(xiàn)W表示。

硝酸鹽含量: 采用水楊酸比色法。精確稱取新鮮樣品3 g放入試管中，加入10 mL無離子水，用玻璃泡封口，置沸水中水浴30 min后取出，冷卻至室溫后將提取液過濾，并反復沖洗殘渣，定容。在410 nm波長下測定吸光值，根據(jù)標準曲線算出硝態(tài)氮的濃度，計算樣品中硝態(tài)氮含量。

塊莖中總生物堿、 總有機酸及腺苷含量測定: 當年6月底掌葉半夏倒苗后，收獲塊莖，洗凈，105℃殺青，60℃烘干至恒重，打粉過0.3 mm篩。總生物堿含量的測定采用酸性染料比色法； 總有機酸含量的測定采用電位滴定法； 腺苷含量測定采用HPLC法[6]。

實驗儀器: 安捷倫LC-1100高效液相色譜儀； 色譜條件為C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流動相為甲醇 ∶水(15 ∶85)，檢測波長260 nm，流速0.7 mL/min，柱溫25℃。

1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)采用Excel(2003)和 統(tǒng)計軟件SPSS 13.0進行統(tǒng)計分析，LSD法檢驗差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

表1 不同形態(tài)氮配比處理對掌葉半夏生長的影響 (n=3)

表2 不同形態(tài)氮配比處理下掌葉半夏葉片中抗氧化酶活性及MDA含量

表3 不同形態(tài)氮配比處理下掌葉半夏NR活性和硝酸鹽含量

表4 不同形態(tài)氮配比處理下掌葉半夏塊莖中主要化學成分含量(%)

3 討論

3.1 氮素形態(tài)與掌葉半夏生長及光合特性關(guān)系

3.2 氮素形態(tài)對掌葉半夏NR活性及葉片中積累的影響

3.3 氮素形態(tài)對掌葉半夏塊莖中主要化學成分代謝累積的影響

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