趙永玉 崔倡林 (山東省萊州市文昌獸醫(yī)站 261400)
2014年5月,山東省萊州市虎頭崖鎮(zhèn)一獺兔飼養(yǎng)戶(hù),引進(jìn)160只3月齡獺兔,爆發(fā)了以排膠凍樣和水樣糞便,腹部發(fā)黑,結(jié)膜蒼白,消瘦和痙攣死亡為特征的疾病,根據(jù)觀(guān)場(chǎng)調(diào)查,臨床診斷、剖解、實(shí)驗(yàn)室診斷,確診為大腸桿菌與球蟲(chóng)感染,將情況報(bào)告如下:
該兔場(chǎng)由于引種前準(zhǔn)備不充分,兔子飼養(yǎng)在三層水泥制板的老兔舍,由于底板縫隙小,而且縫隙僅中央部分有,大部分兔子糞便都在兔窩角落。每窩飼養(yǎng)2~3只,兔體被毛污濁,地面潮濕,兔舍窗小,通風(fēng)不好,整個(gè)兔舍糞尿味刺鼻。據(jù)畜主講,剛引進(jìn)來(lái)10d時(shí),兔群并無(wú)異常,正準(zhǔn)備遷到新建兔舍,就有20只兔子死亡,雖然服了一些藥物,但病情繼續(xù)發(fā)展。
病兔體溫正常或低于正常體溫,精神沉郁,被毛粗亂,脫水,消瘦,貧血,腹部膨脹發(fā)黑,劇烈腹瀉,肛門(mén)和后肢的被毛附著一些粘液或稀糞,常帶有大量明膠樣和一些兩頭尖的干糞。病兔四肢發(fā)冷,經(jīng)常磨牙,流涎。病程長(zhǎng)短不一,有的不見(jiàn)任何癥狀很快死亡;有的死亡時(shí)突然側(cè)身倒地,肌肉痙攣,頭后仰,發(fā)出慘叫,迅速死亡;病程稍長(zhǎng)的由于脫水、消瘦、貧血,最后衰竭死亡。
對(duì)病死的13只兔進(jìn)行了剖檢,發(fā)現(xiàn)大部分腸黏膜發(fā)炎,有的有出血點(diǎn)或淡黃色的結(jié)節(jié)。胃膨脹,胃黏膜發(fā)炎,充滿(mǎn)多量液體和氣體;十二指腸充滿(mǎn)染有膽汁的粘液狀的液體;空腸擴(kuò)張,內(nèi)有半透明膠水樣液體;回腸內(nèi)容物呈現(xiàn)粘液膠水樣液體,糞球細(xì)長(zhǎng),兩頭尖,外面包有粘稠液或灰白色膠凍樣分泌物;結(jié)腸擴(kuò)張,有透明膠樣粘液;直腸有大量的膠凍樣液體,黏膜與漿膜充血,有出血斑點(diǎn);大部分病例盲腸尤其是蚓突有大量淡黃色的結(jié)節(jié)。部分病例膽囊脹大,肝臟、心臟有小點(diǎn)壞死灶。膀胱積有黃色混濁尿液,膀胱黏膜脫落。
(1)涂片鏡檢用病死兔肝臟、心血、結(jié)腸內(nèi)容物,分別涂片,革蘭氏染色鏡檢,鏡下發(fā)現(xiàn)有單個(gè)或呈短鏈狀排列,兩端鈍圓的短桿菌,無(wú)莢膜和芽孢,有鞭毛,有運(yùn)動(dòng)性,革蘭氏陰性。剪開(kāi)盲腸,在結(jié)節(jié)性病灶處刮取少量腸黏膜,置于載玻片上,滴加一滴甘油飽和鹽水,調(diào)和均勻,加上蓋玻片,進(jìn)行鏡檢,發(fā)現(xiàn)有許多艾美球蟲(chóng)卵囊存在。(2)分離培養(yǎng)。用接種環(huán)無(wú)菌粘取或鉤取新鮮病死兔的肝臟、心血、結(jié)腸內(nèi)容物,用劃線(xiàn)法接種于普通瓊脂平板培養(yǎng)基上,37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h,挑選單個(gè)圓形、微隆起、濕潤(rùn)半透明的灰白色的小菌落 進(jìn)行純培養(yǎng)。將挑選的菌落分別接種到普通瓊脂培養(yǎng)基和肉湯培養(yǎng)基上,37℃恒溫箱中再培養(yǎng)24h,得到純培養(yǎng)物。普通瓊脂培養(yǎng)基上長(zhǎng)出圓形、微隆起、濕潤(rùn)半透明的灰白色的菌落;肉湯培養(yǎng)基生長(zhǎng)豐盛,肉湯變得異常混濁并形成淡灰色沉淀。將得到的純培養(yǎng)物抹片革蘭氏染色鏡檢,其細(xì)菌的形態(tài)大小與鏡檢結(jié)果相同。生化試驗(yàn):用得到的細(xì)菌純培養(yǎng)物做生化試驗(yàn),結(jié)果是能產(chǎn)生靛基質(zhì),不分解尿素,不產(chǎn)生硫化氫,不液化明膠,m.R.試驗(yàn)陽(yáng)性,V-P陰性。能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、甘露醇,并能產(chǎn)酸、氣。動(dòng)物實(shí)驗(yàn):選健康無(wú)病的實(shí)驗(yàn)用小豚鼠12只,分甲乙2組,甲組為試驗(yàn)組,乙組為對(duì)照組。甲組用培養(yǎng)24h的肉湯培養(yǎng)物0.3ml/只腹腔注射;對(duì)照組用無(wú)菌生理鹽水0.3ml/只腹 腔注射,然后進(jìn)行觀(guān)察。2d后試驗(yàn)組開(kāi)始有發(fā)病表現(xiàn),第3天死亡4只,最后一只第5天死亡。對(duì)照組無(wú)發(fā)病表現(xiàn)。取病死小豚鼠的肝臟、心血、腹水分別涂片,革蘭氏染色后鏡檢,鏡檢結(jié)果與上述檢驗(yàn)相同。
根據(jù)以上各種檢驗(yàn)結(jié)果,可確定獺兔已被大腸桿菌感染。由于當(dāng)時(shí)條件有限,不能鑒定大腸桿菌的血清型。
涂片鏡檢在載玻片上先滴一滴50%的甘油水溶液,放入火柴頭大小的新鮮病兔糞便,用竹簽加以涂抹,去掉硬固渣子,蓋上蓋玻片,顯微鏡下鏡檢。共做抹片5張,其中3張視野中發(fā)現(xiàn)有多個(gè)艾美球蟲(chóng)卵囊。為了確診,又用漂浮法進(jìn)一步檢查。糞便漂浮法蟲(chóng)卵檢驗(yàn),取多個(gè)病兔的新鮮糞便共2Og,放在玻璃杯中,用玻璃棒將兔糞搗爛,加入100ml飽和生理鹽水,再將此糞液用雙層紗布過(guò)濾到另一個(gè)燒杯中,濾液靜置30min左右,如果有球蟲(chóng)卵囊就會(huì)浮到液面上來(lái)。用10mm左右的小鐵絲圈,平著接觸液面,沾取一層水膜,抖在載玻片上,蓋上蓋玻片,顯微鏡下觀(guān)察,發(fā)現(xiàn)有大量的艾美球蟲(chóng)卵囊存在。
以上實(shí)驗(yàn)表明,獺兔不僅感染了大腸桿菌,同時(shí)也被艾美球蟲(chóng)所感染。
選用12種抗菌藥物( 青霉素、鏈霉素、慶大霉素、丁胺卡那霉素、環(huán)丙沙星、蒽諾沙星、紅霉素、強(qiáng)力霉素、諾氟沙星、痢特靈、土霉素、氯霉素),用常規(guī)紙片法對(duì)分離的大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),所用藥敏試紙為本站實(shí)驗(yàn)室自備。判定標(biāo)準(zhǔn)以抑菌圈大小而定。直徑小于10mm的為耐藥,10~15mm的為中度敏感,15mm以上的為高度敏感。結(jié)果對(duì)環(huán)丙沙星、強(qiáng)力霉素、慶大霉素高度敏感;對(duì)紅霉素、氯霉素、丁胺卡那霉素、蒽諾沙星中度敏感;對(duì)其他藥物都表現(xiàn)一定程度的耐藥性。
(1)隔離消毒:確診后迅速將病兔進(jìn)行隔離,并將環(huán)境、籠舍徹底清掃,用5%熱火堿水噴灑消毒,1次/d,連續(xù)1周;用具清洗后,用0.01%高錳酸鉀消毒,并放在陽(yáng)光下照射。(2)預(yù)防性用藥:對(duì)健康獺兔全部采用藥物預(yù)防,飲水中加入0.5%鹽酸環(huán)丙沙星,2次/d,連用5d。同時(shí)飼料中加入磺胺二甲嘧啶以預(yù)防球蟲(chóng)的感染。(3)大腸桿菌治療:根據(jù)藥敏試驗(yàn),選用硫酸慶大霉素每只2萬(wàn)IU肌肉注射,2次/d,連用5d。體質(zhì)較差的配合靜脈注射5%葡萄糖生理鹽水20~50ml。(4)球蟲(chóng)治療:采用中西結(jié)合方法,提高治療效果。用磺胺二甲嘧啶0.2mg/d·kg體重,分2次內(nèi)服,首次劑量加倍,連用5d。中藥用仙鶴草根150g、黃柏50g、大黃30g、白頭翁30g、黃芩20g、甘草20g,共研細(xì)末,3g/d·只拌于飼料內(nèi)服,連用5d。經(jīng)過(guò)1周的治療,除病重的12只死亡之外,其他的均痊愈。
(1)根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢病變,特別是通過(guò)病原菌的培養(yǎng)及各種鏡檢結(jié)果,可以確診獺兔為大腸桿菌與球蟲(chóng)混合感染。家兔的混合感染性疾病比較常見(jiàn),而且容易造成誤診,延誤治療時(shí)機(jī)。因此,要早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療,以減少死亡。(2)家兔的大腸桿菌病發(fā)生原因一般是由于飼養(yǎng)條件和氣候環(huán)境條件的變化而導(dǎo)致植物神經(jīng)系統(tǒng)的擾亂,腸道中本來(lái)以革蘭氏陽(yáng)性菌為主的細(xì)菌群,被革蘭氏陰性細(xì)菌群(主要是大腸桿菌)所代替,以致于發(fā)生劇烈腹瀉甚至死亡。兔的球蟲(chóng)病是危害嚴(yán)重的一種疾病,尤其對(duì)1~4月齡的兔危害嚴(yán)重,當(dāng)氣溫在10℃以上時(shí),如果飼養(yǎng)管理?xiàng)l件惡化,隨時(shí)都可發(fā)病。1~4月齡的兔發(fā)病時(shí)主要以腸型為主,死亡率更高,如不采取相應(yīng)措施,死亡率會(huì)達(dá)到100%。(3)該場(chǎng)獺兔發(fā)病的主要原因是由于舍內(nèi)通風(fēng)不良, 獺兔直接接觸糞尿,舍內(nèi)地面長(zhǎng)期潮濕,致使空氣污濁,室內(nèi)空氣濕度過(guò)大,造成環(huán)境條件的惡化,促進(jìn)了大腸桿菌病及球蟲(chóng)病的發(fā)生。發(fā)病時(shí)由于畜主防疫衛(wèi)生意識(shí)不強(qiáng),使用具、飼料飲水、環(huán)境被病原微生物及球蟲(chóng)卵囊所污染,更加重了本病的傳播流行。(4)藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明,大腸桿菌對(duì)部分抗生素有一定的耐藥性。因此,要選擇敏感藥物使用,才能得到顯著的防治效果,避免浪費(fèi)藥物和延誤防治時(shí)機(jī),減少損失。對(duì)于球蟲(chóng)病的治療,因其易產(chǎn)生耐藥性,在選擇用藥時(shí)最好幾種藥物交替使用,或使用中藥治療會(huì)收到滿(mǎn)意的效果。(5)預(yù)防本病主要從飼養(yǎng)管理人手,在飼養(yǎng)上注意喂給全價(jià)配合飼料,滿(mǎn)足營(yíng)養(yǎng)需要,增強(qiáng)抵抗力。管理上,注意加強(qiáng)舍內(nèi)通風(fēng),保持空氣新鮮;加強(qiáng)衛(wèi)生管理,保持舍內(nèi)干燥,定期消毒,必要時(shí)采用藥物預(yù)防等。發(fā)病時(shí)做到及早發(fā)現(xiàn)、及早處理,只有這樣才能有效地降低本病造成的損失。