趙川東,劉茂鋒,曹 杰,朱廷恒,章亭洲,2*
(1.浙江科峰生物技術(shù)有限公司,浙江 海寧 314423;2.浙江工商大學(xué),杭州 310035;3.浙江工業(yè)大學(xué),杭州 310014)
酵母培養(yǎng)物(YC)是指利用酵母菌在一定的條件(溫度、pH、溶氧等)下,將配制好的培養(yǎng)基充分發(fā)酵后得到的一種新型飼料添加劑。酵母培養(yǎng)物主要成分為活性酵母細(xì)胞、酵母代謝產(chǎn)物和發(fā)酵后的變異培養(yǎng)基,并且富含小肽、氨基酸、維生素、有機酸、生物酶和酵母細(xì)胞壁多糖以及有益畜禽生長的“未知生長因子”[1]。酵母培養(yǎng)物由于具有無毒副作用、營養(yǎng)物質(zhì)豐富、易消化吸收、不產(chǎn)生耐藥性、提高動物免疫力等優(yōu)點,在畜牧水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中得到廣泛應(yīng)用。
酵母是一類非絲狀真核微生物,兼性厭氧生長,以無性繁殖為主,在一定條件下產(chǎn)生孢子。常用的酵母種類有產(chǎn)朊假絲酵母、啤酒酵母、乳酸克魯維酵母和卡氏酵母。目前酵母培養(yǎng)物產(chǎn)品主要分為:以酵母活細(xì)胞為主的產(chǎn)品,富含大量活性酵母,能夠耐受高溫和強酸,在飼料制粒和胃酸環(huán)境能夠有效保持活性,另外還有含酵母代謝產(chǎn)物為主的產(chǎn)品。新型酵母培養(yǎng)物產(chǎn)品——益康寶,酵母活菌數(shù)達(dá)100億個·g-1,β-葡聚糖含量>3%,富含大量小肽和氨基酸等代謝產(chǎn)物,能有效提高動物免疫力,具有很好的飼用效果[2]。酵母培養(yǎng)物廣泛應(yīng)用于畜牧水產(chǎn)行業(yè),能顯著提高飼養(yǎng)動物的免疫力,因此有必要對其有效成分和功效進(jìn)行分析,以便更好的應(yīng)用酵母培養(yǎng)物。
酵母屬于兼性厭氧菌,干酵母中約含有40%的蛋白質(zhì),是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)和氨基酸來源,是賴氨酸含量較低谷物的有效補充物。酵母細(xì)胞內(nèi)含豐富的酶類,例如蛋白質(zhì)酶、淀粉酶、纖維素酶及植酸酶等。這些酶類可將淀粉、纖維素水解成小分子糖、氨基酸、醇類等易被消化和吸收的低分子物質(zhì)[3]。酵母細(xì)胞對胃酸具有良好的耐受性,能夠進(jìn)入動物胃腸道,消耗胃腸道的氧氣,制造厭氧環(huán)境,代謝酸性物質(zhì),降低腸道pH,從而促進(jìn)有益菌群的繁殖,抑制有害菌的生長,改善動物消化道微生態(tài)平衡,刺激消化器官發(fā)育和刺激免疫機能。
酵母細(xì)胞壁能增強機體免疫力,提高動物的生產(chǎn)性能。酵母細(xì)胞壁是維持細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞與細(xì)胞間識別的重要細(xì)胞結(jié)構(gòu),占整個細(xì)胞干重20%~30%,主要由β-葡聚糖(57.0%)、甘露寡糖(6.6%)、糖蛋白(22.0%)和幾丁質(zhì)組成,酵母細(xì)胞壁的功能性成分主要為β-葡聚糖和甘露聚糖。目前國外對酵母細(xì)胞壁多糖研究比較多,而我國相對較少[4]。
β-葡聚糖是一種葡萄糖聚合物,通常由10~20個單糖以 β-1,3鍵和 β-1,6鍵相連組成,β-葡聚糖呈螺旋形結(jié)構(gòu),這種特殊的構(gòu)型能刺激動物免疫系統(tǒng),提高動物免疫力[5]。β-葡聚糖在消化道中不可溶、不吸收、也不產(chǎn)生黏性,是免疫反應(yīng)的基質(zhì)。β-葡聚糖刺激體內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES),產(chǎn)生大量巨噬細(xì)胞,通過其巨噬作用吸收、破壞、清除體內(nèi)損傷、衰老和死亡的病原微生物,提高動物的免疫功能,故又將β-葡聚糖稱為免疫多糖。在動物日糧中添加一定量的β-葡聚糖可降低動物機體外周淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率[6]。有利于保持消化道微生態(tài)的穩(wěn)定,降低應(yīng)激性,提高飼料報酬,因此,β-葡聚糖在畜牧業(yè)的應(yīng)用對于提高畜牧生產(chǎn)水平具有重要意義。甘露聚糖(MOS)主鏈由約50個α-甘露糖鍵以 α-1,6鍵構(gòu)成,主鏈上聯(lián)結(jié)有 α-1,2 和α-1,3鍵及數(shù)目不等的甘露糖側(cè)鏈。甘露聚糖具有清除胃腸道基質(zhì)的功能,因其結(jié)構(gòu)與病原菌受體相似,并與凝集素有很強的結(jié)合能力[7]。甘露聚糖與凝集素結(jié)合,會干擾腸道病原體在腸道的定植,進(jìn)而降低病原體的危害。甘露寡糖還可促進(jìn)細(xì)胞因子的釋放,激活機體體液和細(xì)胞免疫。
細(xì)胞內(nèi)容物中含蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、微量元素螯合物、核酸等多種成分。酵母細(xì)胞的核酸含量豐富,達(dá)8%~12%[8]。發(fā)酵過程中,酵母細(xì)胞自溶,包裹在酵母細(xì)胞壁中的核酸釋放降解在酵母培養(yǎng)物中。飼喂酵母培養(yǎng)物是動物補充核酸最佳途徑,能迅速補充動物自身合成核苷酸的嚴(yán)重不足,促進(jìn)小腸發(fā)育,增加腸絨毛長度和腸壁厚度,改善腸道吸收能力,降低腹瀉率。潘樹德等研究發(fā)現(xiàn),添加酵母核酸后,在斷奶28 d仔豬日糧中添加不同水平酵母核酸均能提高仔豬日采食量,與對照組相比,飼用酵母核酸能有效提高仔豬小腸中雙歧桿菌、乳酸菌數(shù)量,降低回腸和盲腸中大腸桿菌數(shù)量,隨著酵母核酸含量增加日采食量有升高趨勢[9]。
變性培養(yǎng)基是指酵母發(fā)酵培養(yǎng)基后的殘余成分,富含小肽、酶類及其他未知因子等,營養(yǎng)價值很高。小肽是指含2或3個氨基酸殘基的一類化合物。根據(jù)其功能分為營養(yǎng)性小肽和功能性小肽[10]。營養(yǎng)性小肽為蛋白質(zhì)合成提供氮架,功能性小肽則參與調(diào)節(jié)動物的某些生理活動。小肽可完整地通過腸黏膜細(xì)胞進(jìn)入機體循環(huán),且具有速度快、耗能低、載體不易飽和等特點,從而減少氨基酸間的相互競爭,加速蛋白質(zhì)的合成。因此,酵母培養(yǎng)物中的小肽類物質(zhì)可直接被動物吸收和利用,不僅可以促進(jìn)氨基酸吸收,還可協(xié)助礦物元素吸收。而部分功能性小肽(如谷胱甘肽等)具有調(diào)節(jié)機體生理活動和提高免疫的作用。
在日糧中添加酵母培養(yǎng)物能夠改善飼料適口性,增加反芻動物采食量;促進(jìn)反芻動物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收;促進(jìn)瘤胃發(fā)酵,使瘤胃內(nèi)無機氮源更多地轉(zhuǎn)化為菌體蛋白,從而提高消化率及菌體蛋白合成效率,具有顯著的增乳效果。Medina等試驗發(fā)現(xiàn),給反芻動物飼喂酵母培養(yǎng)物能極顯著地降低瘤胃內(nèi)氨的濃度[11]。酵母培養(yǎng)物對不同泌乳時的奶牛均有良好的效果,對提高奶牛生產(chǎn)性能均有不同程度的作用。在產(chǎn)奶初期添加酵母培養(yǎng)物,能顯著提高奶牛的飼料消化率,提高奶牛泌乳的產(chǎn)量和質(zhì)量。Galyean等采用體外瘤胃添加不同酵母培養(yǎng)物進(jìn)行發(fā)酵試驗,處理組顯著提高了奶牛瘤胃的丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸的濃度,增加乙酸和丙酸的比例及提高丁酸的產(chǎn)量,維護有益菌群的優(yōu)勢,保持瘤胃中微生態(tài)體系的平衡[12]。
在禽類和豬的日糧中添加酵母培養(yǎng)物,不僅能促進(jìn)其腸道吸收,還可減少動物應(yīng)激,提高免疫力,保證動物的生產(chǎn)水平。酵母培養(yǎng)物可緩解母豬產(chǎn)仔前后以及哺乳期間的生理應(yīng)激反應(yīng),提高母豬的泌乳量,恢復(fù)胃腸道菌群的代謝平衡和改善內(nèi)環(huán)境及促進(jìn)各類消化因子的內(nèi)分泌水平,預(yù)防便秘現(xiàn)象和減少糞便中有害細(xì)菌的數(shù)量以降低仔豬受感染的幾率。在生長豬的日糧中添加酵母培養(yǎng)物,可提高粗纖維表觀消化率和日增重。在母豬妊娠期和哺乳期日糧中添加酵母培養(yǎng)物,能顯著提高哺乳仔豬斷奶個體重,增強仔豬體質(zhì)。吳永紹等在豬日糧中添加酵母培養(yǎng)物0.1%、0.2%,與對照組相比,酵母培養(yǎng)物0.1%組健仔率差異不顯著(P>0.05),酵母培養(yǎng)物 0.2%組差異顯著(P<0.05),酵母培養(yǎng)物0.1%、0.2%組仔豬斷奶重分別比對照組提高11.92%(P<0.01),7.08%(P<0.05),日增重分別提高 14.78%(P<0.01),11.68%(P<0.05),仔豬成活率分別提高 9.13%(P<0.05),6.87%(P<0.05),斷奶窩重分別提高24.44%(P<0.01),21.14%(P<0.01),說明在母豬妊娠后期及泌乳期飼糧中添加酵母培養(yǎng)物可以提高母豬繁殖性能及哺乳仔豬生長性能[13]。
飼用酵母培養(yǎng)物能顯著提高肉雞的成活率,調(diào)節(jié)腸道微生態(tài),增強機體抗氧化功能和降低體內(nèi)總膽固醇含量。周淑芹在肉仔雞日糧中添加酵母培養(yǎng)物0.3%,顯著改善了肉仔雞生長性能,顯著提高肉仔雞腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量,降低盲腸中大腸桿菌數(shù)量[14]。
水生動物與微生物關(guān)系更為密切,并且受環(huán)境應(yīng)激因素的影響較大。曹俊明等報道,在鯉魚飼料中添加酵母培養(yǎng)物0.5%,可顯著降低水體中的磷酸鹽和氨氮濃度,為鯉魚的生長提供良好的水質(zhì)環(huán)境,降低疾病發(fā)生率,提高鯉魚生長速度和魚蝦群體的整齊度,同時也能改善水質(zhì),改善池水中浮游植物和浮游動物生物量[15]。
酵母培養(yǎng)物對于改善動物生產(chǎn)性能和降低養(yǎng)殖成本有著十分積極的意義,但目前此類產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊,使用效果也不穩(wěn)定,亟需開發(fā)質(zhì)優(yōu)價廉的品牌性產(chǎn)品。應(yīng)加強對酵母培養(yǎng)物作用機理的深入研究;研發(fā)新型酵母菌,充分利用豐富的酵母菌資源進(jìn)行開發(fā)和應(yīng)用的研究,利用基因工程等手段獲得高產(chǎn)核酸或者細(xì)胞壁多糖等功能性物質(zhì)的菌株;優(yōu)化發(fā)酵工藝,包括液體發(fā)酵工藝和固體發(fā)酵工藝,研究發(fā)酵培養(yǎng)基的成分,提高目的產(chǎn)物的表達(dá);建立一種快速有效的檢測手段,能夠定量定性分析酵母培養(yǎng)物的有效成分,以便于出臺相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),規(guī)范市場。隨著對酵母培養(yǎng)物研究的深入,其作用機理將會越來越清楚,其使用效果也會越來越好,并且開發(fā)、應(yīng)用也將會越來越廣泛。
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