FQ-PCR、TRFIA方法檢測(cè)乙肝標(biāo)志物的臨床價(jià)值

張菊萍，王 珍

(青海省交通醫(yī)院，西寧810000)

病毒性乙型肝炎(乙肝)是由乙肝病毒(HBV)感染引起的傳染性疾病，近年研究顯示，全球約20億人群感染HBV，其中約4億人為慢性HBV攜帶者［1］。目前，臨床常用時(shí)間分辨熒光免疫分析(TRFIA)、熒光定量聚合酶鏈(FQ-PCR)等方法檢測(cè)HBV的感染情況［2］。2007年3月～2012年3月，我院采用FQ-PCR、TRFIA方法檢測(cè)1 200例疑似乙肝患者的乙肝標(biāo)志物，明顯提高了其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇同期在我院門(mén)診就診的疑似乙肝患者1 200例，男711例、女489例，年齡12～80歲。

1.2 方法

1.2.1 乙肝標(biāo)志物檢測(cè) 采用TRFIA方法檢測(cè)患者的 HBV血清學(xué)標(biāo)志物(HBV-M)，包括 HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。 PerkinElmer Wallac 6000 DELFIA Xpress全自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀由廣州匹依公司提供，根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.2.2 HBV-DNA檢測(cè) 采用FQ-PCR方法檢測(cè)患者的HBV-DNA含量，TL988-Ⅳ四通道實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀由西安天隆公司提供，根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，并按其要求將陽(yáng)性定量質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行稀釋和處理。HBV-DNA含量＞1×102IU/mL為陽(yáng)性。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，比較用χ2檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV-M陽(yáng)性率 根據(jù)TRFIA檢測(cè)結(jié)果，將疑似乙肝患者的 HBV-M分為8組，即 HBsAg(+)、HBeAg(+)、HbcAb(+)，HBsAg(+)、HBeAb(+)、HbcAb(+)，HBsAb(+)、HBcAb(+)、HBeAb(+)，HBsAg(+)、HBcAb(+)，HBeAb(+)、HBcAb(+)，HBcAb(+)，HBsAb(+)，全陰性。本文前7組陽(yáng)性者723 例(占 60.25%)，分別為 298(24.83%)、202(16.83%)、6(0.51%)、98(8.17%)、69(5.75%)、46(3.83%)、4 例(0.33%);陰性477 例(占39.75%)。

2.2 HBV-DNA陽(yáng)性率 根據(jù)FQ-PCR檢測(cè)結(jié)果，將患者的HBV-DNA含量分為3級(jí)，即＜1×102IU/mL、1×102～1×107IU/mL、＞1×107IU/mL。本文 HBVDNA含量 ＜1×102IU/mL者222例(18.50%)，1×102～1×107IU/mL者 839例(69.92%)，＞1×107IU/mL者 139例(11.58%)，HBV-DNA 陽(yáng)性率為81.50%。

2.3 FQ-PCR、TRFIA檢測(cè)的陽(yáng)性率 本文FQ-PCR檢測(cè)HBV-DNA含量陰性222例(18.50%)，陽(yáng)性978例(81.50%);TRFIA 檢測(cè)陰性477 例(39.75%)，陽(yáng)性723例(60.25%)。FQ-PCR陽(yáng)性檢出率明顯高于TRFIA(χ2=131.25，P ＜0.01)。

3 討論

HBV因具有抵抗力強(qiáng)、嗜肝性、變異性、致癌性等特征，對(duì)乙肝患者身體健康造成不良影響［3］。FQ-PCR是檢測(cè)核酸水平的有效辦法，其原理為對(duì)檢測(cè)所需的核苷酸片段進(jìn)行擴(kuò)增，利用摻入其中作為復(fù)制原材料的熒光放射物進(jìn)行觀察，檢測(cè)受檢者體內(nèi)的HBV-DNA含量［4～6］，該方法具有操作簡(jiǎn)便、靈敏度高等優(yōu)勢(shì)，可對(duì)乙肝患者體內(nèi)的HBV-DNA含量進(jìn)行準(zhǔn)確判斷［7，8］。本研究行 FQ-PCR檢測(cè)者的HBV-DNA陽(yáng)性率為81.5%，準(zhǔn)確率較高。TRFIA是近年來(lái)新發(fā)展的特殊熒光分析方法，其檢測(cè)HBV-M的靈敏度極高［9］。該方法是利用放射熒光波長(zhǎng)的特異性對(duì)檢測(cè)物質(zhì)進(jìn)行高靈敏的反映，避免了普通雜色光對(duì)其精確度的影響［10］，因其對(duì)微量、超微量目標(biāo)物質(zhì)檢測(cè)具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高等優(yōu)勢(shì)，故在HBV-M檢測(cè)中可測(cè)出極微小的差異，提高其檢測(cè)的準(zhǔn)確性［11，12］。本研究行 TRFIA 檢測(cè)者的HBV-M陽(yáng)性率為60.25%。研究顯示，對(duì)行TRFIA方法無(wú)法準(zhǔn)確檢測(cè)出血清HBV-DNA低滴度者，采用FQ-PCR方法可在一定程度上對(duì)其進(jìn)行補(bǔ)充［13］。TRFIA方法可避免FQ-PCR方法對(duì)HBV-M檢測(cè)的不敏感［14］。兩種方法各有優(yōu)勢(shì)，二者聯(lián)合檢測(cè)可對(duì)HBV感染患者作出診斷，提高判斷乙肝患者HBVM、病情診斷及恢復(fù)情況的準(zhǔn)確性［15］。

綜上所述，臨床上采用FQ-PCR方法檢測(cè)乙肝患者的陽(yáng)性檢出率明顯高于TRFIA方法，二者聯(lián)合檢測(cè)可提高其準(zhǔn)確性，有利于病情的判斷和診治。

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