口腔癌淋巴管生成及淋巴轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展

王 通，沈 軍

(1天津醫(yī)科大學(xué)，天津300070;2天津市口腔醫(yī)院)

口腔癌為頭頸部常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率約占全身惡性腫瘤的3%，其中口腔頜面部的鱗狀細(xì)胞癌占80%以上。雖然以手術(shù)切除為主的序列治療對口腔癌原發(fā)灶的控制率有了顯著提高，但是其5年生存率仍為50%～55%［1］。淋巴道轉(zhuǎn)移是口腔癌各階段進(jìn)展的主要轉(zhuǎn)移方式，臨床表現(xiàn)為淋巴管癌栓及淋巴結(jié)受累。有研究表明，50%的口腔癌患者在首診時(shí)已經(jīng)發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移［2］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，確診發(fā)生區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的口腔癌患者5年生存率下降一半左右，所以淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移被認(rèn)為是影響患者預(yù)后的首要因素。目前，癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移與腫瘤淋巴管生成的研究仍在探討中。首先，自上世紀(jì)70年代Folkman提出腫瘤組織內(nèi)血管生成學(xué)說以來，大部分研究都集中于血管形成與腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移的關(guān)系，忽略了淋巴管路在癌細(xì)胞遷徙、轉(zhuǎn)移中所起的作用。其次，尚未發(fā)現(xiàn)特異的淋巴管內(nèi)皮標(biāo)志物，在一定程度上阻礙了口腔癌淋巴管生成的研究。目前，隨著血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)-C、VEGF-D、透明質(zhì)酸酶受體-1(LYVE-1)等淋巴管內(nèi)皮標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)，腫瘤淋巴管生成的研究迅速起步，研究口腔癌淋巴管生成的機(jī)制，抑制其生成的靶點(diǎn)，將有望開辟惡性腫瘤治療的新途徑。

1 淋巴系統(tǒng)的解剖學(xué)基礎(chǔ)和功能

淋巴系統(tǒng)由淋巴管、淋巴組織和淋巴器官組成。淋巴管主要包括毛細(xì)淋巴管、淋巴管、淋巴干和淋巴導(dǎo)管。毛細(xì)淋巴管僅由內(nèi)皮和極薄的結(jié)締組織構(gòu)成，無周細(xì)胞。電鏡下，毛細(xì)淋巴管外周缺少平滑肌，管周無基膜，管壁菲薄，管腔大，管壁由單層內(nèi)皮細(xì)胞組成，內(nèi)皮細(xì)胞間連接疏松，有較寬的間隙，甚至呈開放狀態(tài)，故通透性大，大分子物質(zhì)易進(jìn)入。生理狀態(tài)下，淋巴系統(tǒng)的主要功能是將組織間液和大分子物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)入血液循環(huán)，保持組織內(nèi)正常的體液容量，從而維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定;在機(jī)體免疫過程中可將抗原提呈細(xì)胞及淋巴細(xì)胞逐步運(yùn)送至外周毛細(xì)淋巴管或區(qū)域淋巴結(jié)，完成免疫應(yīng)答;另外，還可完成脂肪的消化、吸收功能。

2 腫瘤淋巴管研究的技術(shù)進(jìn)展

2.1 淋巴管注射法 分為直接和間接注射法。直接注射法即將有色溶劑注射于淋巴管或淋巴結(jié)內(nèi)，使其顯色后進(jìn)行觀察。由于水銀有一定毒性，僅限于對尸體淋巴管進(jìn)行注射，現(xiàn)逐步被油性注射劑和水性注射劑所取代。間接注射法是將注射用有色溶劑(如1%亞甲藍(lán)、2%～4%的天藍(lán)等)注入組織間隙內(nèi)，借助注射劑的擴(kuò)散作用，使其通過毛細(xì)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞間隙，進(jìn)入管腔，進(jìn)而使毛細(xì)淋巴管及下一級淋巴管顯色。

2.2 動(dòng)脈內(nèi)墨汁—硝酸銀注射法［3］即將墨汁—硝酸銀注入動(dòng)脈內(nèi)來研究淋巴管的方法，適用于活體動(dòng)物或新鮮尸體標(biāo)本。首先暴露被檢器官的動(dòng)脈，注入33 g/L硫酸鈉溶液，將動(dòng)脈內(nèi)及相應(yīng)器官內(nèi)的剩余血液沖出，然后注入硝酸銀水溶液及墨汁—硝酸銀溶劑至該器官呈現(xiàn)黑色，然后用甲醛固定被檢器官，切取部分組織經(jīng)沖洗、乙醇脫水、石蠟包埋、切片并封片等步驟，將切片置于陽光下曬2～3 d，利用紫外線將硝酸銀還原為黑色的銀顆粒，沉積于內(nèi)皮細(xì)胞上，于顯微鏡下便可觀察淋巴管及其內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。

2.3 淋巴管造影法 淋巴管造影法是將X線阻射的物質(zhì)注入淋巴管，通過X線透視觀察顯影的淋巴管或淋巴結(jié)。常用的造影劑有稀碘油、碘酞葡胺等，臨床常用Patent藍(lán)行皮下注射，直接將碘油制劑注入淋巴管行造影術(shù)，進(jìn)行腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移的相應(yīng)研究。

2.4 酶組織化學(xué)染色法 根據(jù)某些酶等化學(xué)成分的含量在淋巴管和血管中的差異來區(qū)分淋巴管和血管，適用于新鮮標(biāo)本。較特異的方法是5’-核苷酸酶—堿性磷酸酶雙重染色法，淋巴管及毛細(xì)淋巴管呈棕色或褐色，而血管及毛細(xì)血管呈現(xiàn)藍(lán)色。毛細(xì)淋巴管對5’-核苷酸酶呈陽性反應(yīng)，而毛細(xì)血管對堿性磷酸酶呈陽性反應(yīng)，根據(jù)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞酶譜活性差異及底物與之反應(yīng)后不同的產(chǎn)物，鑒別淋巴管及血管，進(jìn)而行淋巴管相應(yīng)的研究。

2.5 免疫組織化學(xué)法 應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原，對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。因毛細(xì)淋巴管相對于毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞少、且缺乏完整的基底膜，用Ⅳ型膠原及B27雙重免疫組織化學(xué)染色使毛細(xì)淋巴管呈紅色，而毛細(xì)血管呈深藍(lán)色。但腫瘤血管基底膜在某些特定條件下有時(shí)也不連續(xù)或缺如，在行免疫組化染色時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果，故該方法可靠性尚不穩(wěn)定。

3 淋巴管內(nèi)皮標(biāo)記物

近年來，一些淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物被發(fā)現(xiàn)，有關(guān)淋巴管生成的研究有了極大突破，這對于鑒別毛細(xì)淋巴管和毛細(xì)血管內(nèi)皮，研究淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞來源、特性及淋巴管生成的調(diào)控和靶向治療都有重要意義。

3.1 血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)VEGF是一組特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的多肽，VEGF家族包括 VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D 及胎盤生長因子(PLGF)等，有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及血管生成等作用。該家族的受體為酪氨酸激酶受體，主要包括VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3以及2個(gè)無活性受體。VEGF-C是VEGF家族中重要的組成部分，可與VEGFR2結(jié)合促進(jìn)血管生成;又可與VEGFR3結(jié)合，促進(jìn)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與遷移，調(diào)控淋巴管的發(fā)芽、增生，參與淋巴管的生成過程，并對胚胎發(fā)育和腫瘤的生長轉(zhuǎn)移起重要調(diào)節(jié)作用。

VEGFR3是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的淋巴管內(nèi)皮標(biāo)記物，作為特異性表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮的分子之一，可以簡單而準(zhǔn)確地識別淋巴管，其表達(dá)狀況與腫瘤的淋巴道轉(zhuǎn)移也有密切聯(lián)系［4］。但是對VEGFR3的深入研究發(fā)現(xiàn)，其不僅表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，在某些生理和病理狀態(tài)下也表達(dá)于人類正常的乳腺組織、鼻黏膜組織、有孔毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞、慢性炎癥反應(yīng)和腫瘤相關(guān)的血管內(nèi)皮細(xì)胞［5］。

3.2 LYVE-1 LYVE-1是含有332個(gè)氨基酸殘基的膜蛋白，與CD44同源，均勻分布于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的基底面和胞腔面，參與淋巴管內(nèi)皮對透明質(zhì)酸的結(jié)合和吸收;還參與腫瘤細(xì)胞及白細(xì)胞的歸巢。LYVE-1是第一個(gè)在淋巴管內(nèi)皮上發(fā)現(xiàn)的透明質(zhì)酸受體，也是一種比較可靠、特異性較好的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物。最近研究發(fā)現(xiàn)，該受體也表達(dá)于肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞和腎、腎上腺、胰、甲狀腺上皮細(xì)胞，且腫瘤內(nèi)約有10%的LYVE-1陽性脈管是血管。

3.3 腎小球足突細(xì)胞膜蛋白(Podoplanin)Podoplanin最初發(fā)現(xiàn)于腎小球足細(xì)胞表面，是一種黏液樣跨膜糖蛋白［6］。Podoplanin特異性表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮，而在血管內(nèi)皮中無表達(dá)，可作為淋巴管內(nèi)皮標(biāo)志物，并逐步用于腫瘤淋巴管生成及其淋巴轉(zhuǎn)移的研究中，其在多種腫瘤中的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)上調(diào)。Parr等［7］認(rèn)為在結(jié)腸癌及周邊組織中淋巴管形成增加，且Podoplanin表達(dá)增高與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。

3.4 同源異型核轉(zhuǎn)錄因子1(Prox-1)Prox-1在內(nèi)皮細(xì)胞中僅特異性地表達(dá)于胚胎淋巴管、成人正常組織淋巴管及腫瘤內(nèi)淋巴管，在非內(nèi)皮細(xì)胞中可以存在于晶狀體、心臟、神經(jīng)系統(tǒng)等組織器官中［8］。Wigle等［9］對小鼠模型淋巴管研究發(fā)現(xiàn)，Prox-1缺失會(huì)影響淋巴管的發(fā)育，甚至導(dǎo)致機(jī)體死亡，但不會(huì)影響血管生成。Chang等在研究非小細(xì)胞肺癌組織中Prox-1的表達(dá)時(shí)發(fā)現(xiàn)，Prox-1表達(dá)水平越高，腫瘤的TNM分級越高，且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率也相應(yīng)增高，認(rèn)為Prox-1可以作為預(yù)測非小細(xì)胞肺癌淋巴管轉(zhuǎn)移的重要蛋白。

3.5 多功能非酪氨酸激酶跨膜糖蛋白(NRPs)NRPs包括NRP-1和NRP-2。近年研究發(fā)現(xiàn)，NRPs可能與淋巴管生成、腫瘤淋巴管新生及淋巴道轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系［10］。Xu等［11］通過小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ脱芯堪l(fā)現(xiàn)，NRPs能調(diào)節(jié)VEGFR3在淋巴管內(nèi)皮上的表達(dá)水平，進(jìn)而調(diào)控淋巴管的發(fā)芽生長，促進(jìn)成熟小鼠體內(nèi)淋巴管樹的發(fā)展和增殖。在腫瘤淋巴管新生及淋巴道轉(zhuǎn)移的研究中也提出了同樣的觀點(diǎn)。Ochiumi等［12］對進(jìn)展期結(jié)腸癌的研究結(jié)果顯示，NRP-1高水平表達(dá)組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率顯著高于低水平組，由此推斷，NRP-1表達(dá)水平與結(jié)腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率相關(guān)。此外，Dallas等［13］也提出NRP-2的表達(dá)水平與胰腺癌細(xì)胞的生長、局部浸潤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。

3.6 D2-40 D2-40分子是在生殖細(xì)胞腫瘤和胚胎睪丸的精母細(xì)胞表面新發(fā)現(xiàn)的一種唾液酸黏蛋白，是最新發(fā)現(xiàn)的特異性標(biāo)記淋巴管的鼠來源IgG1單克隆抗體。近來研究發(fā)現(xiàn)，D2-40抗體能通過與唾液酸蛋白特異性結(jié)合檢測腫瘤淋巴管內(nèi)皮上固定的抗原決定簇，其敏感度和特異性均都高于其他淋巴管內(nèi)皮的分子標(biāo)志物［14］。D2-40可用來標(biāo)識多種腫瘤的新生微淋巴管內(nèi)皮上的抗原決定簇，該抗原決定簇在有管壁平滑肌的成熟淋巴管和血管內(nèi)皮上沒有表達(dá)［15］。甄樂鋒等［16］用 D2-40進(jìn)行免疫組化染色標(biāo)記組織淋巴管時(shí)發(fā)現(xiàn)，其僅在被覆單層內(nèi)皮細(xì)胞的小淋巴管如終末淋巴管顯色，為一種特異性較強(qiáng)的淋巴管標(biāo)記物，對于淋巴管生成的研究具有較好的實(shí)用意義。

4 淋巴管生成與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系

淋巴轉(zhuǎn)移是腫瘤轉(zhuǎn)移的主要途徑之一，也是決定患者治療方案及預(yù)后的重要因素;同時(shí)淋巴管的生成對腫瘤的轉(zhuǎn)移起重要作用。早期由于缺乏淋巴管特異性標(biāo)記物等原因，對于腫瘤淋巴管生成的研究相對滯后，但對于腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)淋巴管侵襲的理論，還是被大部分學(xué)者認(rèn)可。腫瘤細(xì)胞到達(dá)淋巴結(jié)后，在邊緣竇處增殖，由于毛細(xì)淋巴管管壁由單層內(nèi)皮細(xì)胞組合，細(xì)胞間缺乏緊密連接，且管腔基底膜不完整，有利于腫瘤細(xì)胞穿過管壁進(jìn)入管腔，在腫瘤原發(fā)部位或轉(zhuǎn)移器官的淋巴管管腔內(nèi)聚集成瘤栓，然后進(jìn)入下一級淋巴管，最終以阿米巴樣運(yùn)動(dòng)的形式進(jìn)入淋巴結(jié)實(shí)質(zhì)［17］。

2009年，Mohammed等［18］在乳腺癌的研究中證實(shí)了癌巢內(nèi)部無淋巴管存在，僅在癌灶邊緣及癌周組織中發(fā)現(xiàn)毛細(xì)淋巴管。腫瘤內(nèi)存在新生淋巴管，但其管壁菲薄，細(xì)胞間連接疏松，管腔常呈塌陷或閉塞狀態(tài)，為非功能性淋巴管［19］;而瘤周淋巴管常彌漫分布于腫瘤周圍，管腔呈擴(kuò)張狀態(tài)，更有利于腫瘤細(xì)胞的侵入。目前，VEGFR3介導(dǎo)的信號通路是公認(rèn)的淋巴管生成的主要調(diào)控機(jī)制;另外，Prox-1作為淋巴管生成的基本調(diào)控因子也起至關(guān)重要的作用。腫瘤細(xì)胞可以通過分泌VEGF-C、VEGF-D、Prox-1等調(diào)控因子來誘導(dǎo)淋巴管生成，并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的淋巴轉(zhuǎn)移。

淋巴管密度及單位面積中毛細(xì)淋巴管及淋巴管的數(shù)目，是客觀評估腫瘤新生淋巴管的重要指標(biāo)，并可以預(yù)測淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)及預(yù)后。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，瘤周淋巴管密度顯著高于瘤內(nèi)淋巴管密度，且瘤周淋巴管密度與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。

5 口腔癌淋巴管生成及淋巴轉(zhuǎn)移

研究發(fā)現(xiàn)，口腔癌的癌組織中存在淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及淋巴管增生。危由春等［20］認(rèn)為VEGF-C可誘導(dǎo)口腔癌淋巴管內(nèi)皮產(chǎn)生，促進(jìn)其增殖和遷移，導(dǎo)致淋巴管在癌巢周圍增生，且這種增生的淋巴管與正常組織淋巴管在形態(tài)結(jié)構(gòu)及組織學(xué)上有較大差異。李慧文等［21］選取62例舌鱗癌組織，以VEGFR3標(biāo)記其淋巴管，發(fā)現(xiàn)陽性淋巴管主要分布在癌組織周圍，癌間質(zhì)未見明顯成形淋巴管，認(rèn)為其原因是癌巢腫瘤細(xì)胞的膨脹性生長壓迫間質(zhì)淋巴管使其閉鎖。

口腔頜面部有豐富的淋巴管通路及吻合支，為癌細(xì)胞的淋巴轉(zhuǎn)移提供了便利途徑;而且舌、頰等組織由于運(yùn)動(dòng)頻繁，也為癌細(xì)胞的早期擴(kuò)散提供了有利條件?？谇话┑牧馨娃D(zhuǎn)移往往通過淋巴管轉(zhuǎn)移到區(qū)域淋巴結(jié)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是原發(fā)灶復(fù)發(fā)及生存率降低的重要原因。目前通常通過切除已腫大的淋巴結(jié)及臨床上懷疑存在轉(zhuǎn)移的區(qū)域淋巴結(jié)行病理檢查，確定是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;然而，已有文獻(xiàn)報(bào)道口腔鱗癌存在頸淋巴結(jié)隱匿性轉(zhuǎn)移，僅依靠臨床TNM分期評估患者頸淋巴結(jié)狀態(tài)及預(yù)后是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。

鑒于淋巴管生成在口腔癌淋巴轉(zhuǎn)移中的重要作用，抗淋巴管生成治療有望成為新的口腔癌治療方法，但這種治療是否對正常組織淋巴管及血管的正常生理功能有不良影響，還有待進(jìn)一步研究。早期采取分子生物學(xué)等方法檢測VEGFR3、LYVE-1等淋巴管內(nèi)皮標(biāo)記物，可為口腔癌的診斷及預(yù)后評估提供重要的參考信息。

［1］張剛，高巖.口腔鱗癌與淋巴轉(zhuǎn)移［J］.北京口腔醫(yī)學(xué)，2008，16(4):232-234.

［2］O’Donnell RK，Kupferman M，Wei SJ，et al.Gene expression signature predicts lymphatic metastasis in squamous cell carcinoma of the oral cavity［J］.Oncogene，2005，24(7):1224-1251.

［3］徐亞平，王學(xué)斌，肖傳斌.淋巴管形態(tài)學(xué)研究方法進(jìn)展［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2005，26(3):51-54.

［4］Donnem T，Al-Saad S，Al-shibli K，et al.Co-expression of PDGFB and VEGFR-3 strongly correlates with lymph node metastasis and poor survival in non-small-cell lung cancer［J］.Ann Oncol，2010，21(2):223-231.

［5］周雪飛，錢曉萍，劉寶瑞.淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物及其體外培養(yǎng)的研究進(jìn)展［J］.江蘇醫(yī)藥，2011，37(2):218-220.

［6］Raica M，Clipean AM，Ribatti D.The role of podoplanin in tumor progression and metastasis［J］.Anticancer Res，2008，28(5B):2997-3006.

［7］Parr C，Jiang WG.Quantitative analysis of lymphangiogenic makers in human colorectal cancer［J］.Int J Oncol，2003，23(2):533-539.

［8］吳靈潼，王強(qiáng)修.淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記物研究進(jìn)展［J］.山東醫(yī)藥，2008，48(1):114-115.

［9］Wigle JT，Harvey N，Detmar M，et al.An essential role for Prox-1 in the induction of the lymphatic endothelial cell phenotype［J］.EMBO J，2002，21(7):1505-1513.

［10］王宇鵬，徐衛(wèi)國.Neuropilins與腫瘤淋巴管生成和淋巴道轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展［J］.臨床腫瘤學(xué)雜志，2012，17(1):81-84.

［11］Xu Y，Yuan L，Mak J，et al.Neuropilin-2 mediates VEGF-C-induced lymphatic sprouting together with VEGFR3［J］.J Cell Biol，2010，188(1):115-130.

［12］Ochiumi T，Kitadai Y，Tanaka S，et al.Neuropilin-1 is involved in regulation of apoptosis and migration of human colon cancer［J］.Int J Oncol，2006，29(1):105-116.

［13］Dallas NA，Gray MJ，Xia L，et al.Neuropilin-2-mediated tumor growth and angiogenesis in pancreatic adenocarcinoma［J］.Clin Cancer Res，2008，14(24):8052-8060.

［14］Schacht V，Dadras SS，Johnson LA，et al.Up-regulation of the lymphatic marker podoplanin，a mucin-type transmembrane glycoprotein，in humansquamous cell carcinomas and germ cell tumors［J］.Am J Pathol，2005，166(3):913-921.

［15］Yonemura Y，Endou Y，Tabachi K，et al.Evaluation of lymphatic invasion in primary gastric cancer by a new monoclonal antibody，D2-40［J］.Hum Pathol，2006，37(9):1193-1199.

［16］甄樂鋒，葉長生，劉民鋒，等.D2-40和CD34在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及其意義［J］.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，30(7):1548-1551.

［17］Vinader V，Afarinkia K.The emerging role of CXC chemokines and their receptors in cancer［J］.Future Med Chem，2012，4(7):853-867.

［18］Mohammed RA，Ellis IO，Elsheikh S，et al.Lymphatic and angiogenic characteristics in breast cancer:morphometric analysis and prognostic implications［J］.Breast Cancer Res Treat，2009，113(2):261-273.

［19］李光明，范躍祖.淋巴管生成與腫瘤轉(zhuǎn)移［J］.國外醫(yī)學(xué):腫瘤學(xué)分冊，2003，30(6):428-430.

［20］危由春，江毅，文冰.口腔癌患者VEGF-C、PTN及Fascin的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系［J］.口腔醫(yī)學(xué)研究，2012，28(7):702-704.

［21］李慧文，黃鵬.舌鱗狀細(xì)胞癌淋巴管密度與淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系［J］.國際口腔醫(yī)學(xué)雜志，2007，34(6):399-401.