DC-CIK治療腎癌研究進(jìn)展

許振勝，彭大為，符芳姿，李建旺，張瑋芳

(中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬海口醫(yī)院，海南?？?70208)

DC-CIK治療腎癌研究進(jìn)展

許振勝，彭大為，符芳姿，李建旺，張瑋芳

(中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院，海南?？?70208)

樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)是目前已知體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原遞呈細(xì)胞。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷(CIK)細(xì)胞是一種高效、廣譜殺瘤活性的非主要組織相容性復(fù)合體限制性免疫效應(yīng)細(xì)胞。DC細(xì)胞與CIK細(xì)胞的有機(jī)結(jié)合可產(chǎn)生特異性免疫和非特異性免疫的雙重抗腫瘤作用。DC-CIK合理應(yīng)用可有效提高機(jī)體抗腫瘤作用，能夠殺傷清除不能用手術(shù)切除的極微小瘤灶或體內(nèi)散存的腫瘤細(xì)胞，起到延緩或阻止腫瘤轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的作用，為腎癌治療開(kāi)辟了一條新的治療途徑?，F(xiàn)就DC-CIK治療腎癌的研究進(jìn)展予以綜述。

腎癌；生物免疫療法；樹(shù)突狀細(xì)胞；細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞

腎癌占全身惡性腫瘤的3%，腎癌具有多重耐藥基因，對(duì)放、化療均不敏感。目前早期腎癌仍以手術(shù)治療為主，經(jīng)手術(shù)治療后5年生存率可達(dá)95%，但近一半的腎癌患者首診時(shí)已屬晚期或有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，約50%的患者術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，故轉(zhuǎn)移性腎癌預(yù)后較差，中位生存時(shí)間＜12個(gè)月，5年生存率＜10%[1]。長(zhǎng)期以來(lái)對(duì)于手術(shù)無(wú)法切除的晚期腎癌治療及如何預(yù)防根治性切除術(shù)后腫瘤的復(fù)發(fā)缺乏有效的方法。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，腎癌免疫治療呈現(xiàn)出可喜的療效，在腎癌的發(fā)病機(jī)制中生物免疫機(jī)制在其自然病程中起著重要作用。生物免疫治療是腎癌術(shù)后重要治療手段，其治療腫瘤為通過(guò)激發(fā)和增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，從而達(dá)到控制和消滅腫瘤。腎癌的生物免疫治療除了以前的IL-2、IFN-α等為代表的細(xì)胞因子外，以樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)為代表的過(guò)繼細(xì)胞免疫治療越來(lái)越受到關(guān)注[2-4]。DC是目前已知功能最強(qiáng)的專職抗原呈遞細(xì)胞，而CIK細(xì)胞殺傷腫瘤活性具有非主要組織相容性復(fù)合體限制性。DC與CIK是腫瘤免疫治療的兩個(gè)重要部分，前者識(shí)別病原，激活獲得性免疫系統(tǒng)，后者通過(guò)發(fā)揮自身細(xì)胞毒性和分泌細(xì)胞因子殺傷腫瘤細(xì)胞。本文將對(duì)DC+CIK治療在腎癌方面的研究予以綜述。

1 DC的生物學(xué)特性及抗瘤機(jī)制

DC由Steinman等[5]于1973年發(fā)現(xiàn)，因其成熟時(shí)細(xì)胞表面伸出膜狀或刺狀突起而得名。DC的前體細(xì)胞為或細(xì)胞，存在于人骨髓、臍血中的或細(xì)胞，體外添加GM-CSF和TNF-α的培養(yǎng)條件下可發(fā)育成DC，DC主要分為髓系DC和淋巴系DC，髓系DC包括干細(xì)胞來(lái)源的DC、單核細(xì)胞衍生的DC等。

人體內(nèi)抗原遞呈細(xì)胞中功能最強(qiáng)的細(xì)胞為樹(shù)突狀細(xì)胞，它能分泌如腫瘤壞死因子等多種細(xì)胞因子，誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T細(xì)胞，B細(xì)胞活性受影響，體液免疫應(yīng)答受活化，在機(jī)體抗腫瘤免疫(細(xì)胞+體液免疫)中起到很大作用。DC主要通過(guò)以下機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤作用：(1)誘導(dǎo)產(chǎn)生大量效應(yīng)T細(xì)胞；(2)趨化效應(yīng)T細(xì)胞遷移至腫瘤部位；(3)維持效應(yīng)T細(xì)胞在腫瘤部位的長(zhǎng)期存在；(4)分泌IL-12、GM-CSF、IL-1β、IFN-α等細(xì)胞因子；(5)抑制腫瘤血管生成[6]；與正常人相比，腎癌患者血液中DC和、、T細(xì)胞量較低，通過(guò)靜脈滴注DC可有效緩解病情[7]。

2 CIK的生物學(xué)特性及抗瘤機(jī)制

在體外CIK細(xì)胞是由骨髓或血液的單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)與多種細(xì)胞因子共同培養(yǎng)獲得。CIK細(xì)胞是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞，它是一類非T細(xì)胞受體限制性或非主要組織相容性復(fù)合物的免疫活性細(xì)胞，其主要效應(yīng)細(xì)胞為、T淋巴細(xì)胞，因?yàn)榧?xì)胞因子相互作用，殺傷細(xì)胞被激活后出現(xiàn)更好的增殖及殺傷活性[8-9]。目前研究顯示CIK主要通過(guò)多種途徑發(fā)揮抗腫瘤作用：(1)細(xì)胞因子活化殺傷細(xì)胞能直接殺傷腫瘤細(xì)胞：它通過(guò)釋放穿孔素/顆粒酶等相關(guān)毒性顆粒，腫瘤細(xì)胞裂解；(2)CIK細(xì)胞釋放的大量細(xì)胞因子：如IFN-γ、TNF-α、IL-2等，它們直接對(duì)腎癌細(xì)胞抑制，間接調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力殺傷腎癌細(xì)胞；(3)細(xì)胞因子活化殺傷細(xì)胞可誘導(dǎo)腎癌細(xì)胞的凋亡壞死：它通過(guò)表達(dá)Ⅱ型跨膜糖蛋白與腎癌細(xì)胞膜表達(dá)的Ⅰ型跨膜糖蛋白結(jié)合，引起腎癌細(xì)胞凋亡；(4)CIK細(xì)胞回輸后可以激活機(jī)體免疫系統(tǒng)，提高機(jī)體的免疫功能。CIK細(xì)胞具有以下優(yōu)點(diǎn)：增殖速度快，殺瘤活性高，殺瘤譜廣，對(duì)多重耐藥腫瘤細(xì)胞同樣敏感，能抵御腫瘤細(xì)胞引發(fā)的效應(yīng)細(xì)胞Fas-FasL凋亡，對(duì)正常骨髓造血影響輕微[8，10]，因此，CIK細(xì)胞在腎癌的生物免疫治療中具有廣闊的應(yīng)用前景。

3 DC-CIK的協(xié)同抗腫瘤作用

DC與CIK是腫瘤免疫治療的兩個(gè)重要部分，前者識(shí)別病原，激活獲得性免疫系統(tǒng)，后者通過(guò)發(fā)揮自身細(xì)胞毒性和分泌細(xì)胞因子殺傷腫瘤細(xì)胞。CIK細(xì)胞是由多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)的非特異性殺傷細(xì)胞，能分泌多種細(xì)胞因子(如IL-4、IFN等)，且具有部分比LAK、CD3AK細(xì)胞更強(qiáng)的殺傷活性。而臨床研究中發(fā)現(xiàn)有些腎癌患者進(jìn)行生物免疫細(xì)胞治療時(shí)，效果欠佳，考慮免疫效應(yīng)細(xì)胞對(duì)腎癌細(xì)胞產(chǎn)生相關(guān)抵抗，這與腎癌功能性的樹(shù)突狀細(xì)胞缺乏有關(guān)。樹(shù)突狀細(xì)胞活化細(xì)胞毒性T細(xì)胞的過(guò)程中起著非常重要的作用，因此，將DC-CIK聯(lián)合治療腎癌，將有助于解除腎癌患者T細(xì)胞的免疫無(wú)能，從而發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤作用。有文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)用DC或CIK細(xì)胞治療腎癌[8，11]，而DC-CIK聯(lián)合治療腎癌的報(bào)道則較少。目前有關(guān)DC增強(qiáng)CIK的殺瘤活性的機(jī)制還未完全清楚，可能有以下3點(diǎn)：(1)樹(shù)突狀細(xì)胞通過(guò)主要組織相容性復(fù)合體分子提呈腫瘤抗原供細(xì)胞因子活化殺傷細(xì)胞上的TCR特異性識(shí)別結(jié)合或Anti-CD3McAb可通過(guò)直接結(jié)合TCR-CD3復(fù)合物，以上兩種方式均可提供CIK活化的第一信號(hào)，第一種為特異性信號(hào)，第二種是非特異性活化信號(hào)；(2)白介素-12由DC分泌而成，其活化CIK起作用，能誘導(dǎo)CIK Th1型細(xì)胞免疫。另一方面，在促進(jìn)DC成熟過(guò)程中CIK起著非常重要的作用，它可通過(guò)其表面的CD40L與DC上的CD40互相作用而促進(jìn)DC的特異性分子、共刺激分子的表達(dá)及白介素-12的分泌[12]，CIK的培養(yǎng)上清液對(duì)DC生長(zhǎng)成熟也有促進(jìn)作用[13]；(3)DC-CIK細(xì)胞共同培養(yǎng)可降低CIK細(xì)胞群中免疫抑制T細(xì)胞的數(shù)量及其分泌的白介素-10，削弱Treg對(duì)抗腫瘤免疫細(xì)胞的抑制作用。有基礎(chǔ)研究[14-16]顯示，在腫瘤動(dòng)物模型中及腫瘤患者Treg細(xì)胞比例的升高與腫瘤的生長(zhǎng)有密切關(guān)系，Treg通過(guò)負(fù)性調(diào)節(jié)抗腫瘤免疫反應(yīng)誘發(fā)TLB功能障礙，Treg可負(fù)性調(diào)節(jié)機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)，從而引起機(jī)體T淋巴細(xì)胞功能障礙，抗腫瘤殺傷作用得到有效抑制，對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移起著促進(jìn)作用。有學(xué)者[17-18]認(rèn)為，DC-CIK可抑制Treg細(xì)胞，增強(qiáng)殺傷腫瘤細(xì)胞作用。

4 DC-CIK細(xì)胞治療腎癌的基礎(chǔ)和臨床研究

免疫功能缺陷在腎癌患者不同程度的存在，腎癌主要的輔助治療手段是免疫治療，DC注射機(jī)體內(nèi)后，T與DC細(xì)胞結(jié)合，分泌白介素-12，誘導(dǎo)Thl型免疫應(yīng)答，腫瘤細(xì)胞得到有效清除。細(xì)胞增殖活性在DC-CIK共培養(yǎng)后的細(xì)胞群體中更強(qiáng)，不僅顯著提高了DC的功能，而且提高了CIK的細(xì)胞毒作用，DC-CIK互相作用，顯著提高CIK的殺傷活性和增殖能力。有學(xué)者動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腎癌患者接受1～3個(gè)療程DC-CIK細(xì)胞免疫治療前后淋巴細(xì)胞亞群的變化，與治療前比較，1～3個(gè)療程治療后T細(xì)胞計(jì)數(shù)有明顯下降趨勢(shì)(P＜0.05)；等治療后無(wú)明顯變化(P＞0.05)T細(xì)胞(Treg細(xì)胞)治療后有降低趨勢(shì)(P＜0.05)。6例晚期腎癌患者中完全緩解(CR)1例，部分緩解(PR)3例，疾病穩(wěn)定(SD)1例，疾病進(jìn)展(PD)1例；計(jì)算客觀反應(yīng)率(ORR)=CR+PR=60%，疾病控制率(DCR)=CR+PR+ SD=90%，除1例患者出現(xiàn)一過(guò)性發(fā)熱外，余患者無(wú)不良反應(yīng)。有研究報(bào)道33例惡性腫瘤患者給予DC-CIK治療后CR 3例，PR 17例，SD 9例，PD 4例，計(jì)算客觀反應(yīng)率(ORR)=CR+PR=60.6%，疾病控制率(DCR)=CR+PR+SD=87.8%。治療后患者外周血T細(xì)胞較治療前均明顯增高(P均＜0.05)。生活質(zhì)量KPS評(píng)分較治療前明顯上升(P＜0.01)。無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)和化驗(yàn)指標(biāo)異常。湛海倫等[19]的實(shí)驗(yàn)采用Anti-CD3McAb及RhIL-2聯(lián)合擴(kuò)增CIK，培養(yǎng)前后約擴(kuò)增了6 017倍，其免疫表型也發(fā)生變化，培養(yǎng)前主要以細(xì)胞群為主，培養(yǎng)后CIK為異質(zhì)性T淋巴細(xì)胞群，其中以細(xì)胞群為主，同時(shí)細(xì)胞數(shù)目培養(yǎng)前后增殖倍數(shù)最大。研究者采取人腎癌細(xì)胞系(ACHN)作為相關(guān)靶細(xì)胞，效應(yīng)細(xì)胞為負(fù)載腎癌特異性抗原G250的DC-CIK共培養(yǎng)細(xì)胞，探討腎癌的免疫殺瘤作用，實(shí)驗(yàn)顯示負(fù)載G250腎癌細(xì)胞抗原的DC-CIK細(xì)胞對(duì)腎癌的殺傷作用明顯強(qiáng)于單純CIK組和DC-CIK組(P＜0.01)，表明識(shí)別多克隆抗原的CIK細(xì)胞對(duì)ACHN腎癌細(xì)胞的殺傷效果較好。綜上所述，DC-CIK免疫治療能改善腎癌患者免疫抑制情況，提高機(jī)體的抗腫瘤免疫效應(yīng)。

5 DC-CIK細(xì)胞與腎癌常規(guī)治療方法的聯(lián)合應(yīng)用

DC-CIK作為一種新型的過(guò)繼免疫治療方法，與腎癌的常規(guī)治療方法手術(shù)、化療、放療、免疫治療及分子靶向藥物等聯(lián)合應(yīng)用可實(shí)現(xiàn)腫瘤的多學(xué)科綜合治療，取得較好的療效，為臨床治療腎癌提供多種選擇。

5.1 DC-CIK與手術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用早期腎細(xì)胞癌經(jīng)手術(shù)治療后5年生存率可達(dá)95%，近一半的腎癌患者在確診時(shí)己發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移而無(wú)法接受手術(shù)治療，約50%的患者術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，mRCC中位生存時(shí)間＜12個(gè)月，5年生存率低于10%。目前，腫瘤的生物治療已被列為繼外科、化療、放療之后的第四種抗腫瘤治療模式。生物治療的應(yīng)用為轉(zhuǎn)移性腎癌患者開(kāi)辟了一條新的治療途徑。湛海倫等[20]研究1999年1月至2007年1月收治45例早期腎癌患者，臨床分期Tl～3N0～1M0，均行腹腔鏡腎癌根治術(shù)，術(shù)后隨機(jī)分為三組：DC-CIK實(shí)驗(yàn)組(n=20)、IFN-α治療組(n=13)、對(duì)照組(n=12)。測(cè)驗(yàn)各組術(shù)前及免疫治療后外周血T淋巴細(xì)胞亞群及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，比較各組療效及其并發(fā)癥。結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組及治療組免疫治療后比值較術(shù)前顯著增加(P＜較免疫治療前降低(P＜0.05)，而實(shí)驗(yàn)組的毒副反應(yīng)比治療組明顯減輕(P＜0.05)。長(zhǎng)期隨訪表明實(shí)驗(yàn)組及治療組患者均存活，其中實(shí)驗(yàn)組無(wú)一例復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，治療組1例復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，對(duì)照組4例復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移并致其中3例死亡。實(shí)驗(yàn)組、治療組與對(duì)照組1年生存率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但3、5年生存率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Zhan等[21]研究認(rèn)為局限性晚期和晚期腎癌患者術(shù)后給予DC-CIK細(xì)胞治療可能預(yù)防腎癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與提高總生存率。因此手術(shù)是早期腎癌的主要治療手段，術(shù)后給予DC-CIK治療對(duì)腎癌患者免疫狀態(tài)有所改善，可能預(yù)防腎癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與提高總生存率，且副作用小。

5.2 DC-CIK與化療的聯(lián)合應(yīng)用腎癌細(xì)胞具有多藥耐藥基因(MDR-1)，細(xì)胞內(nèi)的p170蛋白能將進(jìn)入癌細(xì)胞內(nèi)的化療物質(zhì)泵出細(xì)胞外，故化療效果不佳。腎癌對(duì)化療藥物普遍耐藥，化療沒(méi)有理想的突破，以吉西他濱、5-Fu類藥物為基礎(chǔ)的化療在某種程度上提高了療效，但無(wú)進(jìn)展生存期、總生存期仍不理想[22]?；煂?duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷呈一級(jí)殺傷，但不能有效殺傷休眠期的腫瘤細(xì)胞，而免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞呈0級(jí)殺傷，可清除化療后微小殘余病灶及的休眠期腫瘤細(xì)胞。故有學(xué)者提出應(yīng)用DC-CIK聯(lián)合化療治療腎癌。韓正祥等[23]研究31例mRCC患者首先經(jīng)實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)外周血G250 mRNA為陽(yáng)性表達(dá)，予兩個(gè)周期的DC-CIK聯(lián)合化療(吉西他濱+替加氟)后，再次檢測(cè)外周血中G250 mRNA陽(yáng)性表達(dá)情況，并評(píng)價(jià)DC-CIK聯(lián)合化療對(duì)腫瘤的療效。結(jié)果顯示：DC-CIK聯(lián)合化療后31例G250 mRNA陽(yáng)性的腎癌患者外周血中18例(58.1%)表達(dá)下降，5例(16.1%)無(wú)明顯變化，8例(25.8%)表達(dá)水平呈上升，與化療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；治療后11例PR(35.5%)，9例SD(29.0%)，11例PD(35.5%)，疾病控制率(DCR)=CR+PR+SD=64.5%；轉(zhuǎn)移性腎癌患者外周血中G250 mRNA表達(dá)變化與生物化療療效顯著相關(guān)(r=0.498)。因此得出結(jié)論：檢測(cè)轉(zhuǎn)移性腎癌患者外周血中G250 mRNA變化可用于評(píng)價(jià)生物化療的療效。因此DC-CIK聯(lián)合化療可提高M(jìn)DR腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性，化療可通過(guò)對(duì)免疫機(jī)體的調(diào)整和對(duì)腫瘤抗原調(diào)變的雙重作用，增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫功能。

5.3 DC-CIK與放療的聯(lián)合應(yīng)用放療治療腫瘤的原理在于它能引起細(xì)胞DNA變化，對(duì)細(xì)胞的殺傷作用超過(guò)了細(xì)胞本身的修復(fù)能力，但腎癌對(duì)放療不敏感。黃建華等[24]研究BALB/a小鼠右腋下皮下注射2.5×106Renca腎癌細(xì)胞制作移植瘤模型，分為無(wú)治療對(duì)照組、放療組、DC組和DC聯(lián)合放療組四組進(jìn)行治療。BALB/c小鼠模型為皮下荷瘤，連續(xù)5 d(d12～16)對(duì)腫瘤局部進(jìn)行放射治療，劑量6 mv電子線，每次給予7 Gy，第11、15、19和22天分別4次在腫瘤部位直接注射未負(fù)載腫瘤抗原的DC細(xì)胞，每次1×106個(gè)細(xì)胞，小鼠第28天處死。通過(guò)檢測(cè)各組小鼠腫瘤生長(zhǎng)速度和瘤體重量，并檢測(cè)小鼠脾細(xì)胞IL-10、IL-4、IL-2和IFN-γ分泌水平。檢測(cè)結(jié)果顯示：與單純治療組比較，DC聯(lián)合放療組腫瘤體積明顯減小，生長(zhǎng)明顯緩慢，IL-2、IFN-γ和IL-4在脾細(xì)胞中分泌力較前明顯上升，與其他各組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。由此可見(jiàn)，放療聯(lián)合DC免疫治療注射腫瘤內(nèi)能較好地抑制BALB/c小鼠腎癌移植瘤生長(zhǎng)，療效比單一方法治療效果好。放療+DC的方案是一種以原位腫瘤抗原為模板激活DC擴(kuò)增成熟的新技術(shù)，新技術(shù)創(chuàng)立有可能為已喪失手術(shù)的腫瘤患者提供獲取自身腫瘤相關(guān)抗原進(jìn)行主動(dòng)性免疫治療的新途徑。但目前未有DC-CIK與放療的聯(lián)合應(yīng)用治療腎癌的相關(guān)報(bào)道。

5.4 DC-CIK與免疫治療的聯(lián)合應(yīng)用近30年來(lái)，大量的實(shí)驗(yàn)證實(shí)IL-2等治療對(duì)于預(yù)防根治性切除術(shù)后腎癌的復(fù)發(fā)及治療轉(zhuǎn)移性腎癌的治療顯現(xiàn)了一定的療效?；仡櫺苑治?005年7月至2011年6月60例腎癌術(shù)后患者，在切除原發(fā)病灶后接受DC+CIK免疫治療，同時(shí)予IL-2靜滴21 d。免疫學(xué)反應(yīng)和臨床療效通過(guò)T淋巴細(xì)胞亞群分析、CT檢查進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果治療后患者外周血自然殺傷細(xì)胞、細(xì)胞毒T細(xì)胞、NKT細(xì)胞百分比較治療前增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Ⅰ～Ⅲ期42例患者行腎癌根治性切除術(shù)，2例失訪，1例復(fù)發(fā)，其他未見(jiàn)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，隨訪時(shí)間7～67個(gè)月，中位隨訪時(shí)間16個(gè)月；Ⅳ期18例腎癌患者中行姑息性腎切除，1例失訪，隨訪17例中1例CR，3例PR，8例SD，5例PD，隨訪時(shí)間6～66個(gè)月，中位隨訪時(shí)間15個(gè)月，不良反應(yīng)可耐受。由此可見(jiàn)，DC聯(lián)合CIK+IL-2治療對(duì)腎癌術(shù)后患者的免疫功能有增強(qiáng)作用，降低復(fù)發(fā)率，并且對(duì)于mRCC的治療也顯現(xiàn)一定的療效。低劑量IL-2治療mRCC的有效率約為10%，CR率低，但大劑量應(yīng)用IL-2雖可提高有效率，但副作用明顯增加，可出現(xiàn)骨髓抑制誘發(fā)感染出血、畏寒、高熱等風(fēng)險(xiǎn)，大部分患者不能耐受。

5.5 DC-CIK與分子靶向藥物的聯(lián)合應(yīng)用索拉非尼(Sorafenib)是多靶點(diǎn)生物靶向藥物，作用機(jī)理為阻斷由RAF/MEK/ERK介導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路從而抑制腫瘤增殖，又作用于VEGFR抑制新生血管生成和切斷腫瘤細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，達(dá)到抑制腫瘤生長(zhǎng)。索拉非尼本身對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性作用外，還作為“刺激誘導(dǎo)”源，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞表達(dá)免疫激活物NKG2D(NKG2D定義：即CD314，為MIC-A受體，是固有免疫系統(tǒng)中一個(gè)重要的激活性受體，它通過(guò)識(shí)別靶細(xì)胞表面誘導(dǎo)產(chǎn)生的配體來(lái)傳遞活化信號(hào)并激活免疫系統(tǒng)，從而對(duì)靶細(xì)胞發(fā)揮殺傷作用，靶細(xì)胞的NKG2D配體表達(dá)水平直接關(guān)系到免疫效應(yīng)細(xì)胞DC、CIK細(xì)胞等對(duì)其的殺傷活性)配體與CIK細(xì)胞表面NKG2D受體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)DC、CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷。索拉非尼可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞高表達(dá)NKG2D配體，DC、CIK細(xì)胞對(duì)高表達(dá)NKG2D配體的腫瘤細(xì)胞有較高殺傷活性，而對(duì)正常組織無(wú)殺傷作用，具有殺傷靶向性。Romero等[25]研究發(fā)現(xiàn)提示索拉非尼也許可以用作輔助分子，因?yàn)樗梢哉T導(dǎo)或者重置MIC-A/B陽(yáng)性腫瘤的IL-15Rα/IL-15，以及敏感患者的循環(huán)中的單核細(xì)胞，因此有助于提高NKG2D(+) Th1的生物學(xué)活性。李建旺等[26]的研究用26例mRCC患者外周血進(jìn)行DC-CIK擴(kuò)增，檢測(cè)其CIK、DC-CIK表型，用靜脈回輸方法，對(duì)mRCC患者進(jìn)行自體DC-CIK聯(lián)合索拉非尼治療。結(jié)果顯示26例中CR 1例，PR 4例，SD 17例，PD 4例，客觀反應(yīng)率(ORR)=CR+PR=19.2%，疾病控制率(DCR)=CR+PR+ SD=72.7%；中位總體生存期(OS)為25個(gè)月，中位無(wú)進(jìn)展生存期(PFS)14個(gè)月。主要不良反應(yīng)為皮疹、腹瀉、高血壓、脫發(fā)、發(fā)熱、乏力、流感樣癥狀、厭食、中性粒細(xì)胞減少等。按預(yù)后分層模型MSKCC危險(xiǎn)因素評(píng)分，低危組的RR高于高危組(P＜0.05)，低、中、高危組的PFS差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)?？梢?jiàn)，自體DC-CIK聯(lián)合索拉非尼治療轉(zhuǎn)移性腎癌患者療效尚可，毒副反應(yīng)可耐受。DC+CIK聯(lián)合索拉非尼治療mRCC能夠有效改善患者生活質(zhì)量，預(yù)期延長(zhǎng)患者的生存期，不良反應(yīng)多數(shù)可耐受，具有明顯臨床使用價(jià)值。

6 結(jié)語(yǔ)

腎癌具有MDR-1，對(duì)放化療均不敏感，早期腎癌目前仍以手術(shù)治療為主，近一半的腎癌患者在確診時(shí)己發(fā)生轉(zhuǎn)移而無(wú)法手術(shù)，約一半的患者術(shù)后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，mRCC的中位OS＜12個(gè)月，5年生存率低于10%。生物治療為mRCC患者開(kāi)辟了新的治療途徑。DC是機(jī)體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原遞呈細(xì)胞，CIK細(xì)胞是一種高效、廣譜殺瘤活性的非MHC限制性免疫效應(yīng)細(xì)胞，DC-CIK結(jié)合可產(chǎn)生特異性和非特異性免疫的雙重抗腫瘤作用，與手術(shù)、放化療、索拉非尼聯(lián)合應(yīng)用，對(duì)人體抗腫瘤作用會(huì)有所提高，殺傷清除不能用手術(shù)切除的極微小瘤灶或體內(nèi)散存的腫瘤細(xì)胞，起到延緩或阻止腫瘤轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的作用，具有很好的臨床應(yīng)用前景。但目前DC-CIK聯(lián)合治療腎癌的報(bào)道則較少，需進(jìn)一步研究確定療效，今后研究方向是腎癌患者個(gè)體化治療，尤其是DC-CIK聯(lián)合索拉非尼治療腎癌，索拉非尼可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞高表達(dá)NKG2D配體，DC、CIK細(xì)胞對(duì)高表達(dá)NKG2D配體的腫瘤細(xì)胞有較高殺傷活性，而對(duì)正常組織無(wú)殺傷作用，具有殺傷靶向性，故具有低毒和高效的特點(diǎn)，且口服用藥方便，不需要長(zhǎng)期住院，大大節(jié)省了醫(yī)療費(fèi)用。DC-CIK與索拉非尼如何合理應(yīng)用、回輸生物細(xì)胞劑量及回輸途徑是今后研究的方向，目的為進(jìn)一步提高腎癌治療有效率。

參考資料：

[1]郭三維,董柏君,黃翼然.腎癌預(yù)后分析的研究進(jìn)展[J].國(guó)際泌尿系統(tǒng)雜志,2006,26(3):309-315.

[2]楊茂,郭志,司同國(guó),等,動(dòng)脈栓塞聯(lián)合CIK細(xì)胞對(duì)中晚期腎癌患者免疫功能的影響[J].臨床放射學(xué)雜志,2011,30(3): 398-401.

[3]李霞,徐文漭,崔靜,等.CIK細(xì)胞治療局限性腎癌的療效[J].腫瘤防治研究,2011,38(8):950-953.

[4]Su X,Zhang L,Jin L,et al.Immunotherapy with cytokine-induced killer cells in metastatic renal cell carcinoma[J].Cancer Biother Radiopharm,2010,25(4):465-470.

[5]Steinman RM,Cohn ZA.Identification of a novel cell type in peripheral lymphoid organs of mice.I.Morphology,quantitation,tissue distribution[J].J Exp Med,1973,137(5):1142-1162.

[6]Gabrilovich D.Mechanisms and functional significance of tumour-induced dendritic-cell defects[J].Nat Rev Immunol,2004,4(12): 941-952.

[7]Hase S,Weinitschke K,Fischer K.Monitoring peri-operative immune suppression in renal cancer patients[J].Oncol Rep,2011,25 (5):1455-1464.

[8]Wang H,Zhou FJ,Wang QJ,et al.Efficacy of autologous renal tumor cell lysate-loaded dendritic cell vaccine in combination with cytokine-induced killer cells on advanced renal cell carcinoma—a report of ten cases[J].Ai Zheng,2006,25(5):625-630.

[9]Hongeng S,Petvises S,Worapongpaiboon S,et al.,Generation ofcytokine-induced killer cells and their in vitro cytotoxicity against pediatric cancer cells[J].Int J Hematol,2003,77(2): 175-179.

[10]Jiang J,Xu N,Wu C,et al.Treatment of advanced gastric cancer by chemotherapy combined with autologous cytokine-induced killer cells[J].Anticancer Res,2006,26(3B):2237-2242.

[11]高艷,曹水,任秀寶,等.CIK細(xì)胞治療轉(zhuǎn)移性腎癌48例的療效預(yù)測(cè)因素分析[J].中國(guó)腫瘤臨床,2011,38(2):108-111,113.

[12]Marten A,Ziske C,Schottker B,et al.Interactions between dendritic cells and cytokine-induced killer cells lead to an activation of both populations[J].J Immunother,2001,24(6):502-510.

[13]Tsiatas ML,Gritzapis AD,Cacoullos NT,et al.A novel culture environment for generating mature human dentritic cells from peripheral bloodcells[J].Anticancer Res,2001,21(2A):1199-1206.

[14]Peggs KS,Quezada SA,Allison JP.Cancer immunotherapy:co-stimulatory agonists and co-inhibitory antagonists[J].Clin Exp Immunol, 2009,157(1):9-19.

[15]Authors Kono K,Kawaida H,Takahashi A,et al.CD4(+)CD25high regulatory T cells increase with tumor stage in patients with gastric and esophageal cancers[J].Cancer Immunol Immunother,2006,55 (9):1064-1071.

[16]Sakaguchi S.Naturally arisingregulatory t cells for immunologic self-tolerance and negative control of immune responses[J]. Annu Rev Immunol,2004,22:531-562.

[17]劉苗,金潤(rùn)銘,姜毅.樹(shù)突細(xì)胞聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞生物學(xué)特性和體外殺瘤機(jī)制[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2011,26(1): 35-38.

[18]張朝華,趙春利.腎癌患者外周血和腫瘤組織內(nèi)Treg細(xì)胞比例與預(yù)后的關(guān)系[J].中國(guó)藥業(yè),2010,19(18):30-31.

[19]湛海倫,高新,邱劍光,等.抗原致敏DC與CIK共培養(yǎng)體外抗腎癌效應(yīng)的研究[J].中國(guó)病理生理雜志,2006,22(10):1993-1996.

[20]湛海倫,高新,蔡育彬,等.腹腔鏡腎癌根治術(shù)聯(lián)合DC-CIK細(xì)胞免疫治療的臨床療效[J].中華腔鏡泌尿外科雜志(電子版), 2007,1(2):112-116.

[21]Zhan HL,Gao X,Pu XY,et al.Arandomized controlled trial of postoperative tumor lysate-pulsed dendritic cells and cytokine-induced killer cells immunotherapy in patients with localized and locally advanced renal cell carcinoma[J].Chin Med J(Engl),2012,125(21): 3771-3777.

[22]Jonasch E,Lal LS,Atkinson BJ,et al.Treatment of metastatic renal carcinoma patients with the combination of gemcitabine,capecitabine and bevacizumab at a tertiary cancer centre[J].BJU In,2011, 107(5):741-747.

[23]韓正祥,張?zhí)m勝,王曉友,等.DC-CIK聯(lián)合化療對(duì)晚期腎癌患者外周血中微轉(zhuǎn)移表達(dá)的影響[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2012,28(18): 3028-3030.

[24]黃建華,李嶠,王瑤,等.樹(shù)突狀細(xì)胞免疫治療輔助放射治療抑制小鼠腎癌移植瘤的生長(zhǎng)[J].中國(guó)腫瘤生物治療雜志,2006,13 (4):249-252.

[25]Romero F,Levy DE,Speiser D.Regulation ofNKG2D+Th1 cells in patients with metastatic melanoma treated with sorafenib: role of IL-15Ralpha and NKG2D triggering[J].Cancer Res,2014, 74(1):68-80.

[26]李建旺,黃春珍,李健華,等.白體CIK細(xì)胞及DC細(xì)胞聯(lián)合索拉非尼治療轉(zhuǎn)移性腎癌的療效與安全性[J].山東醫(yī)藥,2012,52(1): 7-9.

Research advances in DC-CIK in the treatment of renal carcinoma.

X U Zhen-sheng,PENG Da-wei,FU Fang-zi, LI Jian-wang,ZHANG Wei-fang.Department of Oncology,Haikou People's Hospital,Haikou 570208,Hainan,CHINA

Dendritic cells(DC)are known as the most potent antigen-presenting cells(APC).Cytokine induced killer(CIK)cells have highly anti-tumor activity and are a kind of highly efficient,broad-spectrum killing tumor cells with non-MHC-restriction.The combination of DC and CIK can provide both specific-immune and nonspecific-immune anti-tumor functions.The reasonable application of DC-CIK can effectively improve the anti-tumor effect of human body.It can kill tiny tumor cells which spread in the body and cannot be removed by surgery.It decreased and prevented tumor metastasis and recurrence,which provides a new strategy for renal carcinoma treatment.

Renal carcinoma;Biological immune therapy;Dendritic cells;Cytokine induced killer cells

R737.11

A

1003—6350（2014）20—3031—05

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.20.1190

2014-02-23)

海南省衛(wèi)生廳醫(yī)學(xué)科研立項(xiàng)課題（編號(hào)：2010-SWY-11-056）

許振勝。E-mail：22247316@qq.com