高效液相色譜法測定中藥洗發(fā)水中紅景天苷的含量

張榕文，任杰麟，蔣日瓊，吳志強，萬玉華

(霸王(廣州)有限公司，廣東 廣州 510440)

紅景天為景天科植物大花紅景天(Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba)的干燥根莖［1］。味甘，苦，性平，歸心、肺經(jīng)，有益氣活血、通脈平喘的功效，可應用于氣虛血瘀、胸痹心痛、中風偏癱、倦怠氣喘［1］，具有較高的藥用和保健價值。紅景天的應用歷史悠久，早在兩千年前，古人就以它入藥，用以強身健體。近年來越來越受到人們的重視，并且被廣泛運用于日化產(chǎn)品中，包含面膜、防曬霜、美白膏等護膚品及滋補營養(yǎng)頭發(fā)的洗發(fā)水。紅景天日化產(chǎn)品在市場上廣受消費者的喜愛，具有較高的市場認知度，是近年來在日化產(chǎn)品中運用得較為廣泛的一味中草藥。

將紅景天活性成分紅景天苷加入到洗發(fā)水中，可以修復受損的頭發(fā)表皮層，防止頭發(fā)內(nèi)蛋白質(zhì)與水分的流失與發(fā)梢開叉及斷裂，溫和滋養(yǎng)頭皮，在秀發(fā)表面形成順滑保護膜，令頭發(fā)烏黑亮澤、倍感絲質(zhì)柔順［2］。本文主要通過HPLC 法對紅景天及中藥洗發(fā)水進行紅景天苷的含量測定。

1 實驗部分

1.1 材料與儀器

紅景天，經(jīng)鑒定為景天科植物大花紅景天的干燥根和根莖;紅景天苷對照品(四川省維克奇生物科技有限公司，批號10338-51-9);甲醇，色譜純;其余試劑均為分析純;紅景天中藥洗發(fā)水，自制。

日立L-2000 高效液相色譜儀，配四元梯度泵、自動進樣器和L-2420UV 檢測器;KQ128 型超聲儀;FA2004 電子天平。

1.2 色譜條件

色譜柱為島津ODS-SP(150 mm × 4.6 mm，5 μm)，流 動 相 為 甲 醇∶ 水 = 15 ∶ 85，流 速1.0 mL/min，檢測波長275 nm，柱溫為25 ℃，進樣量10 μL。

1.3 溶液制備

1.3.1 對照品溶液的制備 精密稱取紅景天苷，加甲醇配制成濃度為0.58 mg/mL 的對照品溶液。

1.3.2 中藥洗發(fā)水樣品的制備 取紅景天洗發(fā)水約5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5 mL，稱定質(zhì)量，持續(xù)攪勻后，靜置分層，稱量，用甲醇補重，離心15 min，取上清液體，搖勻，濾過，續(xù)濾液過0.45 μm 微孔濾膜，即得。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系

精密吸取紅景天苷對照品溶液，分別進樣2，4，5，10，15 μL 和20 μL，按色譜條件測定，以進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線［3-5］。得到回歸方程y=3 000 000x－2 790.4 (r=0.999 9)，結(jié)果表明，紅景天苷在0.036 ～0.396 μg/mL 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

由圖1、圖3、圖4 可知，系統(tǒng)適應性良好。

圖1 紅景天苷對照品HPLC 圖譜Fig.1 The HPLC atlas of salidroside

圖2 線性關(guān)系Fig.2 The linear relationship

紅景天洗發(fā)水的測定結(jié)果見圖3、圖4。

圖3 紅景天洗發(fā)水樣品HPLC 圖譜Fig.3 The HPLC atlas of Rhodiola shampoo

圖4 紅景天洗發(fā)水(空白組)HPLC 圖譜Fig.4 The HPLC atlas of Rhodiola shampoo(the blank group)

2.2 精密度

分別吸取對照品溶液，按色譜條件重復進樣6次，每次進樣10 μL，按色譜條件測定。結(jié)果表明，紅景天苷相對標準偏差為0.5%。

2.3 重復性

制備供試品溶液6 份，精密吸取10 μL 測定。結(jié)果表明，紅景天苷RSD 為1.0%，表明該方法重復性良好。

2.4 穩(wěn)定性

精密吸取同一供試品溶液10 μL，分別于0，2，4，8，12 h 和24 h 測定。結(jié)果表明，紅景天苷RSD 為1.0%。

2.5 加樣回收率

取樣品，加入一定量的對照品溶液，同法處理樣品，測定峰面積，計算回收率、RSD 值，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率的測定結(jié)果(n=6)Table 1 The measurement result of the recovery of added samples

2.6 樣品測定

取中藥洗發(fā)水5 g，制備供試品溶液，進樣10 μL，記錄峰面積，結(jié)果見表2。

表2 4 批中藥洗發(fā)水樣品中紅景天苷含量測定結(jié)果Table 2 The determination results of the salidroside content from 4 batches of herbal shampoo

綜上所述，以紅景天苷對照品作標準曲線，在0.036 ～0.396 μg 內(nèi)線性關(guān)系良好(r =0.999 9)。加樣回收率為79.53%。添加量為10%的中藥洗發(fā)水中紅景天苷含量在0.030 ～0.034 mg/g。

3 結(jié)論

本次實驗研究通過HPLC 方法對紅景天的活性成分進行含量測定，實驗結(jié)果表明，該法簡便、準確，重現(xiàn)性好，可以作為紅景天洗發(fā)水中紅景天苷含量的測定方法。同時，為日化行業(yè)進一步規(guī)范中草藥活性物質(zhì)的運用，及相關(guān)中草藥活性成分定性定量的檢測和質(zhì)量監(jiān)控提供了可靠的科研實驗數(shù)據(jù)。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:144.

［2］ 陳志英，陳玉婷，王丹紅.HPLC 測定不同品種紅景天中紅景天苷的含量［J］.中國中藥雜志，2006，31(11):939-941.

［3］ 劉偉學，肖德華，劉德文.HPLC 測定高山紅景天中紅景天苷的含量［J］.中國林副特產(chǎn)，2005(4):9.

［4］ 楊曉艷，蘆啟琴，張曉峰.HPLC 測定紅景天除鞣質(zhì)后紅景天苷的含量的變化［J］.分析試驗室，2006，27(5):233-235.

［5］ 胡海英，楊麗嘉，胡海云，等.不同產(chǎn)地紅景天藥材中紅景天苷含量的測定［J］.河南醫(yī)學研究，2007，16(3):203-204，218.