追施氮肥量對菘藍(lán)根的外形品質(zhì)、 干物質(zhì)積累及活性成分含量的影響

肖云華， 呂婷婷， 唐曉清， 王康才， 瞿光航， 朱毅斌， 李月鵬

(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，南京 210095)

常用中藥板藍(lán)根與大青葉分別來自于十字花科(Cruciferae)菘藍(lán)屬二年生草本植物菘藍(lán)IsatisindigoticaFort的干燥根與葉，其中板藍(lán)根是應(yīng)用廣泛的大宗藥材，性苦、 寒，歸心、 胃經(jīng)，具有清熱解毒、 涼血利咽的功效[1]。大青葉性苦、 寒，歸心、 肺、 胃經(jīng)，具有涼血消斑、 清肝瀉火、 定驚的功效[2]。板藍(lán)根在臨床配方中應(yīng)用較多，還與其它中藥組成復(fù)方如板藍(lán)根顆粒、 板藍(lán)根軟膠囊、 板藍(lán)根片等，廣泛用于治療多種疾病如流感、 腮腺炎、 乙腦、 肝炎，是公認(rèn)的有較好抗病毒效果的中藥之一。近年又發(fā)現(xiàn)其有抗血小板聚集、 增強(qiáng)機(jī)體免疫功能及抗內(nèi)毒素等作用。板藍(lán)根主要化學(xué)成分包括生物堿類、 黃酮類、 腺苷、 有機(jī)含硫化合物、 有機(jī)酸類等，其中生物堿類、 多糖類、 黃酮類等專屬性較強(qiáng)，是近年來研究較多的成分[3]。

氮素營養(yǎng)是影響植物生長和次生代謝過程的重要環(huán)境因子之一[4-5]，氮素的吸收和同化與植物的很多生理過程、 產(chǎn)量和品質(zhì)關(guān)系密切[6]。植物的生長發(fā)育與氮肥密切相關(guān)，生產(chǎn)上除了基肥之外常常會追施氮肥，調(diào)節(jié)植物在生長期間的營養(yǎng)。目前關(guān)于菘藍(lán)的研究主要集中在化學(xué)成分、 藥理活性、 制劑工藝、 臨床應(yīng)用等方面，而關(guān)于氮肥施用量對菘藍(lán)的生長、 光合參數(shù)及活性成分積累的影響尚未見報道。為此，通過田間試驗(yàn)，研究追施不同氮肥施用量對菘藍(lán)植株的生長、 光合參數(shù)及藥材品質(zhì)的影響，以期提高氮肥利用率，為菘藍(lán)合理施氮提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計

試驗(yàn)所用種子為選擇的優(yōu)質(zhì)山西菘藍(lán)種子，試驗(yàn)地設(shè)在南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江浦農(nóng)場園藝站實(shí)驗(yàn)基地。供試土壤為棕壤，0—30 cm土層有機(jī)質(zhì)0.907 g/kg、 全氮0.15%、 堿解氮136 mg/kg、 有效磷19.5 mg/kg、 速效鉀0.16 mg/kg、 土壤pH 6.35，該土壤有機(jī)質(zhì)和全氮含量較低。

試驗(yàn)通過田間小區(qū)進(jìn)行，小區(qū)間距40 cm，溝深30 cm，四周設(shè)1 m寬保護(hù)行。每個小區(qū)面積為6 m2(2 m×3 m)，于2012年5月5日進(jìn)行條播，行株距25 cm×7 cm。試驗(yàn)設(shè)5個施氮水平，氮肥用量分別為225 kg/hm2、 450 kg/hm2、 675 kg/hm2、 900 kg/hm2、 1125 kg/hm2，處理正常施P、 K肥，以N225、 N450、 N675、 N900、 N1125表示，每個處理3個重復(fù)小區(qū)，分兩次追施，每次用量相同；對照不施氮肥，只施P、 K肥，對照3組，以NCK表示。隨機(jī)區(qū)組排列，進(jìn)行常規(guī)田間管理。第一次追肥在6月上旬，第二次追肥于8月下旬，在行間挖淺溝澆入，然后覆土。各處理磷、 鉀肥用量相同，按KH2PO4150 kg/hm2水平施用。氮肥品種為尿素(含N 46%)，磷鉀肥品種為磷酸二氫鉀(含K 16.4%、 P 26.7%)。(R,S)-告依春(購置于中國藥品生物制品檢定所，批號111753-201103，含量分析純，純度>98%)，甲醇為色譜純，其余試劑為分析純。

1.2 測定項目及方法

生物量測定： 12月7號(栽后215 d)采收，每個小區(qū)隨機(jī)采取15株，清洗干凈，按地上部(大青葉)、 地下部(板藍(lán)根)兩個部位分開，準(zhǔn)確稱量重量，105℃殺青15 min后60℃烘至恒重，準(zhǔn)確稱量干重，粉碎過60目篩備用。

主根長、 主根直徑、 側(cè)根數(shù)的測量： 為保證菘藍(lán)根的完整性，以單株菘藍(lán)根所在為中心，向下深挖30 cm，挖出菘藍(lán)根，將根周圍的土壤小心除去，洗凈擦干。選取小區(qū)內(nèi)長勢一致的菘藍(lán)植株20株，用直尺量取主根長；于菘藍(lán)根根上部1/4處用游標(biāo)卡尺測量主根直徑；對直徑超過(包括)5 mm的側(cè)根進(jìn)行讀數(shù)。

根中(R,S)-告依春的測定方法參照《中國藥典》(2010版)高效液相色譜法測定根中(R,S)-告依春的含量[1]。Waters 2695高效液相色譜儀色譜條件： 四元泵，在線脫氣，自動進(jìn)樣器，Waters 2998 DAD檢測器，Empower 2色譜工作站；柱溫箱柱溫40℃；以甲醇-0.02%磷酸溶液(7 ∶93)為流動相；檢測波長245 nm。

根中多糖的測定方法： 參考《植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)》(第2版)苯酚-濃硫酸法測定多糖含量[7]。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用Excel和SPSS17.0統(tǒng)計軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)間比較采用Duncan氏新復(fù)極差法。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同氮肥施用量對菘藍(lán)根生長指標(biāo)的影響

隨著施氮量的增加菘藍(lán)主根直徑逐漸增加，N225、 N450、 N675、 N900、 N1125分別比NCK增大了15.98%、 14.85%、 23.90%、 30.69%、 31.97%；各處理與對照差異顯著(P<0.05)(表1)；兩個低氮處理N225、 N450差異不顯著，在高氮處理N1125下達(dá)到最大，N900、 N1125差異不顯著(P>0.05)，根直徑增加幅度變小，可以看出N900之后繼續(xù)增加氮肥用量對菘藍(lán)植株的壯根效應(yīng)不明顯。主根長與施氮量呈正相關(guān)，N225、 N450、 N675、 N900、 N1125分別比NCK增長了4.49%、 18.52%、 23.90%、 28.95%、 25.53%，追施氮肥能顯著促進(jìn)主根根長；各處理與對照差異顯著；處理N675、 N900、 N1125差異不顯著，這與施氮量對主根直徑的影響一致。

施氮量增加菘藍(lán)根的側(cè)根數(shù)，除了處理N450，其他各處理與對照差異顯著(P<0.05)，且處理間差異顯著(P<0.05)；低氮量N225和高氮量N900、 N1125下菘藍(lán)根側(cè)根數(shù)都顯著高于對照，而中等氮用量N450、 N675菘藍(lán)根側(cè)根數(shù)增幅不明顯；說明低氮和高氮水平會顯著增加菘藍(lán)根側(cè)根數(shù)，但在一定程度上影響了藥材的外形。值得注意的是，對照的側(cè)根數(shù)最少，可能是因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)選取5 mm以上的側(cè)根，而無氮條件下植株的根傾向于變細(xì)變長；也可能是因?yàn)閷φ詹皇┑荒軡M足植株正常的生長發(fā)育需求，所以植株減少不必要的消耗以至側(cè)根數(shù)較少。綜合分析認(rèn)為菘藍(lán)植株總鮮重隨著氮肥施用量的增加而增加，各處理間差異顯著；過量施用氮肥N1125總鮮重反而降低(表1)。說明適量追施氮肥可以促進(jìn)菘藍(lán)生長，但是過量施氮不利于植株總鮮重的積累。

表1 不同施氮量對菘藍(lán)根生長指標(biāo)的影響Table 1 Effect of different nitrogen fertilizer rates on the growth of roots of Isatis indigotica Fort.

注(Note): 同列數(shù)值后不同字母表示處理間差異達(dá)到5%顯著水平 Values followed by different letters in a column mean significant differences between treatments at the 5% level.

2.2 不同氮肥施用量對菘藍(lán)干物質(zhì)的積累和根冠比的影響

隨著氮肥施用量的增加，菘藍(lán)根冠比呈降低的趨勢，在高氮處理N1125下陡然增大為0.922，但小于0.966(N675)大于0.745(N900)；不施氮處理的根冠比大于施氮處理，且各施氮處理之間差異顯著。說明施氮對對菘藍(lán)地上部分的增加效應(yīng)更明顯，對地下部的促進(jìn)作用小于對地上部的促進(jìn)作用。

注(Note): 同列數(shù)值后不同字母表示處理間差異達(dá)到5%顯著水平 Values followed by different letters in a column mean significant differences between treatments at the 5% level.

2.3 不同施氮量對菘藍(lán)光合相關(guān)參數(shù)的影響

隨著氮肥施用量的增加，菘藍(lán)葉片凈光合速率、 氣孔導(dǎo)度、 蒸騰速率、 胞間CO2濃度都表現(xiàn)出相似的變化規(guī)律，呈先增加后下降后增大的趨勢(圖1)；各處理都顯著高于對照，說明增施氮肥有利于提高菘藍(lán)凈光合速率等相關(guān)光合指標(biāo)；各處理都在N225時最小，凈光合速率(Pn)為CO27.293 μmol/(m2·s)、 氣孔導(dǎo)度(Gs)為H2O 0.054 mol/(m2·s)、 蒸騰速率(Tr)為H2O 0.723 mmol/(m2·s)、 胞間CO2濃度(Ci)為CO2153.68 μmol/(m2·s)；在處理N1125時最大，分別為CO29.667 μmol/(m2·s)、 H2O 0.083 mol/(m2·s)、 H2O 1.158 mmol/(m2·s)、 CO2178.984 μmol/(m2·s)；凈光合速率和蒸騰速率在N900處理下比處理N675低，而氣孔導(dǎo)度和胞間CO2濃度在N900處理下比處理N675高，說明施氮量對菘藍(lán)葉片非氣孔因素和氣孔因素的影響是有差異的。結(jié)合施氮量對干物質(zhì)的影響來看，最大光合參數(shù)下的施氮量和最大產(chǎn)量下的施氮量是不一致的，其原因有待進(jìn)一步研究。

2.4 不同施氮量對菘藍(lán)根中活性成分含量的影響

表3 不同施氮量下菘藍(lán)根中的多糖和(R,S)-告依春含量Table 3 The contents of polysaccharide and (R,S)-epigoitrin in Isatis indigotica roots with different N fertilizer rates

注(Note): 同列數(shù)值后不同字母表示處理間差異達(dá)到5%顯著水平 Values followed by different letters in a column mean significant differences between treatments at the 5% level.

3 討論和結(jié)論

3.1 不同施氮量對菘藍(lán)根外形品質(zhì)和菘藍(lán)光合參數(shù)的影響

由于不同施氮量對作物生長基礎(chǔ)營養(yǎng)供給不同，因而對作物整體及根系的生長發(fā)育、 地上部和地下部產(chǎn)量、 根冠比等影響也不同。有研究發(fā)現(xiàn)適量的氮素供應(yīng)能促進(jìn)作物根、 蘗、 莖、 葉等營養(yǎng)器官生長發(fā)育和協(xié)調(diào)群體發(fā)展[8-10]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： 1)施氮量與菘藍(lán)根的生長呈正相關(guān)，隨著施氮量的增加，菘藍(lán)根呈主根直徑增加、 主根長增加、 側(cè)根數(shù)增加的趨勢，說明適量的追施氮肥可以起到壯根的作用，這與于立忠[11]等對日本落葉松根的研究結(jié)果一致。2)菘藍(lán)植株的總鮮重隨著施氮量的提高而增加，但超過900 kg/hm2后就不再增加，這與臘貴曉等[12]的研究結(jié)果一致。高氮處理1125 kg/hm2植株總重反而下降，初步推測原因可能是氮肥對地上部的促進(jìn)作用更顯著，雖然地上部的旺盛生長可以通過反饋?zhàn)饔么龠M(jìn)根系對氮素的吸收，但過量的氮肥供應(yīng)造成地上部葉片奢侈增長，增氮引起的壯根速度跟不上地上部對營養(yǎng)需求的速度，根系過多的輸出又反過來影響了植株整體的生長狀況，使植株總重下降。3)低氮用量N225和高氮用量N900、 N1125下菘藍(lán)根側(cè)根數(shù)都顯著增多，原因是在低氮水平下，植物生長發(fā)育的正常氮素需求不能被滿足，為吸收更多的氮素，植物擴(kuò)大根系數(shù)量，因而低氮下側(cè)根數(shù)較多。而在高氮條件下，植物氮需求受植株地上部生物量調(diào)節(jié)，植株地上部長勢快、 生物量大，不斷產(chǎn)生新的組織，對氮的需求量大。氮需求就是植株從土壤中吸收氮用于滿足植物生長和同化合成化學(xué)成分或新組織所需求的氮量。本實(shí)驗(yàn)中追施氮肥造成植株地上部生長(包括生物量、 葉光合能力等)過快，植株整體對氮需求增大，為促進(jìn)對植株氮的吸收作出相應(yīng)的調(diào)節(jié)，增多側(cè)根數(shù)以提高根系活力，所以高氮量下側(cè)根數(shù)顯著增加。這與Robinson[13]的研究結(jié)果相一致。四，追施氮肥有利于提高菘藍(lán)植株凈光合速率、 蒸騰速率、 氣孔導(dǎo)度、 胞間 CO2濃度；如果凈光合速率和氣孔導(dǎo)度與胞間 CO2濃度的趨勢一致，說明凈光合速率下降是受氣孔因素限制，如果凈光合速率和氣孔導(dǎo)度變化與胞間 CO2濃度變化的趨勢相反，則說明凈光合速率下降是受非氣孔因素限制[14-15]。結(jié)合施氮量對生物量的影響，最大光合參數(shù)下的施氮量和最大產(chǎn)量下的施氮量是不一致的，晏楓霞等[16]研究菘藍(lán)形態(tài)對光合參數(shù)的影響，其結(jié)果表明使光合參數(shù)最大和產(chǎn)量最大的銨硝配比是不一致的，可見菘藍(lán)光合參數(shù)與產(chǎn)量關(guān)系并不呈正相關(guān)，具體的機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

3.2 不同施氮量對菘藍(lán)地上部和地下部干物質(zhì)積累和相互轉(zhuǎn)移的影響

植物根系與地上部在對營養(yǎng)物質(zhì)需求上相互依賴、 相互制約；另一方面，由于具有不同的生長環(huán)境和生理功能，因而對環(huán)境因子反應(yīng)有著不同的表現(xiàn)[17]。根系是植物吸收水分和養(yǎng)分的重要器官，根系與地上部相互作用的研究受到越來越多的重視[18-21]。植物地下部競爭往往形式多樣，過程較為復(fù)雜[22]。在養(yǎng)分充足的環(huán)境中，植株生長旺盛，根系在氮磷供應(yīng)充足的土壤中可以刺激側(cè)根的發(fā)生和養(yǎng)分的流入[19]；在土壤比較貧瘠的環(huán)境中，大部分植物傾向于使根系變細(xì)變長，增加根系與土壤的接觸面積，形成龐大的根系，占據(jù)更大的空間優(yōu)勢[24-25]，大的根系可以對供氮不足起到補(bǔ)償作用；有的則提高單位根系的吸收功能[13]。但存在種間競爭的條件下，根系增長使根長密度和氮素吸收有很高的相關(guān)性[26-27]。根系形態(tài)參數(shù)如根長密度和根表面積對主要借擴(kuò)散到達(dá)根表的那些養(yǎng)分有效性具有決定性作用。

本試驗(yàn)中，氮肥施用量與菘藍(lán)產(chǎn)量呈正相關(guān)，與菘藍(lán)植株根冠比呈負(fù)相關(guān)，說明增加氮肥用量可明顯促進(jìn)大青葉和菘藍(lán)根產(chǎn)量的積累，且施氮量對菘藍(lán)地上部產(chǎn)量比地下部產(chǎn)量的增加有更加顯著的效應(yīng)。施氮量對地上部和地下部干物質(zhì)積累的變化規(guī)律是相似的，菘藍(lán)地上部、 地下部干物質(zhì)積累隨著氮肥用量的提高而增加，但超過一定量之后就不再增加，氮肥供應(yīng)過多容易造成植物奢侈吸收，增產(chǎn)幅度與效益下降。菘藍(lán)地上部干物質(zhì)在900 kg/hm2處達(dá)到最大，地下部干物質(zhì)在675 kg/hm2達(dá)到最大，可以推斷出菘藍(lán)總重在增加的同時其干物質(zhì)的積累存在一定的轉(zhuǎn)移。施氮量到675 kg/hm2之后增施氮肥(即在900 kg/hm2時)根系將更多的養(yǎng)分向上輸送滿足地上部的生長，此時地上部干物質(zhì)積累最大，導(dǎo)致根系本身發(fā)育營養(yǎng)減少，根系干物質(zhì)積累減少，又反饋到地上部使其干物質(zhì)積累減少，所以根冠比在處理N1125時增大?？紤]到藥材菘藍(lán)根的外形品質(zhì)，使菘藍(lán)根和大青葉產(chǎn)量達(dá)到最大的追施氮肥量分別是675 kg/hm2和900 kg/hm2。

3.3 不同施氮量根中主要次生代謝產(chǎn)物與多糖的關(guān)系

植物初生代謝(primary metabolism)是指所有植物的共同的代謝途徑，合成糖類、 氨基酸類、 普通的脂肪酸類、 核酸類以及由它們形成的聚合物，用以維持植物的生存和健康。而植物次生代謝(secondary metabolism)具有不同于初生代謝的特點(diǎn)，植物次生代謝產(chǎn)物不直接參與植物生長和發(fā)育過程，但影響植物與環(huán)境的相互關(guān)系[28]。植物的初生代謝和次生代謝之間并沒有清晰的界限。初生代謝提供了許多小分子物質(zhì)作為次生代謝途徑的前體，而很多情況下次生代謝產(chǎn)物的前體同樣也用于初生代謝產(chǎn)物的合成，如蛋白質(zhì)、 脂肪酸類的生物合成。植物初生代謝和次生代謝存在一定的矛盾，大量研究表明： 有利于初生代謝的環(huán)境條件不利于次生代謝，不利于初生代謝的條件反而增強(qiáng)次生代謝。例如枸杞等藥用植物人工栽培時其產(chǎn)量取決于初生代謝產(chǎn)物的積累，而其質(zhì)量則取決于次生代謝產(chǎn)物的積累，保證其藥材質(zhì)量及有效性的基礎(chǔ)是植物的次生代謝[29-34]。

康建宏等[35]對枸杞研究認(rèn)為，隨著施氮量的增加，多糖含量不斷減少，甜菜堿和黃酮含量(枸杞中主要次生代謝產(chǎn)物)有增加的趨勢；多糖含量和甜菜堿、 黃酮呈負(fù)相關(guān)。而本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果與其結(jié)果并不完全一致，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明隨著追施氮肥用量的增加，多糖含量先增加后下降，在處理N675達(dá)到最高，為158.383 μg/g，和干物質(zhì)的積累有相似的變化規(guī)律；而菘藍(lán)根中(R,S)-告依春的含量與氮肥施用量的關(guān)系不太明顯，說明(R,S)-告依春與氮素營養(yǎng)相關(guān)性較小，可能受其他環(huán)境影響較大。因?yàn)橹参锎紊x產(chǎn)物不僅有明顯的種屬特異性，而且限制于一些特定的細(xì)胞、 組織、 器官或是特定的發(fā)育時期。非生物因子如溫度、 水分、 光照、 大氣、 鹽分、 養(yǎng)分等都會對植物的生長產(chǎn)生各種各樣的影響甚至脅迫。而次生代謝產(chǎn)物是植物適應(yīng)這種脅迫的基礎(chǔ)物質(zhì)之一。

參考文獻(xiàn):

[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典·一部[S].北京: 中國醫(yī)藥科技出版社， 2010. 20-21.

Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of People’s Republic of China. One edition [S]. Beijing: China Medical Science Press， 2010. 20- 21.

[2] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典·一部[S]． 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社， 2010. 191- 192.

Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of People's Republic of China. One edition [S]. Beijing: China Medical Science Press， 2010. 191- 192.

[3] 彭少平, 顧振綸.板藍(lán)根化學(xué)成分、 藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中國野生植物資源, 2005, 24(5): 4-7.

Peng S P, Gu Z L. Research progress on chemical constituents and pharmacological activities ofRadixisatidis[J]. Chin. Wild Plant Res., 2005, 24(5): 4-7.

[4] 閻秀峰. 植物次生代謝生態(tài)學(xué)[J]. 植物生態(tài)學(xué)報, 2001, 25: 639-640.

Xian X F. Ecology of plant secondary metabolism[J]. J. Plant Ecol., 2001, 25: 639-640.

[5] Almeida-Cortez J A, Shipley B, Arnason J T. Effects of nutrient availability on the production of pentaynene, a secondary compound related to defense, inRudbeckiahirta[J]. Plant Spec. Biol., 2003, 18: 85-96.

[6] 劉秀杰, 宮占元. 植物氮素吸收利用研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代化農(nóng)業(yè), 2012, (8): 20.

Liu X J, Gong Z Y. Plant nitrogen uptake and utilization research progress[J]. J. Agric. Modern., 2012, (8): 20-21.

[7] 王學(xué)奎. 植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)(第2版)[M]．北京: 高等教育出版社, 2006. 205-206.

Wang X K. The principle and technology of plant physiology and biochemistry experiment (Second Edition)[M]. Beijing: Higher Education Press, 2006. 205-206.

[8] Longnecker N, Kirby E J M, Robson A. Leaf emergence, tiller growth and apical development of nitrogen deficient spring wheat[J]. Crop Sci., 1993, 33: 154-160.

[9] Karrou M, Maranville J W. Response of wheat cultivars to different soil nitrogen and moisture regimes.I: Dry matter partitioning and root growth[J]. J. Plant Nutr., 1994, 17: 724-744.

[10] 張鳳翔, 周明耀, 徐華平, 郭凱泉. 水肥耦合對冬小麥生長和產(chǎn)量的影響[J]. 水利與建筑工程學(xué)報, 2005, 3(2): 22-24.

Zhang F X, Zhou M Y, Xu H P, Guo K Q . Effects of water and fertilizer coupling on growing and yield of winter wheat[J]. J. Water Res. Arch. Eng., 2005, 3(2): 22-24.

[11] 于立忠, 丁國泉, 史建偉, 等. 施肥對日本落葉松人工林細(xì)根直徑、 根長和比根長的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報, 2007, 18(5): 957-962.

Yu L Z, Ding G Q, Shi J Wetal. Effects of fertilization on fine root diameter, root length and specific root length in Larix kaempferi plantation[J]. Chin. J. Appl. Ecol., 2007, 18(5): 957-962.

[12] 臘貴曉, 方萍, 滕一波, 等.氮素水平對芥藍(lán)生長及芥子油苷含量的影響[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報, 2009, 15(2): 429-434.

La G X, Fang P, Teng Y Betal. Effect of nitrogen level on growth and glucosinolates content of Chinese kale[J]. Plant Nutr. Fert. Sci., 2009, 15(2): 429-434.

[13] Robinson D. The responses of plants to non-uniform supplies of nutrient[J]. New Phytol., 1994, 127(4): 635-674．

[14] Winter K, Schramm M J. Analysis of stomatal and non-stomatal components in the environmental control of CO2exchanges in leaves ofWelwitschiamirabilis[J]. Plant Physiol., 1986, 82: 173-178.

[15] Farquhar G D, Sharkey T D. Stomatal conductance and photosynthesis[J]. Ann. Rev. Plant Physiol., 1982, 33: 317-345.

[16] 晏楓霞, 王康才, 羅慶云, 羅春紅. 氮素形態(tài)對菘藍(lán)氮代謝、 光合作用及生長的影響[J]. 中國中藥雜志, 2009, 34(16): 2039-2042.

[17] 沈玉芳, 李世清, 邵明安. 水肥空間組合對冬小麥生物學(xué)性狀及生物量的影響[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué), 2007, 40(8): 1822-1829.

Sheng Y F, Li S Q, Shao M A. Effects of water and fertilizer spatial coupling on biological characteristics and biomass of winter wheat[J]. Sci. Agric. Sin., 2007, 40(8): 1822-1829.

[18] Dai J Y, E Y J, Gu W L. Studies on the relationship between root growth and yield in maize Ⅱ. The interaction of root system and leaves of maize and its relation with yield[J]. Acta Agron. Sin., 1988, 14(4): 310-314.

[19] 張恩和， 胡華. 小麥玉米常用根系競爭和補(bǔ)償效應(yīng)研究[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 1997, 32(4): 295- 299.

Zhang E H, Hu H. Studies on competition and compensation of the roots between spring wheat and spring corn under intercropping[J]. J. Gansu Agric. Univ., 1997, 32(4): 295- 299.

[20] Shinano T, Osaki M, Yamada S, Tadano T. Comparison of root growth and nitrogen absorbing ability between gramineae and leguminosae during the vegetative stage[J]. Soil Sci. Plant Nutr., 1994, 40(3): 485-495.

[21] Varndermeer J. The Ecology of Intercropping[M]. Cambridge: Cambridge University Press, 1989.

[22] Casper B B, Jackson R B. Plant competition underground[J]. Ann. Rev. Ecol. Syst., 1997, 28: 545-570.

[23] Schenk H J. Root competition: beyond resource depletion[J]. J. Ecol., 2006, 94(4): 725-739.

[24] Craine J M. Competition for nutrients and optimal root allocation[J]. Plant Soil, 2006, 285(1/2): 171-185．

[25] Fransen B, Blijjenberg J, De Kroon H. Root morphological and physiological plasticity of perennial grass species and the exploitation of spatial and temporal heterogeneous nutrient patches[J]. Plant Soil, 1999, 211(2): 179-189.

[26] Robinson D. Resource capture by localized root proliferation: why do plants bother[J]. Annals of Botany, 1996, 77(2): 179- 185．

[27] Robinson D, Hodge A, Griffiths B Setal. Plant root proliferation in nitrogen-rich patches confers competitive advantage[M]. Proc.Royal Soc.Series: Biol. Sci., 1999, 266(1418): 431-435.

[28] 閆秀峰, 王洋, 李一蒙.植物次生代謝及其與環(huán)境的關(guān)系[J].生態(tài)學(xué)報, 2007, 27(6): 2554-2561.

Yan X F, Wang Y, Li Y M. Plant secondary metabolism and its response to environment[J]. Acta Ecol. Sin., 2007, 27(6): 2554-2561.

[29] 張永清, 商慶新. 藥用植物次生代謝與中藥材GAP[J]. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2005, 7(2): 57-61.

Zhang Y Q, Shang Q X. Secondary metabolism of medicinal plants and GAP of Chinese medicinal crops[J]. Modern. Trad. Chin. Medic. Mater. Med., 2005, 7(2): 57-61.

[30] 杜麗娜, 張存莉, 朱瑋, 張高宏. 植物次生代謝合成途徑及生物學(xué)意義[J].西北林學(xué)院學(xué)報, 2005, 20(3): 150-155.

Du L N, Zhang C L, Zhu W, Zhang G H. The synthetic way and biological significance of plant secondary metabolism[J]. J. Northwest For. Univ., 2005, 20(3): 150-155.

[31] 高麗君, 崔建華, 劉風(fēng)云, 尹迎青.植物次生代謝物的應(yīng)用和開發(fā)[J]. 生物學(xué)通報, 2004, 39(7): 15-17.

Gao L J, Cui J H, Liu F Y, Yi Y C. Application and development of plant secondary metabolites[J]. Bull. Biol., 2004, 39(7): 15-17.

[32] 張永樂, 付桂芹. 藥用植物次生代謝工程與中草藥的生產(chǎn)[J].中國林副特產(chǎn), 2005(6): 69-70.

Zhang Y L, Fu G J. Secondary metabolic engineering of medicinal plants and herbal medicine production[J]. Quart. Forest By-prod. Spec. Chin., 2005(6): 69-70.

[33] 蘇文華, 張光飛, 李秀華, 歐曉昆. 植物藥材次生代謝產(chǎn)物的積累與環(huán)境的關(guān)系[J]. 中草藥, 2005, 36(9): 1415-1418.

Su W H, Zhang G F, Li X H, Ou X K. Relationship between accumulation of secondary metabolism in medicinal plant and environmental condition[J]. Chin. Trad. Herb. Drugs, 2005, 36(9): 1415-1418.

[34] 段傳人, 王伯初, 徐世榮.環(huán)境應(yīng)力對植物次生代謝產(chǎn)物形成的作用[J]. 重慶大學(xué)學(xué)報, 2003, 26(10): 67-71.

Duan C R, Wang B C, Xu S R. The effects of the environment stress on the plant secondary metabolites[J]. J. Chongqing Univ., 2003, 26(10): 67-71.

[35] 康建宏, 吳宏亮, 楊涓, 楊劍濤. 不同施氮水平下枸杞主要次生代謝產(chǎn)物與多糖的關(guān)系研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2008, 36(36): 16008-16010.

Kang J H, Wu H L, Yang J, Yang J T. Study on the relationship between the main secondary metabolites and polysaccharide in fruits ofLyciumbarbarumat different application amounts of nitrogen[J]. J. Anhui Agric. Sci., 2008, 36(36): 16009-16010.