柴黃雙解顆粒薄層色譜鑒別研究

于遠(yuǎn)洋　賈天柱

[摘要] 目的 建立柴黃雙解顆粒薄層色譜鑒別方法，為制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 采用薄層色譜鑒別法鑒別方中黃芩、大黃、青蒿、大青葉和草果。 結(jié)果 薄層色譜鑒別中色譜斑點(diǎn)清晰，陰性空白無(wú)干擾。 結(jié)論 所建立的鑒別方法專屬性強(qiáng)，方法可靠，可作為柴黃雙解顆粒的定性控制方法。

[關(guān)鍵詞] 柴黃雙解顆粒；黃芩；大黃；青蒿；大青葉；草果；薄層色譜

[中圖分類號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）01-120-03

柴黃雙解顆粒由大黃、黃芩、青蒿、大青葉、草果等9味中藥組成，是用于外感發(fā)熱、表里俱熱之痹證的中藥復(fù)方制劑。經(jīng)多年臨床試驗(yàn)，其療效確切值得進(jìn)一步推廣，因此我們參照有關(guān)文獻(xiàn)[1-8]用薄層色譜法對(duì)處方中大黃、黃芩、青蒿、大青葉和草果進(jìn)行鑒別研究；表明該鑒別專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，無(wú)干擾，可用于質(zhì)量控制。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器

電子分析天平（賽多利斯），三用紫外分析儀（上海光譜儀器有限公司）硅膠G板、高效硅膠G薄層板（青島海洋化工廠）。

1.2 試劑與藥品

柴黃雙解顆粒（自制），甲醇、磷酸均為色譜純（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司），水為純化水，其余試劑均為分析純，黃芩甙對(duì)照品（批號(hào)：110715-201016），靛蘭對(duì)照品（批號(hào)：0716-200005），大黃對(duì)照藥材（批號(hào)：0902-200006）、青蒿對(duì)照藥材（批號(hào)：1016-9902）、草果對(duì)照藥材（批號(hào)：121550-200501）。

2 方法與結(jié)果

2.1 大黃的鑒別

采用中國(guó)藥典2010年版一部大黃鑒別項(xiàng)下的薄層色譜法進(jìn)行鑒別，斑點(diǎn)不明顯，現(xiàn)采用普通硅膠G板，石油醚（30～60℃）-乙酸甲酯-甲酸（15∶5∶1）為展開(kāi)劑。特征斑點(diǎn)明顯。陰性無(wú)干擾。

2.1.1 供試品溶液的制備 取本品1.5g，加水10mL水充分溶解，置圓底燒瓶中，加鹽酸1mL，水浴回流30min，立即冷卻，置分液漏斗中，用乙醚分2次提取，每次15mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)勇确?mL使溶解。

2.1.2 陰性空白液的制備 取缺大黃處方藥，同工藝制備；同供試品方法處理。

2.1.3 陽(yáng)性對(duì)照液的制備 取大黃對(duì)照藥材0.1g，加甲醇20mL，浸泡1h，濾過(guò)，取濾液5mL，置圓底燒瓶中，水浴蒸干，殘?jiān)铀?0mL，加鹽酸10mL，同供試品方法處理。

2.1.4 薄層鑒別 吸附劑：硅膠G薄層板；展開(kāi)劑：石油醚（30～60℃）-乙酸甲酯-甲酸（15∶5∶1）；點(diǎn)樣量：各2μL；顯色：紫外燈（365nm）下檢視。置氨氣中熏后，日光下檢視。結(jié)果：（1）供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光主斑點(diǎn)。陰性無(wú)此斑點(diǎn)。（2）供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的5個(gè)紅色斑點(diǎn)。陰性無(wú)此斑點(diǎn)。即方法重復(fù)性良好，陰性液無(wú)干擾。見(jiàn)圖1。

1.陰性空白；2.陽(yáng)性對(duì)照；3.111101供試品；

4.111102供試品；5.111103供試品

2.2 青蒿的鑒別

采用高效硅膠G板、石油醚（60～90℃）-醋酸乙酯（6∶3.5）為展開(kāi)劑，效果理想。

2.2.1 供試品溶液的制備 取本品3g加水10mL水充分溶解，精密吸取5mL，置分液漏斗中，用氯仿萃取2次，每次15mL，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇2mL使溶解。

2.2.2 陽(yáng)性對(duì)照液的制備 取青蒿對(duì)照藥材2g，加水40mL，同流30min，濾過(guò)，取濾液5mL，同供試品方法處理。

2.2.3 陰性空白液的制備 取缺青蒿處方藥，同工藝制備，同供試品方法處理。

2.2.4 薄層鑒別 吸附劑：高效硅膠G薄層板；展開(kāi)劑：石油醚（60～90℃）-醋酸乙酯（6∶3.5）；點(diǎn)樣量：各2μL；展距：6cm；顯色：紫外燈（365nm）下檢視。結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)，陰性無(wú)此斑點(diǎn)。即方法重復(fù)性良好，陰性液無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

2.3 黃芩的鑒別

由于黃芩甙極性較大，甲醇溶液點(diǎn)樣量為5μL時(shí)拖尾嚴(yán)重，分離效果不好，現(xiàn)改為1μL，吸附劑為高效硅膠GF254薄層板。

2.3.1 供試品溶液的制備 取本品3g加水10mL水充分溶解，精密量取2mL，加甲醇4mL，搖勻，濾過(guò)。

2.3.2 陽(yáng)性對(duì)照液的制備 取黃芩甙對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液。

2.3.3 陰性空白液的制備 取缺黃芩處方藥，同工藝制備，同供試品方法處理。

2.3.4 薄層鑒別 吸附劑：高效硅膠GF254薄層板；展開(kāi)劑：醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1）；點(diǎn)樣量：各1μL；展距：6cm；顯色：10%三氯化鐵乙醇溶液。結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的藍(lán)黑色斑點(diǎn)，陰性無(wú)此斑點(diǎn)。即方法重復(fù)性良好，陰性液無(wú)干擾。見(jiàn)圖3。

2.4 大青葉的鑒別

因大青葉中的靛玉紅含量太少斑點(diǎn)不清晰，故鑒別大青葉中的靛藍(lán)。

2.4.1 供試品溶液 取本品6g加水20mL水充分溶解，精密量取15mL，加氯仿15mL萃取一分離氯仿層，水浴蒸干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇1mL使溶解。

2.4.2 陽(yáng)性對(duì)照液的制備 取靛蘭對(duì)照品加氯仿制成每1mL含0.5mg的溶液。

2.4.3 陰性空白液的制備 取缺大青葉處方藥，同工藝制備，同供試品方法處理。

2.4.4 薄層鑒別 吸附劑：高效硅膠G薄層板；展開(kāi)劑：甲苯-苯-醋酸乙酯-氯仿（2∶2∶1∶4）；點(diǎn)樣量：各5μL；展距：4cm；結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的藍(lán)色斑點(diǎn)，陰性無(wú)此斑點(diǎn)。即方法重復(fù)性良好，陰性液無(wú)干擾。見(jiàn)圖4。

2.5 草果的鑒別

2.5.1 供試品溶液的制備 取本品6g加水20mL水充分溶解，精密量取10mL，用石油醚（30～60℃）萃取兩次，每次15mL，合并石油醚，水浴上濃縮至1mL。

2.5.2 陽(yáng)性對(duì)照液的制備 另取草果對(duì)照藥材2g，加水30mL，回流30min，濾過(guò)，濾液用石油醚（30～60℃）萃取2次，每次30mL，合并石油醚液，水浴上濃縮至1mL。

2.5.3 陰性空白液的制備 取缺草果處方藥，同王藝制備，同供試品方法處理。

2.5.4 薄層鑒別 吸附劑：硅膠G薄層板；展開(kāi)劑：甲苯-醋酸乙酯（9∶4）；點(diǎn)樣量：各1μL；展距：7cm；顯色：噴以10%的磷鋁酸乙醇液，在105℃烘約5min。結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的暗紫色斑點(diǎn)，陰性無(wú)此斑點(diǎn)。即方法重復(fù)性良好，陰性液無(wú)干擾。見(jiàn)圖5。

2.6 柴胡、金銀花、蒲公英、重樓鑒別

經(jīng)實(shí)驗(yàn)，相互間有干擾，鑒別方法有待進(jìn)一步研究。

3 討論

鑒于方中藥味較多，為了達(dá)到使標(biāo)準(zhǔn)更加穩(wěn)定可靠的目的，本實(shí)驗(yàn)選取了黃芩，大黃，青蒿、大青葉

和草果5味藥材進(jìn)行鑒別來(lái)控制本方的質(zhì)量，能夠多方面綜合反映藥品的內(nèi)在質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)在黃芩，青蒿、大青葉和草果的定性鑒別中，采用《中國(guó)華人民共和藥典》2010版定性鑒別，供試品中大黃的鑒別采用普通硅膠G板，使用石油醚（30～60℃）-乙酸甲酯-甲酸（15∶5∶1）為展開(kāi)劑，特征斑點(diǎn)明顯，陰性無(wú)干擾。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)證明以上辨別方法靈敏，簡(jiǎn)便易行，重現(xiàn)性好，可作為其質(zhì)量控制方法。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部） [S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：20，22，184，205，222，243，263，282，331.

[2] 徐先祥，夏倫祝.薄層掃描法測(cè)定肝豆靈片中大黃素的含量[J].安徽醫(yī)藥，2005，10（1）：37-38.

[3] 湯新蘭.牛黃解毒片中大黃鑒別方法的探討[J].海峽藥學(xué)，2008，20（3）：86-87.

[4] 楊曉娟.健胃丸中白芍、黃芪、苦參的薄層色譜鑒別[J].遼寧中醫(yī)雜志，12005，32（6）：588.

[5] 蔡清宇，王敏，郝特.柴桂解表顆粒的薄層色譜鑒別[J].海軍總醫(yī)院學(xué)報(bào)，2008，21（2）：50-51.

[6] 張貴君.常用中藥鑒定大全[M].哈爾濱：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1997：466-467.

[7] 李光喜.青梅感冒沖劑中的五指柑和青蒿的薄層色譜鑒別[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，2（20）：104-105.

[8] 梁威，劉元，文志云，等.TLC法定性鑒別清火片中3味中藥[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2009，15（1）：10-11.

（收稿日期：2013-10-22）

2.5 草果的鑒別

2.5.1 供試品溶液的制備 取本品6g加水20mL水充分溶解，精密量取10mL，用石油醚（30～60℃）萃取兩次，每次15mL，合并石油醚，水浴上濃縮至1mL。

2.5.2 陽(yáng)性對(duì)照液的制備 另取草果對(duì)照藥材2g，加水30mL，回流30min，濾過(guò)，濾液用石油醚（30～60℃）萃取2次，每次30mL，合并石油醚液，水浴上濃縮至1mL。

2.5.3 陰性空白液的制備 取缺草果處方藥，同王藝制備，同供試品方法處理。

2.5.4 薄層鑒別 吸附劑：硅膠G薄層板；展開(kāi)劑：甲苯-醋酸乙酯（9∶4）；點(diǎn)樣量：各1μL；展距：7cm；顯色：噴以10%的磷鋁酸乙醇液，在105℃烘約5min。結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的暗紫色斑點(diǎn)，陰性無(wú)此斑點(diǎn)。即方法重復(fù)性良好，陰性液無(wú)干擾。見(jiàn)圖5。

2.6 柴胡、金銀花、蒲公英、重樓鑒別

經(jīng)實(shí)驗(yàn)，相互間有干擾，鑒別方法有待進(jìn)一步研究。

3 討論

鑒于方中藥味較多，為了達(dá)到使標(biāo)準(zhǔn)更加穩(wěn)定可靠的目的，本實(shí)驗(yàn)選取了黃芩，大黃，青蒿、大青葉

和草果5味藥材進(jìn)行鑒別來(lái)控制本方的質(zhì)量，能夠多方面綜合反映藥品的內(nèi)在質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)在黃芩，青蒿、大青葉和草果的定性鑒別中，采用《中國(guó)華人民共和藥典》2010版定性鑒別，供試品中大黃的鑒別采用普通硅膠G板，使用石油醚（30～60℃）-乙酸甲酯-甲酸（15∶5∶1）為展開(kāi)劑，特征斑點(diǎn)明顯，陰性無(wú)干擾。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)證明以上辨別方法靈敏，簡(jiǎn)便易行，重現(xiàn)性好，可作為其質(zhì)量控制方法。

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[4] 楊曉娟.健胃丸中白芍、黃芪、苦參的薄層色譜鑒別[J].遼寧中醫(yī)雜志，12005，32（6）：588.

[5] 蔡清宇，王敏，郝特.柴桂解表顆粒的薄層色譜鑒別[J].海軍總醫(yī)院學(xué)報(bào)，2008，21（2）：50-51.

[6] 張貴君.常用中藥鑒定大全[M].哈爾濱：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1997：466-467.

[7] 李光喜.青梅感冒沖劑中的五指柑和青蒿的薄層色譜鑒別[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，2（20）：104-105.

[8] 梁威，劉元，文志云，等.TLC法定性鑒別清火片中3味中藥[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2009，15（1）：10-11.

（收稿日期：2013-10-22）

2.5 草果的鑒別

2.5.1 供試品溶液的制備 取本品6g加水20mL水充分溶解，精密量取10mL，用石油醚（30～60℃）萃取兩次，每次15mL，合并石油醚，水浴上濃縮至1mL。

2.5.2 陽(yáng)性對(duì)照液的制備 另取草果對(duì)照藥材2g，加水30mL，回流30min，濾過(guò)，濾液用石油醚（30～60℃）萃取2次，每次30mL，合并石油醚液，水浴上濃縮至1mL。

2.5.3 陰性空白液的制備 取缺草果處方藥，同王藝制備，同供試品方法處理。

2.5.4 薄層鑒別 吸附劑：硅膠G薄層板；展開(kāi)劑：甲苯-醋酸乙酯（9∶4）；點(diǎn)樣量：各1μL；展距：7cm；顯色：噴以10%的磷鋁酸乙醇液，在105℃烘約5min。結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的暗紫色斑點(diǎn)，陰性無(wú)此斑點(diǎn)。即方法重復(fù)性良好，陰性液無(wú)干擾。見(jiàn)圖5。

2.6 柴胡、金銀花、蒲公英、重樓鑒別

經(jīng)實(shí)驗(yàn)，相互間有干擾，鑒別方法有待進(jìn)一步研究。

3 討論

鑒于方中藥味較多，為了達(dá)到使標(biāo)準(zhǔn)更加穩(wěn)定可靠的目的，本實(shí)驗(yàn)選取了黃芩，大黃，青蒿、大青葉

和草果5味藥材進(jìn)行鑒別來(lái)控制本方的質(zhì)量，能夠多方面綜合反映藥品的內(nèi)在質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)在黃芩，青蒿、大青葉和草果的定性鑒別中，采用《中國(guó)華人民共和藥典》2010版定性鑒別，供試品中大黃的鑒別采用普通硅膠G板，使用石油醚（30～60℃）-乙酸甲酯-甲酸（15∶5∶1）為展開(kāi)劑，特征斑點(diǎn)明顯，陰性無(wú)干擾。經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)證明以上辨別方法靈敏，簡(jiǎn)便易行，重現(xiàn)性好，可作為其質(zhì)量控制方法。

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[2] 徐先祥，夏倫祝.薄層掃描法測(cè)定肝豆靈片中大黃素的含量[J].安徽醫(yī)藥，2005，10（1）：37-38.

[3] 湯新蘭.牛黃解毒片中大黃鑒別方法的探討[J].海峽藥學(xué)，2008，20（3）：86-87.

[4] 楊曉娟.健胃丸中白芍、黃芪、苦參的薄層色譜鑒別[J].遼寧中醫(yī)雜志，12005，32（6）：588.

[5] 蔡清宇，王敏，郝特.柴桂解表顆粒的薄層色譜鑒別[J].海軍總醫(yī)院學(xué)報(bào)，2008，21（2）：50-51.

[6] 張貴君.常用中藥鑒定大全[M].哈爾濱：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1997：466-467.

[7] 李光喜.青梅感冒沖劑中的五指柑和青蒿的薄層色譜鑒別[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，2（20）：104-105.

[8] 梁威，劉元，文志云，等.TLC法定性鑒別清火片中3味中藥[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2009，15（1）：10-11.

（收稿日期：2013-10-22）