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    抗性糊精滾子加熱制備工藝的研究

    2014-03-27 08:10:44黃繼紅楊銘乾游倩倩蘇雪鋒馮軍偉
    關(guān)鍵詞:加酸對抗性糊精

    黃繼紅,楊銘乾,游倩倩,蘇雪鋒,馮軍偉,王 文

    (1.河南工業(yè)大學(xué) 生物工程學(xué)院,河南 鄭州 450001;2.鄭州市中食農(nóng)產(chǎn)品加工研究院,河南 鄭州 450001)

    0 前言

    淀粉作為一種重要的原料,被人們廣泛用于工業(yè)生產(chǎn)和食品加工,隨著科學(xué)研究的深入,各種各樣淀粉深加工產(chǎn)物得到了人們的廣泛接受和應(yīng)用.抗性糊精,一種膳食纖維[1],淀粉深加工產(chǎn)物的重要成員,深受人們喜歡.膳食纖維被稱為人體健康所必需的第七大營養(yǎng)元素[2],不僅可以用作食品添加劑,同時(shí),也作為一種保健食品,用于治療高血糖,調(diào)節(jié)血脂,腸道益生,防御肥胖,有益于維持人們的身體健康[3-6].

    抗性糊精的發(fā)展起源于20 世紀(jì)80 年代的日本[7],我國在1995 年之后也開始對其研究.2012年,我國衛(wèi)生部公布抗性糊精為新資源食品.到目前為止,抗性糊精的制備方法各種各樣,如寇秀穎等[8]采用化學(xué)改性和高溫焙烤的方法進(jìn)行抗性糊精的制備,吳勝旭等[9]采用微波法進(jìn)行制備等,但抗性糊精含量較低或反應(yīng)不均勻等問題的存在,制約了其發(fā)展.作者采用滾子加熱,即在密閉的滾子中將酸處理過的淀粉進(jìn)行高溫?zé)峤?,密閉高溫產(chǎn)生高壓環(huán)境[10],克服了傳統(tǒng)工藝的反應(yīng)不均的問題,同時(shí)也有效地提高了產(chǎn)物中抗性糊精的含量.

    1 材料與方法

    1.1 材料

    玉米淀粉(含水14.29%):成武大地玉米開發(fā)有限公司;濃HCl、Na2HPO4·12H2O、KH2PO4、四水酒石酸鉀鈉、NaOH、Na2SO3、95%的乙醇、苯酚、3,5-二硝基水楊酸均為化學(xué)純;耐高溫α-淀粉酶(6 000 u/mL):財(cái)鑫集團(tuán);糖化酶(3 300 u/mL):北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司;活性炭:重慶飛洋活性炭制造有限公司.

    1.2 試驗(yàn)設(shè)備

    SHA-C數(shù)顯水浴恒溫振蕩器:金壇華峰儀器有限公司;723N可見分光光度計(jì):上海精密科學(xué)儀器有限公司;雷磁pH計(jì)PHS-3E:上海精密科學(xué)儀器有限公司;湘儀離心機(jī)TDZ5-WS多管架自動平衡離心機(jī):河南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司;SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵:鄭州國瑞儀器有限公司;FA12048電子天平:上海精密科學(xué)儀器有限公司;GZX-GF-MBS-I型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥機(jī):上海一恒科學(xué)儀器有限公司;CRL-BX3型便攜式滾子加熱爐:青島百瑞達(dá)石油機(jī)械制造有限公司.

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 工藝流程

    玉米淀粉→預(yù)干燥→噴酸→再干燥→高溫?zé)峤狻榛透邷卅?淀粉酶液化→糖化酶糖化→滅酶→脫色→離心→抽濾→醇沉→離心→干燥→成品.

    通過預(yù)試驗(yàn),表明以酸熱處理的方法制備抗性糊精過程中,鹽酸的添加量、滾子加熱溫度、滾子加熱時(shí)間及耐高溫α-淀粉酶的添加量是影響抗性糊精含量的主要因素,并設(shè)計(jì)單因素及響應(yīng)面試驗(yàn)以確定抗性糊精制備的最佳條件.

    1.3.2 抗性糊精含量的檢測[4]

    精確稱量經(jīng)過干燥的樣品0.25 g,加入0.05 mol/L、pH 6.0 的磷酸緩沖液50 mL 溶解,加入1 mL 耐高溫α-淀粉酶(60 u/mL),在95 ℃下酶解30 min;然后冷卻至室溫,調(diào)pH 為4.5,加糖化酶(100 u/mL)1 mL,在60 ℃下反應(yīng)30 min,升溫至90 ℃滅酶并定容至250 mL,最后用DNS 試劑測還原糖的含量,樣品中抗性糊精的含量的計(jì)算公式為:

    抗性糊精含量(%)=100-還原糖的含量(%)×0.9.

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素試驗(yàn)

    2.1.1 加酸量對抗性糊精含量的影響

    準(zhǔn)確稱取一定量的玉米淀粉樣品,預(yù)干燥后,分別按2%、4%、6%、8%、10%的量噴灑濃度為1%的鹽酸,并與淀粉混合均勻;再次干燥之后,用滾子加熱爐將處理的樣品在170 ℃下密閉高溫滾子加熱1.5 h;然后經(jīng)調(diào)乳,調(diào)pH 6.0,分別加入0.04%耐高溫α-淀粉酶,95 ℃高溫酶解0.5 h;再調(diào)pH 4.5,60 ℃二次酶解0.5 h;再經(jīng)滅酶、脫色、離心、抽濾、醇沉、干燥即得產(chǎn)品,產(chǎn)品按1.3.2 中所示方法進(jìn)行檢測,結(jié)果見圖1.

    圖1 加酸量對抗性糊精含量的影響

    圖1 表明,隨著鹽酸量的增加,抗性糊精的含量也在增加;但是,加酸量的提高,也使得抗性糊精的顏色不斷加深,并且,其口感風(fēng)味也越來越差,使得后期的處理更加復(fù)雜,因此綜合考慮各種影響,確定鹽酸的最佳添加量為8%.

    2.1.2 滾子加熱溫度對抗性糊精含量的影響

    依據(jù)工藝流程,依次控制加酸量為8%,滾子加熱時(shí)間為1.5 h,耐高溫α-淀粉酶添加量為0.04%,分別控制滾子加熱溫度依次為150 ℃、160℃、170 ℃、180 ℃、190 ℃,其他操作與2.1.1 相同,檢測并得到相應(yīng)結(jié)果如圖2 所示.

    圖2 滾子加熱溫度對抗性糊精含量的影響

    由圖2 可知,隨著溫度的升高,抗性糊精的含量逐漸升高,且在180 ℃之后,抗性糊精含量增長加劇,當(dāng)溫度超過200 ℃時(shí),密閉條件下,淀粉可能出現(xiàn)焦化熔融的現(xiàn)象,考慮到抗性糊精的品質(zhì)問題,確定最適熱處理溫度為170 ℃.

    2.1.3 滾子加熱時(shí)間對抗性糊精含量的影響

    依據(jù)工藝流程,控制加酸量為8%,滾子加熱溫度為170 ℃,加酶量為0.04%,按滾子加熱時(shí)間分別為0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h、2.5 h 進(jìn)行抗性糊精的制備,其他操作同2.1.1,檢測結(jié)果如圖3 所示.

    圖3 滾子加熱時(shí)間對抗性糊精含量的影響

    由圖3 可以看出,1.5 h 之前,隨著滾子加熱時(shí)間的加長,抗性糊精的含量快速增加;當(dāng)1.5 h之后,抗性糊精的含量變化逐漸趨于平緩,由此可知,在酸熱環(huán)境下,淀粉的裂解重聚反應(yīng)基本完成,且考慮到能耗問題,確定滾子加熱時(shí)間最佳為1.5 h .

    2.1.4 耐高溫α-淀粉酶的添加量對抗性糊精含量的影響

    同樣,依據(jù)工藝流程,調(diào)節(jié)加酸量為8%,滾子加熱溫度為170 ℃,滾子加熱時(shí)間為1.5 h,并分別按0.02%、0.04%、0.06%、0.08%、0.10%的量加入耐高溫α-淀粉酶,按2.1.1 所述操作,檢測結(jié)果如圖4 所示.

    由圖4 可知,當(dāng)耐高溫α-淀粉酶的添加量小于0.04%時(shí),抗性糊精的含量隨著酶添加量的增加而增加,而酶添加量高于0.04%時(shí),抗性糊精的含量變化漸漸趨于平緩,而為了使酶解更為完全,確定最佳酶添加量為0.04%.

    圖4 加酶量對抗性糊精含量的影響

    2.2 響應(yīng)面試驗(yàn)

    根據(jù)單因素試驗(yàn)選擇試驗(yàn)條件進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn),利用 Design-Expert 8.0.6 軟件進(jìn)行 Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì),各因素與水平見表1,每個(gè)因素3 個(gè)水平,中心點(diǎn)有5 個(gè)重復(fù).

    表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平

    Box-Behnken 試驗(yàn)結(jié)果見表2.

    以抗性糊精的含量為響應(yīng)面指標(biāo),利用Design-Expert 8.0.6 軟件對表2 中的數(shù)據(jù)進(jìn)行二次多元回歸擬合,得到加酸量(X1)、溫度(X2)、時(shí)間(X3)和加酶量(X4)對抗性糊精的含量(R1)影響的預(yù)測方程如下:

    響應(yīng)值二次模型的方差分析及顯著性如表3所示.

    由表3 可以看出,模型P<0.000 1,模型極顯著.失擬項(xiàng)P=0.075 5>0.05 不顯著,因此二次模型成立,應(yīng)用此模型可以分析和預(yù)測利用滾子熱裂解制備抗性糊精的工藝優(yōu)化.其中一次項(xiàng)X1、X2、X3、X4極顯著,二次項(xiàng)X42極顯著,X32顯著,交互項(xiàng)都不顯著.所以,可以看出加酸量、溫度、時(shí)間及加酶量對抗性糊精含量的影響都極為顯著,而各因素之間的交互作用對抗性糊精含量的影響并不明顯.

    表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

    表3 響應(yīng)值二次模型的方差分析

    圖5 清晰地反映各兩兩因素交互作用對響應(yīng)值抗性糊精含量的影響,根據(jù)長軸邊指向的因素對響應(yīng)值的影響大于短軸邊指向的因素,可以看出各因素對響應(yīng)值影響的大小順序?yàn)閄2>X1>X4>X3,即溫度>加酸量>加酶量>時(shí)間.

    利用Design-Expert 8.0.6 軟件,對抗性糊精含量的二次多項(xiàng)式模型進(jìn)行解逆矩陣[11],求得4 個(gè)因素的最佳工藝參數(shù)為加酸量8%、加熱溫度178.78℃、加熱時(shí)間2 h、加酶量0.05%,在此條件下抗性糊精含量的最大預(yù)測值為84.63%,該組合并不符合響應(yīng)面方案中的任一組合.但從試驗(yàn)操作的方便和效益考慮,對工藝參數(shù)修正為加酸量8%、加熱溫度180 ℃、加熱時(shí)間1.5 h、加酶量0.04%,在此條件下抗性糊精的含量為83.97%,實(shí)際值與預(yù)測值基本相符,表明模型建立合理,預(yù)測結(jié)果較為準(zhǔn)確,此最優(yōu)工藝條件具有可行性.

    圖5 各因素交互作用影響的響應(yīng)曲面和等高線

    3 結(jié)論

    通過單因素優(yōu)化試驗(yàn)可知,鹽酸的添加量和滾子加熱處理溫度是影響抗性糊精含量的重要因素,而滾子加熱時(shí)間和酶添加量僅在較小的范圍內(nèi)對抗性糊精的含量有影響,當(dāng)超出一定范圍,該影響將會減小,直至趨近于零.因此,在不影響抗性糊精質(zhì)量和能耗最少的條件下,應(yīng)盡可能地提高鹽酸的添加量和滾子加熱處理溫度.通過響應(yīng)面及實(shí)際試驗(yàn)驗(yàn)證,最終確定制備抗性糊精的最佳工藝條件為加酸量為8%,滾子加熱溫度為180 ℃,加熱時(shí)間為1.5 h,酶添加量為0.04%,得到抗性糊精的含量為83.97%.

    盡管此工藝條件相比于傳統(tǒng)的制備工藝很大程度地提高了抗性糊精的含量,滾子加熱處理淀粉原料在抗性糊精的制備中有很好的應(yīng)用前景,但樣品的進(jìn)一步提純,如脫色除雜等處理還需進(jìn)一步研究.

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