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    荷芩止癢搽劑豚鼠皮膚過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)研究*

    2014-03-27 07:05:56趙景云馬克堅(jiān)王振宇宋京風(fēng)陸宇惠郭世民
    云南中醫(yī)中藥雜志 2014年2期
    關(guān)鍵詞:皮膚過(guò)敏豚鼠紅斑

    趙景云, 馬克堅(jiān)△, 王振宇, 宋京風(fēng), 陸宇惠, 郭世民

    (1.云南省中醫(yī)中藥研究院, 云南 昆明 650223; 2.昆明醫(yī)科大學(xué), 云南 呈貢 650504)

    國(guó)內(nèi)報(bào)導(dǎo),艾滋病感染者及病人(以下簡(jiǎn)稱HIV/AIDS患者)中皮膚瘙癢發(fā)生率最高為71.43%[1],是較為常見(jiàn)的臨床癥狀,且最易于反復(fù)發(fā)作,直接影響到患者治療的依從性和生活質(zhì)量。

    為此,云南省中醫(yī)中藥研究院經(jīng)過(guò)對(duì)HIV/AIDS患者皮膚瘙癢發(fā)病情況的廣泛調(diào)研,在觀察患者皮膚發(fā)病情況和病情發(fā)展過(guò)程的基礎(chǔ)上,以中醫(yī)辨證施治的原則,結(jié)合各單味藥的功效以及相關(guān)現(xiàn)代研究,研發(fā)了荷芩止癢搽劑。

    該搽劑主要由紅根、陽(yáng)荷等經(jīng)乙醇提取制成。具有解毒、消腫、除濕和止癢作用。為使其安全進(jìn)入臨床觀察,進(jìn)行醫(yī)院制劑的申報(bào),同時(shí)也為臨床使用提供可靠的科學(xué)依據(jù),筆者對(duì)該搽劑進(jìn)行了安全性評(píng)價(jià)。

    本文報(bào)導(dǎo)的是荷芩止癢搽劑豚鼠皮膚過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)研究。

    1 材料

    1.1 試藥和對(duì)照品 荷芩止癢搽劑(原生藥1.0 g/mL和原生藥6.0 g/mL兩個(gè)濃度),批號(hào):120701;50%藥用乙醇,批號(hào):120701,由云南省中醫(yī)中藥研究院制劑室提供;氯化鈉注射液,250ml:2.25 g;批號(hào)1112231,昆明南疆制藥有限公司;2,4—二硝基氯苯,批號(hào)20030701,中國(guó)上海試劑一廠。

    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 普通級(jí)豚鼠,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(滇)2011-0004;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào):SYXK(滇)2005-0004。

    2 方法

    2.1 動(dòng)物分組 40只合格動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,隨機(jī)將動(dòng)物分為4組,每組10只,雌雄各半。

    2.2 劑量設(shè)計(jì)依據(jù) 根據(jù)《中藥、天然藥物刺激性、過(guò)敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》[2],皮膚過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)(Buehler實(shí)驗(yàn),BT)采用臨床劑量為受試物組(1.0 g/mL和原生藥6.0 g/mL),并設(shè)陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組進(jìn)行試驗(yàn)。見(jiàn)表1。

    表1 動(dòng)物分組與給藥濃度對(duì)照表

    2.3 致敏與激發(fā)

    2.3.1 致敏 4組動(dòng)物分別于實(shí)驗(yàn)第1、7、14天用封閉藥片貼敷6 h以誘導(dǎo)。

    2.3.2 激發(fā) 4組動(dòng)物于實(shí)驗(yàn)第28天,在動(dòng)物肋腹部貼敷藥片6 h以局部激發(fā)。

    2.4 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)

    2.4.1 一般觀察 觀察動(dòng)物一般癥狀,每周稱動(dòng)物體重1次。

    2.4.2 觀察指標(biāo) 在每次致敏后1 h和24 h及激發(fā)后24 h和48 h觀察皮膚紅斑、水腫和其他異常反應(yīng),并按表2對(duì)紅斑和水腫進(jìn)行評(píng)分。

    表2 皮膚過(guò)敏反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

    2.4.3 結(jié)果評(píng)價(jià) 根據(jù)動(dòng)物過(guò)敏反應(yīng)情況,計(jì)算過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率。根據(jù)表3判斷過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生程度。

    表3 皮膚過(guò)敏反應(yīng)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

    *當(dāng)過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率為0時(shí),可判為未見(jiàn)皮膚過(guò)敏反應(yīng)。

    2.4.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSSwin11.5軟件對(duì)各組間體重進(jìn)行單因素方差分析。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    3.1 體重變化 試驗(yàn)期間陰性對(duì)照、受試物低、高劑量組動(dòng)物進(jìn)食、行為活動(dòng)及精神狀態(tài)等一般情況良好。陽(yáng)性對(duì)照組在致敏期體重增長(zhǎng)幅度不明顯,試驗(yàn)第21天陽(yáng)性對(duì)照組與受試物低劑量組比較有顯著性差異(P<0.05),(見(jiàn)表4)。

    表4 荷芩止癢搽劑豚鼠皮膚過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)體重變化

    注:與受試物低劑量組比較有顯著性差異,*P<0.05

    3.2 給藥局部肉眼觀察結(jié)果 致敏期觀察豚鼠皮膚,可見(jiàn)陽(yáng)性對(duì)照組于清洗藥物后1 h絕大部分動(dòng)物均出現(xiàn)輕~中度的紅斑,個(gè)別動(dòng)物出現(xiàn)輕微水腫,且24 h后紅斑和水腫仍存在;受試物低、高劑量組于清洗藥物后1h部分動(dòng)物出現(xiàn)輕微紅斑,無(wú)水腫,24 h后紅斑消失。激發(fā)給藥后陽(yáng)性對(duì)照組于清洗藥物后1 h、24 h、48 h觀察所有動(dòng)物均出現(xiàn)輕~重度的紅斑以及輕~中度水腫,48 h后仍存在;受試物低、高劑量組于清洗藥物后1 h部分動(dòng)物出現(xiàn)輕微紅斑,無(wú)水腫,24 h及48 h觀察均未見(jiàn)紅斑和水腫。(見(jiàn)表5、6)。

    表5 致敏階段豚鼠皮膚過(guò)敏反應(yīng)平均分值(分)

    表6 激發(fā)階段豚鼠皮膚過(guò)敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    4 討論

    豚鼠皮膚過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明:本試驗(yàn)中陽(yáng)性對(duì)照2,4-二硝基氯苯在致敏期于清洗給藥后1h既可見(jiàn)較為明顯的紅斑,少部分動(dòng)物還可見(jiàn)輕微水腫,24h后仍存在;激發(fā)給藥后全部動(dòng)物均出現(xiàn)紅斑和水腫,且于24h時(shí)觀察比1h時(shí)更為明顯,再次證實(shí)2,4-二硝基氯苯具有極強(qiáng)致敏性。而荷芩止癢搽劑為中藥復(fù)方制劑,具有一定黏性,當(dāng)在致敏和激發(fā)給藥封片6h后易緊緊黏附在豚鼠剃毛的皮膚上,需采用紗布溫水反復(fù)清洗,因而使得在清洗給藥后1h觀察受試物低、高劑量組豚鼠皮膚可見(jiàn)輕微的紅斑,但24h觀察未見(jiàn)異常,故認(rèn)為與藥物本身的過(guò)敏性和刺激性無(wú)關(guān)。不引起豚鼠皮膚過(guò)敏反應(yīng)。豚鼠皮膚過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)表明,不引起豚鼠皮膚過(guò)敏反應(yīng)。

    以上實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,荷芩止癢搽劑是安全、有效的。作為院內(nèi)制劑申報(bào)、為臨床合理推廣使用提供了相關(guān)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和參考信息。

    參考文獻(xiàn):

    [1]張毅,杜艾嬡.239例HIV感染者并發(fā)皮膚損害分析[J].實(shí)用皮膚病學(xué)雜志,2010,3(3):134,136,140.

    [2]中藥、天然藥物刺激性、過(guò)敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則.[Z]GPT4-1.2005.03.

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