AFP聯(lián)合AFP-L3、GPDA和CA125在原發(fā)性肝癌診斷中的可能價(jià)值

鄭 飛，王春暉，周文平

(中國人民解放軍沈陽軍區(qū)總醫(yī)院肝膽外科，沈陽 110840)

原發(fā)性肝癌發(fā)病隱匿，早期診斷十分困難[1]。大多患者確診時(shí)已處于中晚期，因而容易錯(cuò)失治療良機(jī)[2]。盡早發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌具有主要的臨床意義。血清腫瘤標(biāo)志物檢測以其簡捷、廉價(jià)的優(yōu)勢成為原發(fā)性肝癌早期診斷的常用手段。甲胎蛋白(α-fetoprotein，AFP)是公認(rèn)的原發(fā)性肝癌腫瘤標(biāo)志物，但有30%～40%的漏診率[3-5]。近年的研究顯示，單個(gè)腫瘤標(biāo)志物檢測原發(fā)性肝癌的靈敏度和特異度均不高，多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測能提升檢測靈敏度和特異度[6-10]。AFP聯(lián)合甲胎蛋白異質(zhì)體(human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3)、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(glycylproline dipeplidyl aminopeplidase，GPDA)和糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)在診斷原發(fā)性肝癌方面的研究卻十分有限。本研究以原發(fā)性肝癌患者、乙型肝炎患者以及正常體檢者為研究對象，測定了AFP、AFP-L3、GPDA和CA125的血清水平，并評價(jià)了單個(gè)及多項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測對診斷原發(fā)性肝癌的可能價(jià)值。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取中國人民解放軍沈陽軍區(qū)總醫(yī)院2010～2012年度收治的患者和體檢人群，受試對象在充分了解本研究后簽署了知情同意書。原發(fā)性肝癌組65例，男35例、女30例，年齡31～78(54.3±13.9)，原發(fā)性肝癌的診斷依據(jù)中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會修訂的《原發(fā)性肝癌的診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)》(2001版)[11]；乙型肝炎組57例，男29例、女28例，年齡38～77(56.8±11.0)，乙型肝炎的診斷依照中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲學(xué)分會、肝病學(xué)分會聯(lián)合修訂的《病毒性肝炎防治法案》(2000版本)[12]；正常組共60例，男27例、女33例，年齡41～65(54.9±6.8)，均為本院體檢中心體檢合格者，確認(rèn)無心、肺、肝、腎等器官病變，無消化系統(tǒng)和血液系統(tǒng)病史。采用肝穿刺活檢、病理切片、B型超聲、CT、MRI、血管造影等檢查手段對所有病例進(jìn)行確診。3組間在性別、年齡方面的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2血樣收集 清晨空腹條件下抽取受試者靜脈血2 mL，并立刻離心分離出血清，吸取血清適當(dāng)分裝并儲藏于-20 ℃冰箱備用。

1.3儀器試劑和方法 采用親和吸附法測定AFP-L3，所用AFP-L3親和吸附離心管及Abbott I2000全自動免疫分析儀配套試劑均為北京熱景生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。經(jīng)過吸附離心后的AFP-L3洗脫液與原血清樣本一同在Abbott I2000全自動免疫分析儀中測定AFP-L3和AFP的含量，計(jì)算AFP-L3占總AFP的比例(%)，比例AFP-L3>10%判定為陽性，AFP>20 μg/L判定為陽性。采用速率法測定GPDA水平，GPDA測定試劑盒購自浙江夸克生物有限公司，并在Beckman全自動生化分析儀LX20上進(jìn)行，GPDA>120 U/L判定為陽性。CA125采用電化學(xué)發(fā)光法測定，所用試劑為Abbott Axysym化學(xué)發(fā)光儀配套試劑，在Abbott Axysym化學(xué)發(fā)光儀上進(jìn)行，CA125>35 kU/L判定為陽性。

2 結(jié) 果

2.1AFP、AFP-L3、GPDA和CA125血清水平的比較 原發(fā)性肝癌組AFP、AFP-L3、GPDA和CA125四種腫瘤標(biāo)志物的血清水平比乙型肝炎組和正常對照組的對應(yīng)物都高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。乙型肝炎組AFP、AFP-L3、GPDA和CA125腫瘤標(biāo)志物的血清水平比正常組高(均P<0.05)。乙型肝炎組AFP、AFP-L3、GPDA和CA125腫瘤標(biāo)志物的血清平均水平均超過正常參考值(表1)。

表1 三組AFP、AFP-L3、GPDA和CA125血清水平比較

AFP：甲胎蛋白；AFP-L3：甲胎蛋白異質(zhì)體；GPDA：甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶；CA125：糖類抗原125

2.2AFP、AFP-L3、GPDA和CA125單項(xiàng)檢測與多項(xiàng)聯(lián)合檢測陽性率的比較 AFP聯(lián)合AFP-L3、GPDA和CA125的檢測陽性率均比每一單項(xiàng)檢測陽性率有所提高(P<0.05)；四項(xiàng)聯(lián)合檢測靈敏性提高到92.3%(P<0.05)。乙型肝炎組有不少病例也為AFP、AFP-L3、GPDA和CA125陽性；正常對照組未檢測到AFP、AFP-L3、GPDA和CA125陽性的病例(表2)。

表2 AFP、AFP-L3、GPDA和CA125單項(xiàng)檢測與多項(xiàng)聯(lián)合檢測陽性率的比較 [例(%)]

AFP：甲胎蛋白；AFP-L3：甲胎蛋白異質(zhì)體；GPDA：甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶；CA125：糖類抗原125

3 討 論

原發(fā)性肝癌在我國發(fā)病率位居第二[1]。AFP作為一種診斷原發(fā)性肝癌的重要腫瘤標(biāo)志物已被醫(yī)學(xué)界公認(rèn)，并被廣泛用于原發(fā)性肝癌的排查、確診、療效評估以及復(fù)發(fā)預(yù)測等，但AFP在診斷原發(fā)性肝癌時(shí)存有一定遺漏，給原發(fā)性肝癌早期診斷造成了困難[3-5]。研究表明，約10%肝癌患者血清無AFP，且高達(dá)30%的肝癌患者的血清AFP水平很低[13]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，AFP單項(xiàng)檢測陽性率為78.5%，該報(bào)道和前人結(jié)果相呼應(yīng)[6,14]。傳統(tǒng)意義上利用AFP檢測原發(fā)性肝癌的診斷方法很少，尋找更特異、更敏感的診斷方法是原發(fā)性肝癌診斷中的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。

多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)用的血清學(xué)檢測已成為當(dāng)今診斷原發(fā)性肝癌的主流方法，迄今為止，已有大量研究探究了多種不同腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測在診斷原發(fā)性肝癌上的臨床效用，但AFP聯(lián)合AFP-L3、GPDA和CA125的血清學(xué)檢測在診斷原發(fā)性肝癌方面的研究仍十分缺乏[6-7,9-10]。AFP-L3是經(jīng)由美國食品藥品管理局認(rèn)證的新型肝癌腫瘤標(biāo)志物，是肝癌細(xì)胞特異性AFP，對原發(fā)性肝癌的臨床診斷具有很高的實(shí)用價(jià)值[15]。本研究數(shù)據(jù)顯示，AFP-L3單項(xiàng)檢測陽性率為76.9%，與AFP單項(xiàng)檢測陽性率78.5%相近，與上述文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致[15]。GPDA是存于人體組織和血液的二胎萘酰氨酶，Kojima等[16]和朱薇等[17]的臨床研究證實(shí)，肝膽疾病(特別是肝癌)患者的血清GPDA水平上升顯著，其對肝癌診斷具有一定臨床價(jià)值，然而它的陽性率和特異性卻不高。本研究發(fā)現(xiàn)GPDA單項(xiàng)檢測陽性率為69.2%，該結(jié)果與以往文獻(xiàn)報(bào)道相類似，表明了GPDA在陽性率方面存有局限[18]。CA125是一種腫瘤相關(guān)性糖類抗原，它是對胰腺癌和卵巢癌診斷有較高價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物，近年研究證實(shí)CA125在原發(fā)性肝癌患者的血清中也出現(xiàn)上升，尤其在晚期原發(fā)性肝癌病例中升高更為顯著[8,19]。本研究發(fā)現(xiàn)CA125單項(xiàng)檢測陽性率為70.8%，該數(shù)據(jù)得到前人研究結(jié)果的支持，證明CA125在原發(fā)性肝癌診斷中具有一定作用[6]。

本研究發(fā)現(xiàn)AFP聯(lián)合AFP-L3、GPDA以及CA125后的檢測陽性率均比每一單項(xiàng)檢測的陽性率有所提高，AFP-L3、GPDA和CA125能作為提高AFP檢測陽性率的輔助腫瘤標(biāo)志物，說明兩項(xiàng)聯(lián)合檢測能提高原發(fā)性肝癌診斷的陽性率，具有一定的臨床實(shí)用價(jià)值。AFP、AFP-L3、GPDA和CA125四項(xiàng)聯(lián)合檢測后的陽性率提高到92.3%，有顯著上升。聯(lián)合多種腫瘤標(biāo)志物的血清學(xué)檢測對提高原發(fā)性肝癌的診斷陽性率有顯著的貢獻(xiàn)，能夠彌補(bǔ)單項(xiàng)檢測陽性率相對低的不足之處，可以提高檢出率并同時(shí)減低漏診率，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。另外，聯(lián)合多種腫瘤標(biāo)志物的血清學(xué)檢測可能在評估原發(fā)性肝癌療效和轉(zhuǎn)歸方面具有一定指導(dǎo)作用，值得在實(shí)際臨床診斷中推廣運(yùn)用。

[1] 蔡永娥,喬建錦,孫曉茹,等.我國原發(fā)性肝癌研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2008,16(1):141-143.

[2] 湯釗猷.現(xiàn)代腫瘤學(xué)[M].2版.上海：上海醫(yī)科大學(xué)出版社,2001:553.

[3] Li C,Li G,Miao R,etal.Primary liver cancer presenting as pyogenic liver abscess:characteristics,diagnosis,and management[J].J Surg Oncol,2011,105(7):687-691.

[4] Shirakawa H,Kuronuma T,Nishimura Y,etal.Glypican-3 is a useful diagnostic marker for a component of hepatocellular carcinoma in human liver cancer[J].Int J Oncol,2009,34(3):649-656.

[5] 沈錚,沈霞.甲胎蛋白及其異質(zhì)體檢測的臨床應(yīng)用價(jià)值[J].上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2000,15(6):361-362,370.

[6] 代維,李志清,姜紅峰,等.血清AFP、CA19-9、CA125、CEA、γ-GT聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值[J].華中醫(yī)學(xué)雜志,2007,31(2):143-144.

[7] 汪勇軍,陳芳建,寇資金.AFP、CA19-9、AFU、ALP聯(lián)檢對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值[J].浙江預(yù)防醫(yī)學(xué),2009,21(2):81-82.

[8] 顏登國,區(qū)慶嘉.聯(lián)合檢測血AFP、CA19-9和CA125對原發(fā)性肝癌診斷的意義[J].實(shí)用腫瘤學(xué)雜志,2001,15(1):17-19.

[9] 殷翠紅,蔣龍鳳,嚴(yán)友德.AFP、AFU、β2-MG、CA199聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的早期診斷價(jià)值[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2012,12(36):7124-7127.

[10] 周小蕙.聯(lián)合檢測血清AFP、CA199、β2-MG對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(5):549,551.

[11] 楊秉輝,夏景林.原發(fā)性肝癌的臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)[J].中華肝臟病雜志,2001,9(6):324.

[12] 中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會、肝病學(xué)分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華肝臟病雜志,2000,8(6):324-329.

[13] 史玉玲.血清AFP-L3,GP73聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌早期診斷價(jià)值[J].北華大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2013,14(5):569-571.

[14] 于皆平,沈志祥,羅和生.實(shí)用消化病學(xué)[J].世界華人消化雜志,2000,8(5):523.

[15] 賈志凌,王莉,劉暢,等.甲胎蛋白異質(zhì)體對肝癌診斷的臨床意義[J].中國腫瘤,2010,19(10):686-688.

[16] Kojima J,Kanatani M,Kato M,etal.Serum glycylproline dipeptidyl aminopeptidase activity in human hepatic cancer[J].Clin Chim Acta,1979,93(2):181-187.

[17] 朱薇,黃介飛.血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值[J].交通醫(yī)學(xué),1996,10(4):10-12.

[18] 宋書衛(wèi),陳國軍.血清GPDA、AFu活力聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2001,19(5):268-269,267.

[19] 陳德遠(yuǎn).CA125、CA50、TSGF聯(lián)檢對卵巢癌的診斷價(jià)值[J].放射免疫學(xué)雜志,2002,15(6):343-344.