原種羅氏沼蝦雜交后代的繁殖參數(shù)研究

范忠剛, 屈長(zhǎng)青， 鄧 潛, 趙永貞， 張 彬

(1. 安徽大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院, 合肥 230601; 2. 廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院, 南寧 530021； 3. 抗衰老中草藥安徽省工程技術(shù)研究中心， 阜陽(yáng) 236041)

羅氏沼蝦(Macrobrachiumrosenbergii)又稱馬來(lái)西亞大蝦、淡水長(zhǎng)臂大蝦，其味鮮美、食性廣、生長(zhǎng)快、生長(zhǎng)周期短，是目前國(guó)內(nèi)主要的3大淡水經(jīng)濟(jì)蝦類之一[1]。自從20世紀(jì)70年代引入中國(guó)以來(lái)，由于長(zhǎng)期種群內(nèi)繁殖，種質(zhì)資源衰退現(xiàn)象嚴(yán)重，主要表現(xiàn)為生長(zhǎng)速度緩慢、抗病能力下降、性成熟提前、個(gè)體小等[2,3]。這使得“蝎子蝦”(一種性早熟的雄蝦)現(xiàn)象頻發(fā)，“蝎子蝦”的大量出現(xiàn)改變了塘蝦群體結(jié)構(gòu)，原因是一方面具有生長(zhǎng)潛質(zhì)的黃鉗雄蝦(OC)與個(gè)體最終形態(tài)的藍(lán)鉗雄蝦(BC)被早熟的蝎子蝦(小雄蝦，SM)取代，雄蝦個(gè)體規(guī)格大幅度下降。另一方面，因?yàn)樾游r會(huì)在池塘中與性成熟的雌蝦交配，導(dǎo)致池塘中的部分雌蝦因?yàn)閼崖哑陂g不蛻殼的自然生理機(jī)制而未能按時(shí)蛻殼生長(zhǎng)。最終影響了塘蝦的整體大小規(guī)格，使得池塘飼養(yǎng)單產(chǎn)大幅度降低，嚴(yán)重影響了經(jīng)濟(jì)效益。因此，羅氏沼蝦親蝦的種質(zhì)衰退問(wèn)題得到了史無(wú)前例的重視。近年來(lái)有關(guān)羅氏沼蝦種質(zhì)改良的報(bào)道主要集中在選擇育種，而有關(guān)羅氏沼蝦雜交選育的報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)以孟加拉引進(jìn)種群Macrobrachiumrosenbergiidacqueti(Sunier，1925年)和越南引進(jìn)種群Macrobrachiumrosenbergiirosenbergii(De Man，1879年)為父母本做正、反雜交，并對(duì)雜交組合的繁殖參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以期為羅氏沼蝦雜交育種提供參考。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)場(chǎng)地

試驗(yàn)操作根據(jù)蝦場(chǎng)里日常生產(chǎn)安排于2011年5月和2012年3月在廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院羅氏沼蝦良種場(chǎng)各進(jìn)行1次。羅氏沼蝦親本為廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院羅氏沼蝦良種場(chǎng)保種繁育用的孟加拉引進(jìn)種群Macrobrachiumrosenbergiidacqueti(Sunier，1925年)和越南引進(jìn)種群Macrobrachiumrosenbergiirosenbergii(De Man，1879年)，選取性腺發(fā)育成熟度接近的個(gè)體作為親本材料。雜交選育所用的設(shè)施、用具、藥品、餌料等均由本場(chǎng)提供。

1.1.2 儀器與設(shè)備

生物顯微鏡，游標(biāo)卡尺，電子稱，電子分析天平。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 設(shè)計(jì)雜交組合

正交：越南引進(jìn)種群♀×孟加拉引進(jìn)種群♂；

反交：孟加拉引進(jìn)種群♀×越南引進(jìn)種群♂。

1.2.2配對(duì)

2011年5月以孟加拉引進(jìn)種群和越南引進(jìn)種群為父母本做正、反雜交配對(duì)。父本80尾，母本160尾；2012年3月，以孟加拉引進(jìn)種群和越南引進(jìn)種群為父母本做正、反雜交配對(duì)。父本70尾，母本140尾。在配對(duì)池掛標(biāo)志牌，注明親本名，配對(duì)日期。雜交配對(duì)親蝦如圖1、圖2、圖3和圖4。

圖1 原種孟加拉雄蝦

圖2 原種孟加拉雌蝦

圖3 原種越南雄蝦

圖4 原種越南雌蝦

1.2.3 日常管理

隔天輪換投喂新鮮螺肉、玉米粒、煮熟的雞蛋和魚(yú)肉，并保持水質(zhì)清潔。pH值控制在7.0～7.5之間；氨氮和亞硝酸控制在0.2 mg/L以下；水溫控制在27℃～28℃。親本中若發(fā)現(xiàn)有死亡個(gè)體應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充。

1.2.4 雜交組合的繁殖參數(shù)檢測(cè)

檢測(cè)受精率、體重相對(duì)繁殖力、體長(zhǎng)相對(duì)繁殖力、性腺系數(shù)。受精率(%)=受精卵數(shù)量/懷卵量×100%；

體重相對(duì)繁殖力(%)=受精卵數(shù)量/體重×100%；體長(zhǎng)相對(duì)繁殖力(%)=受精卵數(shù)量/體長(zhǎng)×100%；性腺系數(shù)(%)=性腺重量/體重×100%

2 試驗(yàn)結(jié)果與統(tǒng)計(jì)分析

2.1 雜交配對(duì)產(chǎn)生性腺發(fā)育基本一致的懷卵蝦數(shù)量

配對(duì)1周后，配對(duì)池中開(kāi)始有部分雌蝦在雄蝦的護(hù)佑下完成生殖蛻殼并與其交配。2周后，可在夜間觀察到懷卵蝦貼近水面游動(dòng)或攀附氣管。此階段胚胎開(kāi)始出現(xiàn)眼點(diǎn)，卵黃減少,胚胎開(kāi)始呈彎弓形狀，隨著發(fā)育逐漸向后伸長(zhǎng)，尾節(jié)直達(dá)頭胸部。用顯微鏡可以觀察到胚胎心跳。雜交配對(duì)懷卵蝦收獲情況如表1。

表1 雜交配對(duì)懷卵蝦收獲情況

2.2 雜交組合的繁殖參數(shù)測(cè)量結(jié)果

在體重為22～32 g的5尾正交組雌蝦中，懷卵量均值為25740粒/尾，受精率為60.0%～69.7%(均值為64.58%)，體重相對(duì)繁殖力均值為976.2粒/g，體長(zhǎng)相對(duì)繁殖力均值為2370.34粒/cm,性腺系數(shù)均值為9.586%；在體重為25.6～35.1 g的5尾反交組雌蝦中，懷卵量均值為30242粒/尾，受精率為60.9%～67.3%(均值為67.3%)，體重相對(duì)繁殖力均值為941.92粒/g，體長(zhǎng)相對(duì)繁殖力均值為2674.44粒/cm,性腺系數(shù)均值為8.838%。具體測(cè)量結(jié)果見(jiàn)表2和表3。

表2 正、反交組的受精率統(tǒng)計(jì)

表3 正、反交組懷卵量、相對(duì)繁殖力與性腺系數(shù)測(cè)定結(jié)果

2.3 雜交組合的繁殖參數(shù)均數(shù)比較

通過(guò)對(duì)正反交組合各取5例雌蝦進(jìn)行繁殖參數(shù)測(cè)定，經(jīng)SPSS17.0計(jì)算和統(tǒng)計(jì)分析，各雜交組的各項(xiàng)繁殖參數(shù)的平均值組間差異不顯著(P﹥0.05).正、反交組合的繁殖參數(shù)均數(shù)比較見(jiàn)表4。

表4 正、反交組合的繁殖參數(shù)均數(shù)比較

3 討論

雜交選育是動(dòng)植物遺傳改良的重要手段，也是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)育種的重要途徑之一，在魚(yú)[4-7]、蝦[8-10]、蟹[11]、貝[12,13]中均有相關(guān)報(bào)道。筆者通過(guò)SPSS 17.0軟件對(duì)孟加拉引進(jìn)種群Macrobrachiumrosenbergiidacqueti(Sunier，1925年)和越南引進(jìn)種群Macrobrachiumrosenbergiirosenbergii(De Man，1879年)的正反交各雜交組的各項(xiàng)繁殖參數(shù)的平均值進(jìn)行單因子方差分析，結(jié)果表明正反交各雜交組的各項(xiàng)繁殖參數(shù)的平均值組間差異不顯著(P>0.05)(如表4)。羅氏沼蝦的產(chǎn)卵量因個(gè)體大小和性腺發(fā)育情況不同而異，李增崇通過(guò)對(duì)體重32～64 g的10尾雌蝦進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)其抱卵量分別為46800～88400粒，平均每克體重抱卵量1061.2～1529.4粒[14]。本研究中正反交組中雌蝦的平均懷卵量為25740.200～30242.200粒，與李增崇的測(cè)定結(jié)果相比偏少。這可能是實(shí)驗(yàn)雌蝦偏小和性腺發(fā)育情況不同的緣故。但本研究中受精卵粒相對(duì)較大，達(dá)到941.9～976.2粒/克。更大的卵粒會(huì)發(fā)育成更大的幼體，有助于提高種群的生存能力。

當(dāng)然，不可否認(rèn)的是當(dāng)前的羅氏沼蝦養(yǎng)殖技術(shù)要比上世紀(jì)80年代的更加先進(jìn)，許多養(yǎng)殖品種的性狀都得到了有效改良。因此，本研究只能在既定層面上闡述原種羅氏沼蝦雜交選育得到的研究結(jié)果，以期為今后開(kāi)展原種羅氏沼蝦的雜交選育提供參考。

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