DC-CIK抗消化道腫瘤的研究進展

張義，謝海龍，李龍（長江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北 荊州 434023）

田夫（長江大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市第一人民醫(yī)院普外科，湖北 荊州 434000）

隨著生物技術(shù)的不斷更新，腫瘤除了傳統(tǒng)的手術(shù)、放化療等治療外還出現(xiàn)腫瘤生物治療，它包括了過繼性細胞免疫治療，而過繼性免疫治療的兩個重要部分如DC-CIK，其中DC是目前已了解的功能最強大的抗原提呈細胞，其作用為認別、攝取、提呈抗原后激發(fā)特異的免疫反應(yīng)；CIK有多種細胞因子刺激后產(chǎn)生的異質(zhì)細胞，具有扮演T淋巴細胞角色作用也發(fā)揮殺傷細胞的特性。依據(jù)現(xiàn)有的研究可看出，DC-CIK在腫瘤生物治療發(fā)面有著突出表現(xiàn)，兩者聯(lián)合相互促進、協(xié)調(diào)并使其抗腫瘤效應(yīng)達到最佳。本文就DC-CIK的基礎(chǔ)研究及抗消化道腫瘤臨床研究做一綜述。

1 樹突狀細胞（DC）

1.1 DC生物學(xué)特性

DC是由Steinman等［1］于20世紀70年代研究發(fā)現(xiàn)，因其奇特的外形而稱之為樹突狀細胞。在目前已經(jīng)研究的抗原提呈細胞中功能最強，是T細胞的專職抗原提呈細胞，是102～103倍于其他的抗原提呈細胞［2］。廣泛分布在全身組織中，除角膜、腦外，但含量非常少，在血細胞中占單核細胞總數(shù)不到百分之一［3］。CD14＋或CD34＋細胞是DC的前體細胞，可在體外用腫瘤壞死因子等細胞因子刺激發(fā)育成DC。根據(jù)其來源分為髓系DC和淋巴系DC，這些DC因分布及分化不同有相應(yīng)的名字［4］。在人體內(nèi)絕大多數(shù)DC是不成熟的，高表達是膜分子如FCRⅡ［5］，主要參與攝取、加工處理抗原；已攝取抗原的不成熟DC從外周組織遷移至淋巴器官并分布在T細胞區(qū)后通過免疫反應(yīng)漸成為成熟DC，這時的DC具有高表達分子為MHCⅠ類/Ⅱ類分子、共刺激分子及黏附分子等，可激活初始T細胞而產(chǎn)生效應(yīng)T細胞［6］。DC也可分泌IL-12，誘導(dǎo)NK、T細胞產(chǎn)生穿孔素、顆粒酶及TNF等。另DC可在體外誘導(dǎo)和擴增后用相關(guān)抗原沖擊或基因轉(zhuǎn)染等方法使DC加載抗原［7］，能提高CIK的殺瘤特異性。

DC的異常改變及功能受傷的機制尚不清楚，可能是由于腫瘤對宿主的免疫抑制作用過于強大以及多種細胞因子如轉(zhuǎn)化生長因子、VEGF、IL-10等影響有關(guān)［8］。

1.2 DC抗瘤機制

①成熟的DC能使大量效應(yīng)T細胞產(chǎn)生，可達到直接殺傷腫瘤細胞效果。②DC分泌的細胞因子如IFN-a、IL-4、IL-10等抑制了腫瘤血管的細胞增殖［9］，進而抑制腫瘤細胞生長來達到間接殺瘤作用，也可分泌趨化性因子如IL-8、MCP-1等可使T細胞向腫瘤遷移，以便更高密度的T細胞來殺傷腫瘤細胞。

2 細胞因子誘導(dǎo)的自然殺傷細胞（CIK）

2.1 CIK的生物學(xué)特性

CIK經(jīng)典誘導(dǎo)途徑是由Schimidt-wolf等［10］在20世紀90年代第一次提出，是單核細胞在體外經(jīng)不同種細胞因子刺激產(chǎn)生的一群的異質(zhì)細胞，高表達CD3＋和CD56＋［11］，具有NK細胞的非MHC限制性殺瘤特點，還兼有T細胞強大抗瘤活性［12］。故CIK可殺傷大多數(shù)腫瘤細胞，但由于不具有特異的識別和殺傷腫瘤細胞［13］，因此其殺傷效應(yīng)仍達不到最佳。

2.2 CIK抗瘤機制如下

①CIK受到DC分泌的IL-12刺激后產(chǎn)生穿孔素及顆粒酶等可以使腫瘤細胞膜裂解，達到直接殺傷腫瘤細胞［14］。②CIK分泌大量細胞因子如IFN－γ、TNF-B淋巴細胞素等間接殺傷腫瘤細胞［15］。CIK表面的Ⅱ型跨膜糖蛋白與腫瘤細胞膜Ⅰ型跨膜糖蛋白相結(jié)合，可誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡［16］。

3 DC-CIK

3.1 DC和CIK聯(lián)合

將DC和CIK聯(lián)合培養(yǎng)可以獲得兼有兩者特性的效應(yīng)細胞也即為DC-CIK，可以相互協(xié)調(diào)使CD3＋、CD8＋ 和CD3＋、CD56＋ 雙陽性效應(yīng)細胞的數(shù)量大量增加［17］，同時還具有特異的殺傷腫瘤細胞及更強抗瘤活性，這樣彌補了CIK的不足。DC-CIK的生物學(xué)特性及抗瘤效果大大強于單一的CIK，故DC-CIK在抗腫瘤方面將可達到最大效應(yīng)。另用抗原負載的DC與CIK一起培養(yǎng)出來的效應(yīng)細胞，對腫瘤細胞更具有特異識別和殺傷力［18］。

3.2 DC-CIK抗瘤機制如下

①DC和CIK共培養(yǎng)時，DC分泌IL-2、IL-12、IFN-γ等細胞因子，可促進CIK增殖的速度加快［19］，同時DC表面的CD40和CIK表面的CD40配體相互結(jié)合，對腫瘤細胞的增殖可產(chǎn)生負面影響［20］。②DC和CIK共培養(yǎng)后，可彼此激發(fā)兩者成熟［21］，DC表面的MHC－Ⅱ類分子、共刺激分子等表達的更顯著，CIK表面的CD56表達也會明顯增加。

4 DC-CIK抗消化道腫瘤的臨床研究

目前DC-CIK細胞免疫治療的廣譜殺瘤效應(yīng)對多種惡性腫瘤均有很好的臨床療效，特別在治療消化道惡性腫瘤如胃癌、結(jié)直腸癌、肝癌、胰腺癌等取得了一定成果，下面就分別有無抗原負載的DCCIK進行敘述。

4.1 無抗原負載的DC-CIK細胞

鞏新建等［22］將110位胃癌術(shù)后患者，依據(jù)TNM分期處于T2～T3期，術(shù)后病人隨機分為兩組，一組52名患者給予DC-CIK治療；其他患者為二組，給予全部采用CF＋5-FU＋ADM＋DDP方案的化療。結(jié)果為：患者5年生存率一組比二組明顯增高，一組治療后能較好的改善患者生活質(zhì)量。

李莎等［23］將40位結(jié)腸癌患者隨機分兩組，奧沙利鉑＋CF＋5-FU方案的化療組，另一組DC-CIK＋同種方案化療聯(lián)合組。結(jié)果顯示：聯(lián)合組治療后CD4＋/CD8＋比值明顯升高，提高病人機體免疫功能，局部復(fù)發(fā)率低于化療組，1到2年生存率高于化療組。

馬洪波等［24］將67例原發(fā)性肝癌患者隨機分為34例行肝癌切除術(shù)＋術(shù)后DC-CIK治療組和33例僅手術(shù)治療組。結(jié)果是：DC-CIK＋手術(shù)治療原發(fā)性肝癌一般不會出現(xiàn)嚴重副作用，不僅可以提高患者的免疫功能及治療效果，還能能很好的改善生活質(zhì)量。

劉愛華［25］等將50例胰腺癌患者依據(jù)治療方式分為25例化療＋DC-CIK治療作為聯(lián)合組，另25例單純化療組。結(jié)果聯(lián)合組患者治療后外周血CD4＋/CD8＋比值上調(diào)上升，能提高胰腺癌患者的機體免疫功能及抗腫瘤免疫效應(yīng)。

4.2 抗原負載的DC-CIK細胞

唐家平［26］分4種不同組的效應(yīng)細胞對胃癌細胞殺傷作用進行研究探討，分析得出：用流式細胞儀檢測比較結(jié)果是抗原負載組的DC表面CD83及CD86表達顯著增加，用MTT檢測顯示抗原負載組對胃癌細胞殺傷效果增強。另張成磊等［27］等對熱休克胃癌MKN-28細胞負載DC-CIK細胞殺傷癌細胞活性的研究中，當(dāng)效靶細胞比值為20時，Ag-DC-CIK組對癌細胞殺傷作用強于其他組。

應(yīng)敏剛等［28］將確診為結(jié)直腸癌患者共102例分兩組，一組為結(jié)直腸癌根治術(shù)＋放化療的患者，另一組在前組基礎(chǔ)上還加用抗原負載的DC-CIK治療患者。比較分析結(jié)果是：Ag-DC-CIK治療組與其他組相比病人5年生存率明顯提高。

鐘國成等［29］對24例原發(fā)性肝癌患者研究，接受負載自身肝癌裂解物的D C與CI K治療肝癌患者后，患者在免疫功能和臨床治療效果有所提高，可見接受抗原負載D C-CIK治療肝癌給臨床應(yīng)用提供了一定參考意義。

Maten等［30］用CA199負載DC-CIK對胰腺癌細胞殺傷活性研究，經(jīng)過分析對比結(jié)果是：有CA199抗原負載的DC-CIK的殺傷活性比DC-CIK要高，比單一的CIK要明顯更高?？梢奃C-CIK為治療胰腺癌提供依據(jù)。

5 DC-CIK目前面臨的問題及展望

DC-CIK細胞經(jīng)過多年不斷的發(fā)展，不斷的完善，其理論研究及臨床應(yīng)用結(jié)果都顯示抗腫瘤效果顯著增強，在改善患者預(yù)后、生存期及生活質(zhì)量等有良好效果。但現(xiàn)在DC-CIK細胞免疫治療還沒大規(guī)模應(yīng)用，臨床病例數(shù)目不夠大，故評價DC-CIK在臨床上的療效和長期的安全性有待進一步觀察。DC與CIK多少比值培養(yǎng)可以發(fā)揮最大效應(yīng)及盡可能降低的副反應(yīng)，效靶細胞是多少比值可以最理想治療效果及效應(yīng)細胞回輸?shù)膫€體化方案仍需要進一步探討。但毫無疑問，DC-CIK細胞免疫治療作為一種有望根治腫瘤的治療方式，隨著新技術(shù)的發(fā)展和臨床研究的深入，將會與腫瘤傳統(tǒng)治療有機結(jié)合，給腫瘤患者帶來新的曙光。

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［編輯］ 何勇