MCP-1在腦動(dòng)脈支架植入術(shù)圍術(shù)期及隨訪期間的炎癥研究

韓冰莎 陳佳佳 李天曉 李釗碩 許崗勤

鄭州大學(xué)人民醫(yī)院介入科，河南鄭州 450003

MCP-1在腦動(dòng)脈支架植入術(shù)圍術(shù)期及隨訪期間的炎癥研究

韓冰莎 陳佳佳 李天曉 李釗碩 許崗勤

鄭州大學(xué)人民醫(yī)院介入科，河南鄭州 450003

目的 以腦血管支架植入患者為研究對(duì)象，通過(guò)ELISA方法探討單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)在圍術(shù)期及隨訪期間的表達(dá)，進(jìn)一步了解MCP-1在支架植入術(shù)后的炎癥免疫反應(yīng)過(guò)程。方法 篩選50例該中心給予腦血管支架植入的患者，另有30例同期住院未接受支架術(shù)治療的同病患者為對(duì)照組。簽署知情同意書后，分別在兩組患者術(shù)前、術(shù)后7 d和術(shù)后6個(gè)月，用ELISA檢測(cè)其相關(guān)炎性細(xì)胞因子MCP-1的表達(dá)水平。結(jié)果 與對(duì)照組比較，支架治療患者外周血中MCP-1水平在術(shù)前分布接近(P＞0.05)，在術(shù)后7 d和術(shù)后6個(gè)月明顯升高(P＜0.01)。支架治療組患者術(shù)后6個(gè)月經(jīng)影像學(xué)檢查證實(shí)發(fā)生再狹窄患者16例(32%)，其血清MCP-1水平分布在術(shù)前和術(shù)后7 d與支架術(shù)后無(wú)再狹窄患者接近(P＞0.05)，但術(shù)后 6個(gè)月MCP-1水平顯著高于后者(P＜0.01)。結(jié)論 血漿MCP-1的表達(dá)增高可能參與了腦血管支架植入后引發(fā)的局部和系統(tǒng)的急性炎癥反應(yīng)，且指標(biāo)隨訪期間高表達(dá)是支架術(shù)后再狹窄的危險(xiǎn)因素。

支架置入術(shù)；炎性反應(yīng)；圍術(shù)期；隨訪；MCP-1

動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)與60%～80%的缺血性卒中有關(guān)[1]，是卒中的主要原因。支架成形術(shù)是顱內(nèi)動(dòng)脈粥樣硬化狹窄藥物治療以外的一種重要治療手段，在預(yù)防卒中復(fù)發(fā)方面發(fā)揮重要作用，目前已經(jīng)比較廣泛的應(yīng)用于臨床。研究表明支架植入術(shù)后再狹窄的發(fā)生過(guò)程中炎癥因素是重要環(huán)節(jié)[2]。單核細(xì)胞趨化蛋白-1(Monocyte Chemotactic Pro-tein-1，MCP-1)是通過(guò)趨化單核/巨噬細(xì)胞遷移至動(dòng)脈內(nèi)膜下大量吞噬脂質(zhì)，促進(jìn)AS斑塊的形成。那么腦血管支架植入術(shù)后的炎癥反應(yīng)中是否也有MCP-1的參與作用？該研究觀察了2012年1月—2014年1月期間50例腦動(dòng)脈支架植入術(shù)圍術(shù)期及隨訪期間外周血中MCP-1的表達(dá)水平的變化及其意義，并與30例未接受支架成形術(shù)的同類疾病患者比較，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院介入科腦血管病區(qū)行腦動(dòng)脈支架植入術(shù)的患者50例。入選標(biāo)準(zhǔn)：①有短暫性腦缺血發(fā)作或神經(jīng)功能障礙的缺血性卒中患者；②經(jīng)CTA、MRA或全腦血管造影術(shù)(DSA)證實(shí)供應(yīng)病灶的責(zé)任血管狹窄≥70%；③愿意行責(zé)任血管支架（單枚）植入術(shù)、并鑒定知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①既往行心腦血管介入治療者；②近期 1個(gè)月內(nèi)患有惡性腫瘤，感染性疾病，自身免疫性疾病者；③支架植入術(shù)圍手術(shù)期出現(xiàn)并發(fā)癥：如主要分支閉塞、夾層形成、高灌注腦出血、腦水腫、嚴(yán)重血管痙攣者。

對(duì)照組選擇同期住院具有腦血管狹窄的危險(xiǎn)因素患者30例，該組入選對(duì)象皆因經(jīng)濟(jì)條件或其他原因放棄行腦動(dòng)脈支架植入術(shù)，簽署同意書并行DSA。對(duì)照組符合支架治療組納入標(biāo)準(zhǔn)的①和②及全部排除標(biāo)準(zhǔn)。

兩組患者的平均年齡、性別、疾病分類、伴隨危險(xiǎn)因素、術(shù)前C-反應(yīng)蛋白水平、狹窄部位和程度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表1。

表1 支架治療組與對(duì)照組臨床資料特征[n(%)]

1.2 支架植入術(shù)圍手術(shù)期用藥及操作

所有患者術(shù)前7 d起開(kāi)始口服氯毗格雷75 mg/d和阿司匹林100 mg/d；術(shù)前2 h起持續(xù)靜脈泵注射尼莫地平；術(shù)中給予肝素70～100 U／kg；術(shù)后口服阿司匹林0.1 g/d，立普妥20 mg/d，長(zhǎng)期維持；玻立維75 mg/d，口服6～9個(gè)月。支架置入按常規(guī)方法進(jìn)行，全部患者行預(yù)擴(kuò)張后置入支架，支架完全覆蓋病變，術(shù)后殘余狹窄＜20%。術(shù)后6個(gè)月復(fù)查DSA。

1.3 研究方法

兩組患者均于支架植入和DSA術(shù)前、術(shù)后7 d及術(shù)后6個(gè)月采集空腹靜脈血，3 000 r/min離心 10 min，分離血清，-20℃冰箱保存待檢。嚴(yán)格按照酶聯(lián)免疫-雙抗體夾心法試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，應(yīng)用全自動(dòng)酶標(biāo)儀測(cè)定測(cè)定光密度值，據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線同時(shí)成批測(cè)定兩組患者血漿MCP-1濃度。酶標(biāo)儀型號(hào)：DENLEY DRAGON Wellscan MK3，產(chǎn)自芬蘭。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用組間 t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清 MCP-1的狀況

支架治療組患者術(shù)前MCP-1濃度與對(duì)照組接近(P＞0.05)；術(shù)后7 d、術(shù)后6個(gè)月顯著高于術(shù)前和對(duì)照組同期(P＜0.01)。頸內(nèi)動(dòng)脈和椎基底動(dòng)脈支架治療組之間在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)MCP-1水平分布，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，這兩個(gè)亞組術(shù)后7 d、術(shù)后6個(gè)月血清MCP-1水平高于術(shù)前和對(duì)照組同期(P＜0.05～0.01)。見(jiàn)表2。

表2 支架治療組和對(duì)照組MCP-1的血漿濃度

表2 支架治療組和對(duì)照組MCP-1的血漿濃度

注:a與術(shù)前比較，P＜0.01;b與術(shù)前比較，P＜0.05;c與對(duì)照組同期比較, P＜0.01。

組別MCP-1蛋白（pg/mL）術(shù)前 術(shù)后7 d 術(shù)后6個(gè)月支架治療組(n=50)頸內(nèi)動(dòng)脈支架組(n=29)椎基底動(dòng)脈支架組(n=21)對(duì)照組(n=30) 55.42±11.84 55.9±12.71 54.75±10.77 57.48±12.26 (132.79±23.86)ac(129.75±24.15)ac(136.99±23.37)bc55.87±10.82 (123.15±22.21)ac(116.12±20.49)bc(132.87±21.21)bc54.34±9.86

2.2 支架術(shù)后有無(wú)再狹窄患者圍術(shù)期、隨訪期間血清MCP-1水平比較

支架內(nèi)再狹窄的判斷標(biāo)準(zhǔn)為直徑減少50%，術(shù)后6個(gè)月經(jīng)影像學(xué)檢查證實(shí)16例發(fā)生再狹窄(32%)。支架內(nèi)再狹窄組與無(wú)支架內(nèi)再狹窄組術(shù)前（P=0.661）、術(shù)后7 d（P=0.379）MCP-1水平相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，支架內(nèi)再狹窄組較無(wú)支架內(nèi)再狹窄組術(shù)后6個(gè)月（P=0.005）MCP-1水平明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 支架術(shù)后有無(wú)再狹窄患者圍術(shù)期、隨訪期間血清MCP-1水平比較

表3 支架術(shù)后有無(wú)再狹窄患者圍術(shù)期、隨訪期間血清MCP-1水平比較

注:a與對(duì)照組同期比較，P＜0.01。

組別MCP-1蛋白（pg/mL）術(shù)前 術(shù)后7 d 術(shù)后6個(gè)月支架術(shù)后再狹窄組(n=16)支架術(shù)后無(wú)狹窄組(n=34) 54.05±13.15 56.06±11.32 138.05±28.1 130.32±21.61 (130.2±30.14)a119.84±16.86

3 討論

關(guān)于缺血性卒中的主要原因，歐美人群以顱外動(dòng)脈粥樣硬化引起的血管狹窄為主，而在亞洲人群中30%的缺血性卒中由顱內(nèi)動(dòng)脈粥樣硬化引起[3]。研究表明支架植入后，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和血小板聚集的共同作用會(huì)釋放出各種由化學(xué)趨化因子和白細(xì)胞介素所介導(dǎo)的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子激活血管中層平滑肌細(xì)胞[4]，使平滑肌細(xì)胞遷移增生，分泌大量細(xì)胞外基質(zhì)，最終導(dǎo)致血管內(nèi)膜的增厚和血管的重塑。支架作為外來(lái)物體以及后期支架釋放產(chǎn)生的機(jī)械張力對(duì)血管壁持續(xù)性的損傷必將引起機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答[5]。結(jié)合病變血管狹窄程度，殘余狹窄率以及斑塊性質(zhì)等因素，在手術(shù)過(guò)程中選擇性地進(jìn)行球囊擴(kuò)張或者使用保護(hù)傘等操作，均會(huì)不同程度的使斑塊破裂，使血管壁處于一個(gè)持續(xù)受壓的狀態(tài)，細(xì)胞-配體間的黏附反應(yīng)被啟動(dòng)，從而激發(fā)一系列的局部炎癥反應(yīng)。

MCP-1是一種分泌性蛋白質(zhì)，調(diào)控成纖維細(xì)胞，參與血管再生等過(guò)程，在AS中具有促炎作用，并通過(guò)誘導(dǎo)MMP家族的表達(dá)，參與斑塊破裂的過(guò)程[6]。該研究中，支架治療組患者外周血中術(shù)前MCP-1水平分布與對(duì)照組接近，在術(shù)后7 d、術(shù)后6個(gè)月濃度高于術(shù)前和對(duì)照組同期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。我們考慮MCP-1可能參與了支架植入術(shù)后動(dòng)脈的亞急性和慢性炎癥、結(jié)構(gòu)重建和纖維化等過(guò)程。機(jī)理主要包括以下 3個(gè)方面：①誘導(dǎo)多種前炎癥因子的釋放，介導(dǎo)炎癥細(xì)胞在支架損傷內(nèi)皮局部浸潤(rùn)，在清除病原體的同時(shí)也引起組織損傷；②參與中性粒細(xì)胞的增殖和趨化過(guò)程，同時(shí)募集單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞至炎癥反應(yīng)處；③同TNF-α、IL-1β和 IFN-γ等其他炎癥細(xì)胞因子產(chǎn)生相互協(xié)同效應(yīng)，加強(qiáng)和放大炎癥反應(yīng)。我們的研究顯示外周血中MCP-1細(xì)胞水平在支架植入術(shù)后6個(gè)月較支架植入急性期術(shù)后7 d降低，這可能是因?yàn)槟X動(dòng)脈支架術(shù)后6個(gè)月時(shí)以自然殺傷細(xì)胞、輔助性T細(xì)胞和抗原提呈現(xiàn)細(xì)胞的損害為主[7]，炎癥反應(yīng)減輕，體內(nèi)免疫系統(tǒng)受到一定程度抑制[8]。

支架內(nèi)再狹窄（In-stent restenosis,ISR）是支架術(shù)后卒中復(fù)發(fā)的重要原因也是評(píng)價(jià)支架成形術(shù)遠(yuǎn)期效果的重要指標(biāo)[9]。其病理機(jī)制為內(nèi)膜增生、血栓形成、負(fù)性重構(gòu)[10]以及炎性遞質(zhì)和抗炎遞質(zhì)間的失衡。我們的結(jié)果顯示，支架內(nèi)再狹窄組較無(wú)支架內(nèi)再狹窄組術(shù)后6個(gè)月 MCP-1水平明顯增高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MCP-1參與支架再狹窄過(guò)程的分子和細(xì)胞機(jī)制可能存在以下環(huán)節(jié)：支架置入可引發(fā)內(nèi)皮剝脫、斑塊破裂，表達(dá)P-選擇素等粘附分子，通過(guò)巨噬細(xì)胞表面抗原1等整聯(lián)蛋白家族的作用?？墒寡芷交〖?xì)胞向更具分泌性和增殖性的表型轉(zhuǎn)化，并向內(nèi)膜遷移，動(dòng)脈就進(jìn)入了重構(gòu)階段，包括胞外基質(zhì)蛋白降解和重新合成，加速管腔狹窄[11]。

該研究還存在隨訪時(shí)間較短、患者更多的臨床預(yù)后信息不完善、沒(méi)有對(duì)支架植入處局部血管壁組織進(jìn)行分析研究等不足之處，今后將進(jìn)一步進(jìn)行追蹤研究。綜上，該組研究提示MCP-1參與了腦動(dòng)脈支架成形術(shù)后各個(gè)時(shí)期的炎癥反應(yīng)，其在支架術(shù)后持續(xù)高濃度的表達(dá)導(dǎo)致了再狹窄事件增加。從而為今后腦血管支架植入后的早期干預(yù)措施提供新的思路，將對(duì)于預(yù)防和治療支架內(nèi)再狹窄具有重要意義。

[1]Panorchan P,Thompson MS,Davis KJ,et al.Single molecule analysis of cadherin mediated celladhesion[J].J Cell Sci,2006,119(1):66-74.

[2]Kraiss LW,Geary RL,Mattsson EJ,et al.Acute reductions in blood flow and shear stress induce platelet derived growth factor A expression in baboon prosthetic grafts[J].Circulation research,1996,79:45-53.

[3]Wong KS.Use of transcranial Doppler ultrasound to predict outcome in patients with intracranial large artery occlusive disease[J].Stroke,2000, 31:2641-2647.

[4]Landzberg BR，F(xiàn)rishman W H，Lerfick K．Pathophysiology and pharmacologicala approaches for prevrntion of coronary artery restenosis following coronary balloon angioplasty and related procedures[J]．Progress Cardi0vascular Disease，1997，9：361．

[5]Maulik N,Das DK.Redox signaling in vascular angiogenesis[J].Free radical biology&medicine,2002,33:1047-1060.

[6]Dag mar H,Artiom P,Nezam H,et al.Radiolabeled monocyte chemotactic protein-1 for the detection of inflammation in experi-mental atherosclerosis[J]．J NuclMed，2007，48(11):181-182.

[7]Meisel C,Meisel A.Suppressing immunosuppression after stroke[J]．The New England journal of medicine，2011，365:2134-2136.

[8]Galkina E,Ley K.Immune and inflammatory mechanisms of atherosclerosis[J]．Annual review of immunology，2009，27:165-197.

[9]Levy EI,Turk AS,Albuquerque FC,et al.Wingspan in-stent restenosis and thrombosis：incidence，clinicalpresentation，and management[J]．Neurosurgery，2007，61:644-650.

[10]Turk AS,Levy EI,Albuquerque FC,et al.Influence of patient age and stenosis location on wingspan in·stent restenosis[J]．AJNR AmJ Neuroradiol，2008,29:23-27.

[11]Malek AM,Gibbons GH,Dzau VJ,et al.Fluid shear stress differentially modulates expression of genes encoding basic fibroblast growth factor and Platelet derived growth factor B chain in vascular endothelium[J]．The Journal of clinical investigation,1993,92:2013-2021.

The Inflammatory Response of MCP-1 in Patients with Cerebral Stent Implantation During Perioperative and Follow-up Periods

HAN Bingsha CHEN Jiajia LI Tianxiao LI Zhaoshuo XU Gangqin
Invasive Technology Department,Zhengzhou University People's Hospital,Zhengzhou,Henan Province,450003,China

Objective To explore the expression of monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1)in patients with cerebral stent implantation during perioperative and follow-up periods by ELISA so as to further investigate the inflammation immune response process of MCP-1 after stent implantation.Methods 50 cases underwent cerebral stent implantation in our center were enrolled as the investigating subjects,another 30 subjects had the same disease hospitalized during the same period without accepting stenting were considered as the control group.And the informed consent was signed in both groups.Then,the expression levels of inflammatory cytokine MCP-1 were measured by ELISA before operation,7 days and 6 months after operation in the two groups.Results The contents of MCP-1 in peripheral blood of the stent group were similar to the control group before angiography or catheterization(P＞0.05),but significantly higher than those of the control group 7 days and 6 months after stent insertion(P＜0.01).Among 50 patients of the stent group,16 cases had restenosis 6 months after operation confirmed by imaging examination(32%),the contents of serum MCP-1 of the patients were similar to those without restenosis in stages before angiography or catheterization and 7 days after stent insertion (P＞0.05),but significantly higher than that of the cases without restenosis 6 months after stent insertion(P＜0.01).Conclusion The increase of the expression of MCP-1 in plasma may involve in the local and systematic acute inflammatory reaction due to cerebral stent implantation,and the high expression level of MCP-1 in the follow-up period is the risk factor of poststent restenosis.

Endovascular stent;Inflammatory reaction;Perioperative period;Follow-up;MCP-1

R687.3；R687.4

A

1674-0742（2014）11（a）－0001-03

2014-08-02)

韓冰莎（1982-），女，河南平頂山人，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)介入。

李天曉（1962.7-），男，河南郟縣人，博士，主任醫(yī)師，研究方向：神經(jīng)介入。