血細(xì)胞分析儀自動(dòng)全血和預(yù)稀釋模式的結(jié)果分析

張憲華

[摘要] 目的 分析血細(xì)胞分析儀自動(dòng)全血和預(yù)稀釋模式的結(jié)果。 方法 在邁瑞B(yǎng)C-5600全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀上對(duì)全血質(zhì)控物用自動(dòng)全血和預(yù)稀釋兩種模式同時(shí)各行30次檢測(cè)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 自動(dòng)全血和預(yù)稀釋模式白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細(xì)胞比容（HCT）、血小板（PLT）的結(jié)果和它們的變異系數(shù)（CV）分別為（7.3±0.07，0.97；4.97±0.03，0.60；130.0±0.91，0.70；41.2±0.26，0.63；228.4±3.23，1.41和8.0±0.35，4.38；4.13±0.19，4.60；124.2±5.98，4.81；38.6±1.80，4.66；230.1±9.21，4.00。對(duì)應(yīng)項(xiàng)目的t值和P值分別為10.74，<0.01；7.57，<0.01；5.43，<0.01；7.83，<0.01；0.95，>0.05。 結(jié)論 采用自動(dòng)全血模式檢測(cè)結(jié)果比預(yù)稀釋模式的變異系數(shù)小，精密度高，重復(fù)性好。

[關(guān)鍵詞] 血細(xì)胞分析儀；自動(dòng)全血模式；預(yù)稀釋模式

[中圖分類(lèi)號(hào)] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2014）06-0074-03

眾所周知，隨著當(dāng)前醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)的不斷發(fā)展，醫(yī)療診療設(shè)備不斷進(jìn)入醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)。檢驗(yàn)設(shè)備更是日新月異，尤其是大型全自動(dòng)檢驗(yàn)設(shè)備的投入，更大大提高了工作效率，節(jié)省了患者就診時(shí)間，降低了勞動(dòng)強(qiáng)度，節(jié)省了人力資源；同時(shí)也降低了人為誤差，提高了準(zhǔn)確度。全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀作為醫(yī)院患者的三大常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目之一的檢測(cè)設(shè)備，更是在醫(yī)院得到廣泛應(yīng)用[1]。自動(dòng)全血模式和預(yù)稀釋模式是全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀常用的兩種檢測(cè)模式，為了了解兩種模式在邁瑞B(yǎng)C-5600全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀上的檢測(cè)性能，2013年10月我們將血細(xì)胞分析儀專用質(zhì)控物（光學(xué)法）用這兩種檢測(cè)模式各進(jìn)行30次檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器、材料與方法

1.1 儀器及試劑

邁瑞B(yǎng)C-5600全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，中國(guó)深圳邁瑞公司產(chǎn)品，該儀器具有自動(dòng)全血和預(yù)稀釋模式，全部使用原裝配套的稀釋液、溶血?jiǎng)⑶逑匆?、校?zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.2 材料

1.2.1 血細(xì)胞分析儀用質(zhì)控物（光學(xué)法）水平中值 3.0mL；型號(hào)：BC-SD；P/N：040-00/426-00.LOT.BC309AN.2013-11-05；深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司MINDRAY，BC.5600。

1.2.2 自動(dòng)全血模式樣本 血細(xì)胞分析儀用質(zhì)控物（光學(xué)法）水平中值：從冰箱取出，恢復(fù)室溫，混勻后上機(jī)自動(dòng)檢測(cè)。

1.2.3 預(yù)稀釋模式樣本 40 μL的血細(xì)胞分析儀用質(zhì)控物和120 μL的稀釋液混合均勻，即配成預(yù)稀釋模式樣本。

1.3 方法

1.3.1 檢測(cè)方法 按儀器操作說(shuō)明[2]，調(diào)整校對(duì)好BC-5600全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，在這兩種檢測(cè)模式下對(duì)兩種模式樣本各進(jìn)行30次檢測(cè)。

1.3.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)兩種模式實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)[白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細(xì)胞比容（HCT）、血小板（PLT）的結(jié)果]進(jìn)行處理，結(jié)果用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

邁瑞B(yǎng)C-SD血液細(xì)胞質(zhì)控物在BC-5600全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的兩種模式各30次的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。對(duì)比兩種檢測(cè)模式的結(jié)果不難看出自動(dòng)全血模式下的各項(xiàng)目精密度優(yōu)于預(yù)稀釋模式。兩種模式白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細(xì)胞比容（HCT）差異極為顯著，而血小板（PLT）的結(jié)果無(wú)差異。

3 討論

血細(xì)胞檢測(cè)作為醫(yī)院就診者的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，對(duì)就診人員是否存在出血、炎癥、感染、貧血和血液系統(tǒng)疾病等提供重要診療信息[3-7]。尤其對(duì)那些以傳染病、肝膽病患者為主的?？菩葬t(yī)療機(jī)構(gòu)，血細(xì)胞檢測(cè)在細(xì)菌/病毒感染、脾功能亢進(jìn)、消化道出血患者的診療以及抗病毒藥物治療過(guò)程中更加重要[8-10]。

血細(xì)胞分析儀自從20世紀(jì)50年代，庫(kù)爾特（Coulter WH）根據(jù)血細(xì)胞是不良導(dǎo)體的特性，在電解質(zhì)溶液中懸浮細(xì)胞顆粒在通過(guò)計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起電阻變化，再經(jīng)儀器放大、甄別、整形、計(jì)數(shù)，生產(chǎn)出第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀后，開(kāi)創(chuàng)了血細(xì)胞計(jì)數(shù)的新篇章，實(shí)現(xiàn)了血細(xì)胞計(jì)數(shù)的自動(dòng)化。目前，隨著科技的不斷發(fā)展，血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在庫(kù)爾特原理基礎(chǔ)上有了新的飛躍。血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀也由半自動(dòng)到全自動(dòng)，三分類(lèi)發(fā)展到五分類(lèi)；儀器的設(shè)計(jì)更加精密、嚴(yán)謹(jǐn)，功能更加完善，分析方法也不斷更新?lián)Q代。全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀BC-5600應(yīng)用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)獲得白細(xì)胞總數(shù)和五類(lèi)白細(xì)胞的分類(lèi)統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)；血紅蛋白濃度采用比色法；紅細(xì)胞和血小板數(shù)目以及體積分布用電阻抗法檢測(cè)；其余參數(shù)由分析儀計(jì)算得出。

由表1不難看出，自動(dòng)全血模式結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)較預(yù)稀釋模式的小，其結(jié)果的精準(zhǔn)度也就更可靠[11]。自動(dòng)全血模式的重復(fù)性、精密度之所以較預(yù)稀釋模式的好，是由于自動(dòng)全血模式的檢測(cè)全程基本都在封閉的環(huán)境中進(jìn)行，既沒(méi)有人工操作的參與，也不受外界環(huán)境影響，更沒(méi)有交叉污染的干擾；再加現(xiàn)代儀器的做工精良、考究、嚴(yán)謹(jǐn)，使得儀器在檢測(cè)過(guò)程中的吸樣和稀釋兩步固有誤差降低，并可通過(guò)質(zhì)控品和校準(zhǔn)品進(jìn)行校正和修正。而預(yù)稀釋模式下，從預(yù)稀釋液的準(zhǔn)備及末梢血樣本的采集、吸取、混勻到放置后混勻上機(jī)檢測(cè)，整個(gè)過(guò)程都在外環(huán)境中暴露，是開(kāi)放性的；此過(guò)程中，稀釋液采集的精準(zhǔn)、人工末梢血采集時(shí)的污染、采血微量管的偏差、吸取末梢血及混勻操作的差異、還有試劑水分蒸發(fā)和空氣中顆粒污染等隨機(jī)誤差很難消除，因而對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成偏差，影響準(zhǔn)確性。

從本文可知外周血誤差大、重復(fù)性差，因此做血細(xì)胞分析時(shí)盡量按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》要求采用抗凝靜脈血，而少用外周末梢血。并按國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)的要求用乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝，且含量為每毫升血液用1.5～2.2 mg抗凝劑[4]。要嚴(yán)格控制血液與抗凝劑的比例，不能過(guò)高或過(guò)低，否則影響血細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。對(duì)于極個(gè)別因使用EDTA-K2抗凝造成血小板偏低者，可換成枸櫞酸鹽或在EDTA-K2抗凝血中加入肝磷脂[12]。另外，使用抗凝靜脈血不僅防止了交叉污染，延長(zhǎng)了儀器壽命，還能滿足原標(biāo)本的復(fù)檢和正確反映患者外周血的實(shí)際情況。但BC-5600預(yù)稀釋模式的稀釋樣品僅可以計(jì)數(shù)1次，對(duì)超出儀器檢測(cè)能力或異常的樣本仍需要再次采集血液，增加患者的痛苦。endprint

為了確保結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，在使用血液細(xì)胞分析儀時(shí)應(yīng)注意如下幾點(diǎn)：①工作人員上機(jī)前要熟讀儀器和試劑說(shuō)明書(shū)，掌握原理并嚴(yán)格按程序操作，并使用原廠配套試劑[4，13]。②用EDTA-K2真空采血管采集靜脈血，并立即顛倒混勻；抗凝血采集后在室溫中不應(yīng)超過(guò)6 h；如需制作血涂片應(yīng)在2 h內(nèi)完成。③檢測(cè)前必須將樣本充分混勻。④標(biāo)本上機(jī)前應(yīng)仔細(xì)檢查標(biāo)本量和有無(wú)凝塊[6]。⑤對(duì)于血細(xì)胞分析儀結(jié)果異常樣本應(yīng)推片染色顯微鏡下鏡檢，當(dāng)然，對(duì)于嬰幼兒等特殊患者，可采用末梢血檢測(cè)，而檢測(cè)結(jié)果需校正后方可發(fā)出報(bào)告。

總之，自動(dòng)全血模式檢測(cè)具有良好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性，優(yōu)于預(yù)稀釋模式，建議推廣，各級(jí)醫(yī)療單位可根據(jù)實(shí)際情況合理選擇。

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[13] 熊立凡，劉成玉. 臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M]. 第4版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：115.

（收稿日期：2013-12-11）endprint

為了確保結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，在使用血液細(xì)胞分析儀時(shí)應(yīng)注意如下幾點(diǎn)：①工作人員上機(jī)前要熟讀儀器和試劑說(shuō)明書(shū)，掌握原理并嚴(yán)格按程序操作，并使用原廠配套試劑[4，13]。②用EDTA-K2真空采血管采集靜脈血，并立即顛倒混勻；抗凝血采集后在室溫中不應(yīng)超過(guò)6 h；如需制作血涂片應(yīng)在2 h內(nèi)完成。③檢測(cè)前必須將樣本充分混勻。④標(biāo)本上機(jī)前應(yīng)仔細(xì)檢查標(biāo)本量和有無(wú)凝塊[6]。⑤對(duì)于血細(xì)胞分析儀結(jié)果異常樣本應(yīng)推片染色顯微鏡下鏡檢，當(dāng)然，對(duì)于嬰幼兒等特殊患者，可采用末梢血檢測(cè)，而檢測(cè)結(jié)果需校正后方可發(fā)出報(bào)告。

總之，自動(dòng)全血模式檢測(cè)具有良好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性，優(yōu)于預(yù)稀釋模式，建議推廣，各級(jí)醫(yī)療單位可根據(jù)實(shí)際情況合理選擇。

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為了確保結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，在使用血液細(xì)胞分析儀時(shí)應(yīng)注意如下幾點(diǎn)：①工作人員上機(jī)前要熟讀儀器和試劑說(shuō)明書(shū)，掌握原理并嚴(yán)格按程序操作，并使用原廠配套試劑[4，13]。②用EDTA-K2真空采血管采集靜脈血，并立即顛倒混勻；抗凝血采集后在室溫中不應(yīng)超過(guò)6 h；如需制作血涂片應(yīng)在2 h內(nèi)完成。③檢測(cè)前必須將樣本充分混勻。④標(biāo)本上機(jī)前應(yīng)仔細(xì)檢查標(biāo)本量和有無(wú)凝塊[6]。⑤對(duì)于血細(xì)胞分析儀結(jié)果異常樣本應(yīng)推片染色顯微鏡下鏡檢，當(dāng)然，對(duì)于嬰幼兒等特殊患者，可采用末梢血檢測(cè)，而檢測(cè)結(jié)果需校正后方可發(fā)出報(bào)告。

總之，自動(dòng)全血模式檢測(cè)具有良好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性，優(yōu)于預(yù)稀釋模式，建議推廣，各級(jí)醫(yī)療單位可根據(jù)實(shí)際情況合理選擇。

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