乙肝病毒抗原抗體與HBV—DNA的臨床研究

張業(yè)霞　金玉懷

[摘要] 目的 探討前S1抗原、前S1抗體、前S2抗原、前S2抗體、HBV五項指標(biāo)和DNA及肝功之間的相互關(guān)系及意義。 方法 對急性和慢性乙肝患者各30例的初診及3個月、6個月血清中的HBV上述指標(biāo)聯(lián)合檢測。 結(jié)果 在急性乙肝早期，前S1抗原、前S2抗原、HBsAg、HBeAg的檢測與DNA檢測高度一致，但在晚期DNA仍是最佳檢測手段，其他單一指標(biāo)的陽性率均低于DNA檢測。在慢性乙肝的不同時期，前S1抗原與DNA檢測高度一致，其余各項檢測方法均未達(dá)到理想的效果。 結(jié)論 在急性乙肝早期，前S1抗原、前S2抗原、HBsAg、HBeAg的檢測可作為DNA檢測的替代方法，但在晚期仍要依靠DNA的檢測，在慢性乙肝的不同時期，前S1抗原與DNA檢測高度一致，在一定程度上可替代DNA，但為避免漏診，需綜合考慮多項指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] HBV-DNA；前S1抗原與抗體；前S2抗原與抗體

[中圖分類號] R512.6+2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）06-0048-03

HBV感染呈全世界流行，我國是高發(fā)區(qū)，HBV感染者約有9300萬，危害極大[1]。HBV傳統(tǒng)方法的檢測主要依靠HBV五項指標(biāo)來判斷感染情況，而近幾年國內(nèi)外對前S1抗原和抗體及前S2抗原和抗體的研究進(jìn)展較快，目前認(rèn)為前S1和前S2蛋白在HBV附著和入侵肝細(xì)胞的機(jī)制中起著重要作用，可作為HBV復(fù)制的標(biāo)志物[2，3]。在乙肝檢測的眾多資料中，多項指標(biāo)的聯(lián)合檢測報道并不多，尤其是缺乏這方面的縱向觀察。本研究通過對HBV前S1抗原與抗體、前S2抗原與抗體、HBV五項指標(biāo)及HBV-DNA和患者ALT的聯(lián)合檢測，對其結(jié)果進(jìn)行分析比較，探討前S1抗原和抗體、前S2抗原和抗體、HBV五項指標(biāo)和DNA及肝功能在同一批患者中不同病期的發(fā)展變化及臨床意義，這將對臨床正確選擇乙肝病毒的檢測指標(biāo)和判斷患者病情具有重要參考價值。

1 材料與方法

1.1 材料

收集我市某醫(yī)院2010～2011年傳染科門診及住院病房乙肝患者血清標(biāo)本共60例（急性30例，慢性30例），其中，急性乙肝男18例，女12例，平均年齡38歲，慢性乙肝男16例，女14例，平均年齡41歲。分別檢測其HBV-DNA、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、前S1抗原和抗體（PreS1Ag、PreS1Ab）、前S2抗原和抗體（PreS2Ag、PreS2Ab）和ALT，在此過程中記錄每個患者的具體住址和聯(lián)系方式，并依次跟蹤檢測兩次，時間間隔為3個月，觀察患者各項指標(biāo)的變化；HBV-DNA核酸定量（PCR-熒光探針法）檢測試劑盒購自達(dá)安基因股份有限公司（中山大學(xué)），HBV前S1、前S2抗原的診斷試劑盒購自北京貝爾生物工程有限公司，HBV前S1抗體的診斷試劑盒購自上海阿爾法生物技術(shù)有限公司，HBV前S2抗體的診斷試劑盒購自北京肝炎試劑研制中心，HBV五項指標(biāo)的診斷試劑盒購自維坊三維生物工程有限公司。FaxStat 2100酶標(biāo)分析儀購自美國倍肯公司；PCR儀由德國Roche公司提供。

1.2 方法

用ELISA法檢測HBV五項指標(biāo)、前S1及前S2的抗原和抗體；HBV-DNA采用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）；用全自動生化分析儀檢測患者肝功ALT，所有操作均嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS13.0軟件對上述檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，用配對χ2檢驗比較其陽性率，P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 急性乙肝檢測結(jié)果

第一次檢測中，HBV-DNA、PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg及HBeAg的陽性率均為100%，幾項指標(biāo)完全一致。第二次檢測中，PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg和HBeAg的陽性率分別是30.0%、36.7%、50.0%和13.3%，而此時DNA陽性率為93.3%，與DNA檢測相比，均有顯著差異。第三次檢測中，DNA陽性率為30.0%，而后四項抗原其陽性率分別為3.3%、6.7%、23.3%和6.7%，此時PreS1Ag、PreS2Ag和HBeAg的陽性率與DNA陽性率之間差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1、2。

2.2 慢性乙肝檢測結(jié)果

慢性乙肝第一次檢測中，DNA的陽性率為73.3%，PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg、HBeAg陽性率分別為90.0%、93.3%、100%、60.0%，PreS1Ag、HBeAg與DNA陽性率之間均無統(tǒng)計學(xué)差異；第二次檢測結(jié)果中，DNA陽性率下降為63.3%，此時后四項抗原其陽性率分別下降為73.3%、63.3%、86.7%及33.3%，PreS1Ag、PreS2Ag與DNA陽性率之間均無統(tǒng)計學(xué)差異，但HBsAg、HBeAg與DNA陽性率之間有統(tǒng)計學(xué)差異；第三次檢測中，DNA陽性率下降為40.0%，后四項抗原的陽性率亦均下降，其結(jié)果分別為33.3%、26.7%、76.7%和13.3%，PreS1Ag、PreS2Ag與DNA陽性率之間，無統(tǒng)計學(xué)差異，但是HBsAg、HBeAg與DNA陽性率之間，有統(tǒng)計學(xué)差異。見表3、4。

3 討論

HBV是一種嗜肝DNA病毒，它在1970年由Dane在患者的血清中首次發(fā)現(xiàn)，并有三種存在形式：大球形顆粒、小球形顆粒和管形顆粒[4]。本研究通過對30例急性和30例慢性乙肝患者初診及3個月和6個月血清標(biāo)本中的HBV PreS1Ag與PreS1Ab、PreS2Ag與PreS2Ab、HBV五項指標(biāo)及HBV-DNA和ALT進(jìn)行聯(lián)合檢測，進(jìn)而探討這些指標(biāo)在同一批患者不同發(fā)病過程中的變化及其臨床參考價值。

在急性乙肝的共三次檢測結(jié)果中，本研究做了大三陽和小三陽的合并陽性率與DNA陽性率的比較分析（表2）。結(jié)果顯示，在第一次檢測中，大三陽和小三陽的五項指標(biāo)與DNA檢測一致率為100%，但在第二次及第三次檢測結(jié)果中，二者均有統(tǒng)計學(xué)差異。表明隨著疾病的進(jìn)展和病程的延長，DNA的檢測要比大、小三陽的檢測更有意義。這與臨床結(jié)果報道一致，再次證實了DNA檢測是判斷病毒復(fù)制的金標(biāo)準(zhǔn)。endprint

慢性乙肝病期較長，患者臨床癥狀輕重不等，可以反復(fù)發(fā)作，遷延不愈。有文獻(xiàn)報道，認(rèn)為PreS1Ag此項指標(biāo)反映病毒復(fù)制更加敏感，是識別慢性乙肝患者發(fā)生前C區(qū)變異后抗HBe陽性但仍存在病毒復(fù)制特別有價值的指標(biāo)，并對指導(dǎo)抗病毒治療有重要的臨床意義[11，12]。在本研究中，慢性乙肝患者的不同時期，PreS1Ag陽性率均與HBV-DNA檢測結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異，可一定程度上用于判斷患者體內(nèi)病毒復(fù)制情況，這與臨床報道結(jié)果一致。但其余幾項檢測指標(biāo)均未表現(xiàn)出非常突出的優(yōu)勢，而是呈現(xiàn)出一定的變化，因此對慢性乙肝患者需綜合釆用多項檢測指標(biāo)以免漏診，并能準(zhǔn)確掌握患者病情。

綜上所述，在急性乙肝早期，HBV-DNA的檢測是判斷病毒復(fù)制及患者傳染性最可靠的依據(jù)，PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg、HBeAg在此階段與DNA檢測高度一致，因此在無條件開展DNA檢測的基層醫(yī)院可作為DNA檢測的替代方法。在晚期階段，HBV-DNA的檢測仍然是陽性率最高的檢測手段，但是HBV其他血清學(xué)檢測指標(biāo)，單一指標(biāo)的陽性率均低于DNA檢測，因此，為準(zhǔn)確判斷患者體內(nèi)病毒復(fù)制和預(yù)后等情況，需多項指標(biāo)綜合考慮更為適宜。在慢性乙肝患者的不同時期，PreS1Ag與DNA檢測高度一致，其余各項檢測方法均未達(dá)到理想的效果，因此亦需全面釆用多項檢測指標(biāo)，從而避免漏診的出現(xiàn)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 李筠竹，張振華，張亞飛，等. 慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平與HBsAg和HBeAg水平的相關(guān)性分析[J]. 實用肝臟病雜志，2012，15（3）：220-222.

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慢性乙肝病期較長，患者臨床癥狀輕重不等，可以反復(fù)發(fā)作，遷延不愈。有文獻(xiàn)報道，認(rèn)為PreS1Ag此項指標(biāo)反映病毒復(fù)制更加敏感，是識別慢性乙肝患者發(fā)生前C區(qū)變異后抗HBe陽性但仍存在病毒復(fù)制特別有價值的指標(biāo)，并對指導(dǎo)抗病毒治療有重要的臨床意義[11，12]。在本研究中，慢性乙肝患者的不同時期，PreS1Ag陽性率均與HBV-DNA檢測結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異，可一定程度上用于判斷患者體內(nèi)病毒復(fù)制情況，這與臨床報道結(jié)果一致。但其余幾項檢測指標(biāo)均未表現(xiàn)出非常突出的優(yōu)勢，而是呈現(xiàn)出一定的變化，因此對慢性乙肝患者需綜合釆用多項檢測指標(biāo)以免漏診，并能準(zhǔn)確掌握患者病情。

綜上所述，在急性乙肝早期，HBV-DNA的檢測是判斷病毒復(fù)制及患者傳染性最可靠的依據(jù)，PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg、HBeAg在此階段與DNA檢測高度一致，因此在無條件開展DNA檢測的基層醫(yī)院可作為DNA檢測的替代方法。在晚期階段，HBV-DNA的檢測仍然是陽性率最高的檢測手段，但是HBV其他血清學(xué)檢測指標(biāo)，單一指標(biāo)的陽性率均低于DNA檢測，因此，為準(zhǔn)確判斷患者體內(nèi)病毒復(fù)制和預(yù)后等情況，需多項指標(biāo)綜合考慮更為適宜。在慢性乙肝患者的不同時期，PreS1Ag與DNA檢測高度一致，其余各項檢測方法均未達(dá)到理想的效果，因此亦需全面釆用多項檢測指標(biāo)，從而避免漏診的出現(xiàn)。

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慢性乙肝病期較長，患者臨床癥狀輕重不等，可以反復(fù)發(fā)作，遷延不愈。有文獻(xiàn)報道，認(rèn)為PreS1Ag此項指標(biāo)反映病毒復(fù)制更加敏感，是識別慢性乙肝患者發(fā)生前C區(qū)變異后抗HBe陽性但仍存在病毒復(fù)制特別有價值的指標(biāo)，并對指導(dǎo)抗病毒治療有重要的臨床意義[11，12]。在本研究中，慢性乙肝患者的不同時期，PreS1Ag陽性率均與HBV-DNA檢測結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異，可一定程度上用于判斷患者體內(nèi)病毒復(fù)制情況，這與臨床報道結(jié)果一致。但其余幾項檢測指標(biāo)均未表現(xiàn)出非常突出的優(yōu)勢，而是呈現(xiàn)出一定的變化，因此對慢性乙肝患者需綜合釆用多項檢測指標(biāo)以免漏診，并能準(zhǔn)確掌握患者病情。

綜上所述，在急性乙肝早期，HBV-DNA的檢測是判斷病毒復(fù)制及患者傳染性最可靠的依據(jù)，PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg、HBeAg在此階段與DNA檢測高度一致，因此在無條件開展DNA檢測的基層醫(yī)院可作為DNA檢測的替代方法。在晚期階段，HBV-DNA的檢測仍然是陽性率最高的檢測手段，但是HBV其他血清學(xué)檢測指標(biāo)，單一指標(biāo)的陽性率均低于DNA檢測，因此，為準(zhǔn)確判斷患者體內(nèi)病毒復(fù)制和預(yù)后等情況，需多項指標(biāo)綜合考慮更為適宜。在慢性乙肝患者的不同時期，PreS1Ag與DNA檢測高度一致，其余各項檢測方法均未達(dá)到理想的效果，因此亦需全面釆用多項檢測指標(biāo)，從而避免漏診的出現(xiàn)。

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