重樓地上部分化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展

陳美紅，梁夢(mèng)園，聞曉東，楊 杰

(中國(guó)藥科大學(xué) 天然藥物活性組分與藥效國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 211198)

重樓是百合科(Liliaceae)重樓屬(Paris)植物的總稱，藥用歷史悠久，以蚤休之名首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，《滇南本草》中首次以重樓作為正式藥名記載[1]。重樓屬植物是一類極具有藥用價(jià)值的植物，全世界共有24種，我國(guó)擁有19種，其資源以西南各省區(qū)(云南、四川、貴州)最為豐富[1]。歷版中國(guó)藥典均收載云南(滇)重樓[ParispolyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.) Hand.-Mazz.]和七葉一枝花[ParispolyphyllaSmith var.chinensis(Franch.) Hara]作為重樓的基源植物[2]。作為中國(guó)常用的傳統(tǒng)中藥材，重樓一直以根莖入藥，具有清熱解毒，消腫止痛和涼肝定驚的功效，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中，將重樓用于癌癥腫瘤、腮腺炎、慢性氣管炎、流行性乙型腦炎等疾病的治療[3]。重樓療效確切，藥用價(jià)值高，是云南白藥、宮血寧膠囊、季德勝蛇藥片等中成藥產(chǎn)品的主要原料。目前市場(chǎng)上以野生資源為主，然而重樓的生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，一般從種子萌發(fā)到可收獲利用至少需要6～7年，全國(guó)野生品的年采收量?jī)H在1 000 t左右，而重樓作為中成藥產(chǎn)品的主要原料，每年的消耗量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了其年生長(zhǎng)量，從而導(dǎo)致貨緊價(jià)揚(yáng)[4]。重樓價(jià)格已由20世紀(jì)七八十年代20～30元/kg暴漲至現(xiàn)今800～1 000元/kg[5]。再加上近年來我國(guó)大部分地區(qū)的野生重樓遭到過度采挖，導(dǎo)致其野生自然資源的急劇減少，正面臨枯竭。但重樓的每年都可再生的地上部分一直被認(rèn)為是非藥用部位而被丟棄，重樓莖葉生長(zhǎng)速度快，每年的生長(zhǎng)量相當(dāng)于同年根生長(zhǎng)量的7～8倍，至今未被開發(fā)利用，造成巨大的資源浪費(fèi)。為了充分利用該丟棄的植物資源，已有不少學(xué)者對(duì)重樓的地上部位開展了物質(zhì)基礎(chǔ)研究，認(rèn)為重樓地上部分可以作為重樓藥用資源開發(fā)的一個(gè)方向。本文對(duì)近年來有關(guān)重樓地上部分的化學(xué)成分以及藥理活性的進(jìn)展作如下綜述，以闡述重樓地上部分開發(fā)利用的價(jià)值。

1 化學(xué)成分

重樓屬化學(xué)成分的研究可追溯到1938年，Dutt從四葉重樓ParisquadrifoliaL.中分得paride和paristyphnin兩個(gè)化合物(結(jié)構(gòu)未定)[1]。到60年代初期，昆明植物所黃偉光從重樓屬植物中分離鑒定了薯蕷皂苷元(diosgenin)和偏諾皂苷元(pennogenin)[6]。此后，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)重樓屬植物的化學(xué)成分進(jìn)行深入研究報(bào)道，從中分離鑒定出甾體皂苷類、C21甾體化合物、膽甾烷醇類、植物甾醇類、三萜類、黃酮類、脂肪酸類、植物蛻皮激素類、多糖、氨基酸類和微量元素等多種化學(xué)成分[7]。其中，甾體皂苷是主要的活性成分，從1962年到2016年，已從該屬植物中分離鑒定出160個(gè)甾體皂苷[8]，約占總化合物的80%。其苷元主要為異螺甾烷醇類的薯蕷皂苷元及偏諾皂苷元。

由于重樓傳統(tǒng)以根莖入藥，所以大部分關(guān)于重樓屬化學(xué)成分的研究報(bào)道局限于根莖部位。為了充分利用植物資源，也有不少學(xué)者對(duì)重樓的地上部位開展了物質(zhì)基礎(chǔ)研究。自20世紀(jì)80年代中期，中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所的李恒、陳昌祥等開始研究滇重樓莖葉，并從中提取皂苷及其它活性成分。到20世紀(jì)90年代早期，陳昌祥等[9-13]從滇重樓的地上部位(種子、葉、莖)中分離鑒定了2個(gè)皂苷元，8個(gè)甾體皂苷和兩個(gè)山奈酚黃酮苷。Qin等[14-16]對(duì)滇重樓的莖葉開展了進(jìn)一步的物質(zhì)基礎(chǔ)研究，先后從滇重樓莖葉中分離得到53個(gè)化合物，其中甾體皂苷41個(gè)，新化合物20個(gè)(Chonglouoside SL-1-SL-20)。Sun等[17]從北重樓(ParisverticillataM.-Bieb.)地上部位中分離得到15個(gè)甾體皂苷，其中有4個(gè)新化合物(parisverticosides A-D)。尹偉等[18]從七葉一枝花地上部位共分離純化得到10個(gè)化合物，包括4個(gè)植物甾醇類，4個(gè)黃酮類，2個(gè)植物蛻皮激素類。 至此，從滇重樓、北重樓和七葉一枝花這三種重樓屬植物的地上部位中共分離鑒定了82個(gè)化合物，其中甾體皂苷占54個(gè)。重樓地上部位所含的化學(xué)成分類別與重樓的根莖相似，包括甾體皂苷類、C21甾體化合物、膽甾烷醇類、植物甾醇類、黃酮類、植物蛻皮激素類、三萜類、多糖等。

1.1 甾體皂苷

甾體皂苷是一類由帶螺甾邊鏈的甾體苷元與糖的端基上碳羥基脫水而成的化合物，廣泛存在于重樓屬植物中，是其主要的活性成分。甾體皂苷元按C25的構(gòu)型和F環(huán)的環(huán)合狀態(tài)可分為異螺甾烷醇型(isospirostanols)，C25為R構(gòu)型；螺甾烷醇型(spirostanols)，C25為S構(gòu)型；呋甾烷醇型(furostanols)，F(xiàn)環(huán)為開鏈衍生物；及變型螺甾烷醇型(pseudo-spirostanols)，F(xiàn)環(huán)為五元四氫呋喃環(huán)[1](圖1)。這4種類型甾體皂苷在重樓屬地上部位均存在，其中異螺甾烷醇類化合物最多。

1.1.1 異螺甾烷醇型

目前重樓屬地上部位分離得到了28個(gè)異螺甾烷醇型化合物。苷元多為薯蕷皂苷元、偏諾皂苷元，除此之外還有27-羥基-偏諾皂苷元和27,23β-二羥基-偏諾皂苷元、7β-乙氧基薯蕷皂苷元、23α,27-二羥基薯蕷皂苷元、27-羥基魯斯可皂苷元等甾體苷元。一般在5(6)雙鍵，3、7、23、24、27位有羥基取代。糖部分有D-葡萄糖、L-鼠李糖，還有少量的D-木糖。糖基與苷元C3-OH成苷，少數(shù)與C1-OH、C23-OH、C27-OH成苷。主要有重樓皂苷II、重樓皂苷V、重樓皂苷VI、重樓皂苷VII等活性成分。

1.1.2 螺甾烷醇型

Sun等[17]從北重樓地上部位中分離得到的parisverticoside A (23S,24S,25S)-螺甾-5-烯-1β,3β,23,24-四醇-1-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1 → 2)-[ β-D-木吡喃糖基(1 → 3)]- β-D-葡萄吡喃糖苷是C25為S構(gòu)型的螺甾烷醇型化合物。陳昌祥[13]、Qin等[14]從滇重樓莖葉中分離得到3個(gè)螺甾烷醇型化合物，其甾體苷元均是25S-異紐替皂苷元(isonautigenin)。

1.1.3 呋甾烷醇型

重樓地上部位目前共分離得到10個(gè)呋甾烷醇型化合物。苷元除在C3-OH成苷外，也在C26-OH與葡萄糖成苷，在3,7,17,26位有羥基取代。

1.1.4 變型螺甾烷醇型

重樓地上部位目前有12個(gè)變型螺甾烷醇型化合物被分離鑒定出來。其苷元均為紐替皂苷元(nautigenin)，都是從滇重樓莖葉中分離得到的。這類化合物也是重樓屬地上部位所特有的成分，目前沒有從重樓根莖中分離得到過。這類紐替皂苷元在3,7,17,26位有羥基取代，苷元除在C3-OH成苷外，也在C26-OH與葡萄糖成苷。且研究表明，Qin等從滇重樓的莖葉中分離得到的紐替皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)- β-D-葡萄吡喃糖苷和Abutiloside L這兩種螺甾烷醇型化合物有強(qiáng)烈的抗腫瘤細(xì)胞HepG2和HEK293的活性。

圖1 重樓地上部位甾體皂常見的苷元結(jié)構(gòu)

1.2 C21甾體化合物

重樓地上部位目前共分離得到6個(gè)C21甾體化合物。Qin等[16]從滇重樓的莖葉中共分離鑒定了5個(gè)C21甾體化合物，包括2個(gè)孕甾烷類皂苷和3個(gè)C22-甾類內(nèi)酯皂苷類化合物。Chonglouoside SL-7、Chonglouoside SL-8、dumoside是重樓屬植物中首次分離得到的C22-甾類內(nèi)酯皂苷類化合物，且Chonglouoside SL-7和dumoside有較好的抗菌活性。北重樓地上部位中也分離得到了1個(gè)C21孕甾烷類皂苷類化合物。

1.3 膽甾烷醇類

Sun等[17]從北重樓地上部位分離得到3個(gè)膽甾烷醇類化合物parisverticoside D、parispseudoside A和parispseudoside C。主要在C3-OH和C26-OH位成苷。

1.4 植物甾醇類

植物甾醇的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、生理活性強(qiáng)，可通過降低膽固醇減少患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。目前從重樓地上部位共分離得到6個(gè)植物甾醇類化合物，七葉一枝花地上部位主要有β-谷甾醇、胡蘿卜苷、麥角甾-7,22-二烯-3-酮和3β,5α,9α-三羥基-麥角甾-7,22-二烯-6-酮[18]；滇重樓莖葉中分離出7α-羥基-豆甾醇-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷和7β-羥基-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷兩個(gè)植物甾醇苷類化合物[16]。

1.5 黃酮類

目前從重樓地上部位提取分離的黃酮類成分有9個(gè)，其主要的結(jié)構(gòu)類型是黃酮及其黃酮醇類，苷元有山奈酚、槲皮素和木犀草素，其中5個(gè)是山奈酚苷類化合物。黃酮類成分多數(shù)具有生物活性。

1.6 植物蛻皮激素

目前僅從七葉一枝花地上部位分離得到β-蛻皮激素和Calonysterone兩個(gè)植物蛻皮激素[18]。

1.7 其它類化合物

除上述成分外，Qin等[16]在滇重樓的莖葉中還分離得到了一個(gè)四環(huán)三萜類化合物，(23Z)-9,19-環(huán)羊毛甾-23-烯-3α,25-二醇；尹偉等[18]從七葉一枝花地上部位分得一個(gè)芳香族化合物，香草醛(Vanillin)；此外還有一些多糖類成分[19]。

2 重樓地下根莖與地上部位化學(xué)成分的比較

研究表明，重樓的地上部分含有與根莖相同或相似的皂苷成分。Qin等[14-16]從滇重樓的莖葉提取分離到薯蕷皂苷元(Diosgenin)、重樓皂苷Ⅰ(parisaponinⅠ)、重樓皂苷Ⅱ(paris saponinⅡ)、重樓皂苷Ⅲ(polyphyllinⅢ)、重樓皂苷Ⅴ(polyphyllinⅤ)、重樓皂苷Ⅵ(polyphyllinⅥ)、重樓皂苷Ⅶ(paris saponinⅦ)、progenin Ⅱ、hypoglaucin H、chonglouside H、polyphyllin A等11種甾體皂苷也存在于滇重樓的根莖部位。Sun等[17]從北重樓地上部位分離得到重樓皂苷Ⅶ(paris saponin Ⅶ)、parispseudoside A、parispseudoside C、saponin Th、dichotomin(proto-Pb)、偏諾皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1 → 4)- α-L-鼠李吡喃糖基(1 →4)- β-D-葡萄吡喃糖苷6種化合物，也曾在重樓屬植物的根莖中分離得到過[20]。同時(shí)，重樓的地上部分也有些特有的甾體皂苷成分，是根莖中沒有的，比如滇重樓地上部位中的紐替皂苷元類皂苷和C22-甾類內(nèi)酯皂苷類化合物。

2015 年版《中國(guó)藥典》規(guī)定[2]，重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量是評(píng)價(jià)重樓藥材品質(zhì)的重要指標(biāo)，且它們均具有較好的藥理活性，因此，有學(xué)者通過檢測(cè)這四種重樓皂苷來評(píng)價(jià)重樓地上部位的藥用開發(fā)價(jià)值。劉佳等[21]通過HPLC對(duì)重樓地上部位(包括果皮、外種皮、葉片、地上莖、種子)的四種重樓皂苷含量的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)不同地上部位的四種重樓皂苷含量的差異比較大，但均含重樓皂苷Ⅶ，其中果皮和外種皮中重樓皂苷Ⅶ的含量較高。接著劉佳等[22]又選取七葉一枝花、華重樓、狹葉重樓和球藥隔重樓，采用HPLC檢測(cè)不同重樓根、莖、葉、果皮、外種皮和種子六個(gè)部位中四種重樓皂苷的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四種重樓的地下根莖中重樓皂苷總含量均高于地上部分，這也在一定意義上說明了重樓傳統(tǒng)以根莖入藥的合理性。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)七葉一枝花果皮中含有較高的重樓皂苷Ⅰ和薯蕷皂苷元，外種皮中的重樓皂苷Ⅶ含量較高；華重樓葉片中的薯蕷皂苷元和皂苷含量較高；球藥隔重樓葉片中有含量較高的重樓皂苷Ⅰ。鄒亮等[23]采用HPLC法分析測(cè)定了不同產(chǎn)地的滇重樓在不同部位中重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量，結(jié)果表明四種不同產(chǎn)地的滇重樓皂苷含量有較大的差異，且在滇重樓不同部位中，以根莖中的4種重樓皂苷的總含量最高，葉僅次之，莖中皂苷的總含量最少。曾衛(wèi)民等[24]以根莖藥材的檢測(cè)指標(biāo)為依據(jù)，對(duì)滇重樓地上莖葉進(jìn)行產(chǎn)量估測(cè)以及有效成分的含量分析，評(píng)價(jià)其綜合利用價(jià)值。采用氣相色譜法測(cè)定云龍、武定和馬關(guān)3個(gè)主產(chǎn)縣的滇重樓莖葉中重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ、PA及 H的含量。結(jié)果表明，地上莖葉的干物質(zhì)產(chǎn)量約能達(dá)到900.0 kg/hm2，其總皂苷含量與地下根莖部位相當(dāng)；初步研究表明，滇重樓地上莖葉含有與地下根莖相似的化學(xué)成分，主要含有重樓皂苷Ⅱ和重樓皂苷Ⅶ，不含重樓皂苷PA和重樓皂苷H；滇重樓地上莖葉是含有各種重樓皂苷的，并且含量上符合藥典要求(重樓皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的總和不低于0.60%)，具有開發(fā)利用的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。馮麗麗等[25]采用超高效液相色譜法(UPLC)對(duì)甾體皂苷在滇重樓根莖、莖葉中的代謝規(guī)律進(jìn)行研究，并建立了UPLC圖譜。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，重樓不同居群根莖、莖、葉UPLC圖譜中只有4個(gè)根莖、莖、葉的共有峰，8個(gè)根莖、葉共有峰，葉比根莖還多5個(gè)色譜峰；重樓同一居群不同植株間UPLC圖譜中有4個(gè)根莖、莖、葉的共有峰，9個(gè)根莖、葉共有峰，葉又比根莖多11個(gè)色譜峰。研究表明滇重樓根莖、莖、葉中的主要活性成分含量和種類都存在較大差異。

3 藥理作用

對(duì)重樓屬植物根莖部位藥理作用的研究比較多，主要有抗腫瘤、抗菌消炎、抗心肌缺血、抗氧化、抗肝纖維化和肝硬化、免疫調(diào)節(jié)、止血、鎮(zhèn)靜止痛、驅(qū)蟲以及調(diào)節(jié)心腦血管等藥理活性[26]。相對(duì)而言，對(duì)重樓地上部位藥理作用的研究較少，目前主要是對(duì)重樓地上部位總提物或單體抗腫瘤、抗氧化、抗菌、止血、鎮(zhèn)痛、抗炎等藥理活性的研究。

3.1 抗腫瘤作用

現(xiàn)代藥理研究表明，重樓屬植物地上部位有抗白血病、肝癌、胃癌、乳腺癌、宮頸癌等腫瘤的作用，其抑制腫瘤細(xì)胞的機(jī)制可能與調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和增殖相關(guān)蛋白的表達(dá)、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)周期等有關(guān)。

3.1.1 抗白血病

王方方等[27]從滇重樓莖葉中分離提取出皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ進(jìn)行抑制白血病細(xì)胞生長(zhǎng)的研究，結(jié)果表明，這四種皂苷均能有效抑制人白血病細(xì)胞的增殖，其中單體皂苷Ⅱ誘導(dǎo)白血病細(xì)胞(K562，HL60細(xì)胞)凋亡的活性較穩(wěn)定且細(xì)胞毒作用較強(qiáng)，并表明滇重樓莖葉皂苷Ⅱ誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能與Bcl-2蛋白低表達(dá)有關(guān)。張華等[28]研究發(fā)現(xiàn)滇重樓莖葉總皂苷能抑制K562白血病細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng)，其機(jī)制可能是抑制K562細(xì)胞中β-catenin mRNA和蛋白水平的表達(dá)，抑制wnt信號(hào)通路，進(jìn)而抑制白血病細(xì)胞增殖，促進(jìn)凋亡。閔沙東等[29]]實(shí)驗(yàn)表明滇重樓莖葉總皂苷可誘導(dǎo)髓系人白血病祖細(xì)胞凋亡。張顏等[30]建立了BALB/C-Nu鼠K562細(xì)胞白血病模型以及BALB/C-Nu鼠K562細(xì)胞移植瘤模型，用于觀察滇重樓莖葉總皂苷抗白血病效應(yīng)。結(jié)果顯示，滇重樓莖葉總皂苷有明顯的體內(nèi)抗腫瘤活性，能抑制荷人白血病裸鼠移植性腫瘤的生長(zhǎng)，125 mg/kg劑量抑瘤率可達(dá)到63.6%。

3.1.2 抗肝癌

許新恒等[31]從滇重樓地上莖葉提取到總皂苷處理肝癌HepG2 細(xì)胞，結(jié)果表明，滇重樓莖葉總皂苷提取物能呈時(shí)間、劑量依賴性地抑制肝癌細(xì)胞的增殖，使細(xì)胞周期阻滯于S期，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Qin等[16]從滇重樓莖葉中分離得到25個(gè)化合物，并研究其對(duì)人癌癥細(xì)胞系HepG2和HEK293的細(xì)胞毒性，發(fā)現(xiàn)其中紐替皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)- β-D-葡萄吡喃糖和abutiloside L兩種化合物有顯著的癌細(xì)胞毒性。

3.1.3 抗胃癌

楊福冬等[32]研究表明滇重樓莖葉總皂苷在一定程度上能夠抑制荷人胃癌裸鼠移植性腫瘤的生長(zhǎng)， 250 mg/kg劑量組抑瘤率高達(dá)83.23%。其機(jī)制可能是通過下調(diào)腫瘤細(xì)胞Bcl-2蛋白的表達(dá)，增加Bax蛋白表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡而發(fā)揮抑瘤作用，也可能與其下調(diào)或阻斷瘤組織中VEGF蛋白表達(dá)有關(guān)。

3.1.4 其它

李菊等[33]在實(shí)驗(yàn)中采用人宮頸癌細(xì)胞株(HeLa)、人乳腺癌細(xì)胞株(MCF-7)和小鼠胃癌細(xì)胞株(MFC)，建立小鼠荷瘤模型，觀察滇重樓地上部分和地下部分總皂苷的抗腫瘤活性。結(jié)果表明，重樓地上和地下部分的總皂苷體外均可呈劑量和時(shí)間依賴性地抑制HeLa、MCF-7 和MFC三種癌細(xì)胞的生長(zhǎng)；同時(shí)，滇重樓地上部分和地下部分總皂苷也能顯著抑制模型小鼠體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)。不過，從體外CCK-8實(shí)驗(yàn)的半數(shù)抑制濃度IC50和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的腫瘤抑制率來看，滇重樓地下根莖部分總皂苷的抗腫瘤活性強(qiáng)于地下部位。

3.2 抗氧化作用

Shen等[19]采用響應(yīng)面法優(yōu)化滇重樓葉中多糖的提取工藝，并分析多糖的體外抗氧化活性。體外抗氧化試驗(yàn)結(jié)果表明，重樓葉多糖對(duì)DPPH 自由基、羥自由基和超氧陰離子均有較明顯的清除效果，最大清除率分別為84.73%、79.04%和76.09%，其IE50分別為0.25 mg /mL、0.31 mg /mL 和0.35 mg /mL。韋蒙等[34]采用響應(yīng)面法優(yōu)化滇重樓莖葉中總皂苷的提取工藝，并研究總皂苷的體外抗氧化活性。結(jié)果表明，重樓莖葉總皂苷對(duì)DPPH 自由基、羥自由基和超氧陰離子也均有較好的清除效果，最大清除率分別為98%、58%和64%，其IC50分別為2.223 mg /mL、6.782 mg /mL和4.638 mg /mL。因此實(shí)驗(yàn)表明，滇重樓地上部位提取到的多糖以及總皂苷類成分均具有較好的體外抗氧化活性。

3.3 抗菌作用

Qin等[14]從滇重樓莖葉中分離得25種甾體皂苷，其中chonglouoside SL-2、 chonglouoside SL-3、chonglouoside SL-6、重樓皂苷A、重樓皂苷V、progeninⅡ、薯蕷皂苷、偏諾皂苷元-3-O-鼠李吡喃糖基(1→4)-鼠李吡喃糖基(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖苷、重樓皂苷Ⅶ、 hypoglaucin H和甲基原薯蕷皂苷這11個(gè)化合物有抗菌活性，其抑制丙酸桿菌的最低抑菌濃度(MIC)分別是 62.5、62.5、3.9、16.5、17.2、7.8、39.0、17.2、31.3、62.5和31.3 μg/mL。Qin等[15]在后續(xù)的研究中又從滇重樓莖葉中分離得到3個(gè)C22-甾類內(nèi)酯糖苷類化合物，其中chonglouoside SL-7和dumoside兩個(gè)化合物有抗痤瘡丙酸桿菌活性，它們的MIC分別為31.3和3.9 μg/mL。

3.4 止血作用

Sun等[17]以70%乙醇提取北重樓的地上部位，并過大孔樹脂柱，硅膠柱以及半制備液相等，最終分離得到15種甾體皂苷，并將大孔樹脂柱75%乙醇流份部位以及分離得到的單體進(jìn)行了誘導(dǎo)血小板聚集的活性研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大孔樹脂柱75%乙醇流份部位1.5 mg/mL濃度時(shí)，血小板最大聚集率達(dá)到53%，而分離得到的15種甾體皂苷中，只有重樓皂苷Ⅶ在300 μg/mL時(shí)，血小板最大聚集率達(dá)到62%，是北重樓地上部位皂苷中主要的止血活性成分。卜偉等[35]研究滇重樓地上部分和地下部分總皂苷對(duì)小鼠尾尖出血時(shí)間的影響，結(jié)果表明地上部分莖葉及果實(shí)中總皂苷同樣具有止血作用，不過其止血作用弱于根莖部位。

3.5 鎮(zhèn)痛 、抗炎作用

止血、鎮(zhèn)痛和抗炎等是滇重樓在中成藥中的主要藥效，重樓地下根莖中的總皂苷是其有效成分。卜偉等[35]從滇重樓地上部分(莖葉、果實(shí))和地下部分提取出總皂苷，并觀察滇重樓不同部位總皂苷對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響以及對(duì)醋酸致小鼠疼痛扭體反應(yīng)的影響，結(jié)果表明地上部分莖葉及果實(shí)同樣具有抗炎和鎮(zhèn)痛的作用，但滇重樓根莖總皂苷的抗炎作用強(qiáng)于地上部位總皂苷的作用，而根莖、莖、葉、果實(shí)總皂苷的鎮(zhèn)痛作用相當(dāng)。說明地上部分與地下部分具有一定的生物功能等效性。

4 結(jié) 語

重樓根莖生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，市場(chǎng)需求量大，導(dǎo)致重樓資源的日益枯竭。而重樓的地上部分為一年生可再生資源，葉中總皂苷含量較高，且有與地下根莖類似的皂苷成分，為了避免資源浪費(fèi)及發(fā)揮巨大藥用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，對(duì)重樓地上部分的開發(fā)利用有著十分重要的意義，已經(jīng)有學(xué)者提出滇重樓地上部分替代根莖入藥的想法。陳昌祥、Qin等研究表明滇重樓地上莖葉含有11個(gè)與地下根莖相同的甾體皂苷類，且其中不少有很好的生物活性，比如重樓皂苷Ⅱ和重樓皂苷Ⅶ。從該類成分的角度分析，重樓地上莖葉可以作為提取單一有效成分的原料，以重樓根莖的補(bǔ)充原料入藥，可有效緩解市場(chǎng)供應(yīng)與需求的矛盾，緩解重樓資源保護(hù)與利用的壓力。但是也有不少研究表明[25]，滇重樓根莖與地上部位的主要活性成分含量及種類差異較大。鑒于中藥的藥效存在多物質(zhì)協(xié)同作用產(chǎn)生特定療效的復(fù)雜性，還需要進(jìn)一步對(duì)重樓地上部分其他成分進(jìn)行深入研究，并且結(jié)合藥效學(xué)方面進(jìn)行系統(tǒng)研究闡明。綜上，重樓地上部分含有與地下根莖相同或相似的甾體皂苷成分，具有可開發(fā)利用的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)，且地上部分資源豐富，產(chǎn)量巨大，具有廣闊的開發(fā)前景。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李恒. 重樓屬植物[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1998.

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S]. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2015.

[3] 謝榮, 肖深根, 于曉英. 重樓植物資源與快繁技術(shù)研究[J]. 硅谷, 2008(11): 3-4.

[4] 張凱強(qiáng), 扶利玫, 張靜全,等. 中藥重樓資源現(xiàn)狀及解決途徑[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2016(15): 94-94.

[5] 尹平孫. 這些藥材市場(chǎng)走貨暢價(jià)格漲[J]. 農(nóng)家之友, 2016(11): 17-17.

[6] 黃偉光, 周俊. 重樓的甾體皂素配基成分研究[J].云南醫(yī)學(xué)雜志, 1962(1): 64-65.

[7] WEI J C, GAO W Y, YAN X D, et al. Chemical constituents of Plants from the genusparis[J]. Chem Biodiv, 2014, 11(9): 1277-1297.

[8] KANG L P, HUANG Y Y, ZHAN Z L, et al. Structural characterization and discrimination of theParispolyphyllavar.yunnanensisandParisvietnamensisbased on metabolite profiling analysis[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2017, 142: 252-267.

[9] 陳昌祥, 周俊, 張玉童,等. 滇重樓地上部分的甾體皂甙[J]. 植物分類與資源學(xué)報(bào), 1990(3): 323-329.

[10] 陳昌祥, 連紅兵, 李運(yùn)昌,等. 滇重樓種子中的甾體皂甙[J]. 植物分類與資源學(xué)報(bào), 1990, 12(4): 102.

[11] 陳昌祥, 周俊. 滇重樓的兩個(gè)新甾體皂甙元[J]. 植物分類與資源學(xué)報(bào), 1992, 14(1): 111-113.

[12] 陳昌祥, Naga. 滇重樓地上部分的兩個(gè)微量皂甙[J]. 植物分類與資源學(xué)報(bào), 1995, 17(2): 215-220.

[13] 陳昌祥, 張玉童, 周俊. 滇重樓地上部分的配糖體[J]. 植物分類與資源學(xué)報(bào), 1995, 17(4): 473-478.

[14] QIN X J, SUN D J, NI W, et al. Steroidal saponins with antimicrobial activity from stems and leaves ofParispolyphyllavar.yunnanensis[J]. Steroids, 2012, 77(12): 1242-1248.

[15] QIN X J, CHEN C X, NI W, et al. C(22)-steroidal lactone glycosides from stems and leaves ofParispolyphyllavar.yunnanensis[J]. Fitoterapia, 2013, 84(1): 248-251.

[16] QIN X J, YU M Y, NI W, et al. Steroidal saponins from stems and leaves ofParispolyphyllavar.yunnanensis[J]. Phytochemistry, 2016, 121: 20-29.

[17] SUN C L, NI W, YAN H, et al. Steroidal saponins with induced platelet aggregation activity from the aerial parts ofParisverticillata[J]. Steroids, 2014, 92: 90-95.

[18] 尹偉, 宋祖榮, 劉金旗,等. 七葉一枝花地上部分化學(xué)成分研究[J]. 中藥材, 2015, 38(9): 1875-1878.

[19] SHEN S, CHEN D, LI X, et al. Optimization of extraction process and antioxidant activity of polysaccharides from leaves ofParispolyphylla[J]. Carbohydrate Polymers, 2014, 104(104): 80-86.

[20] 楊遠(yuǎn)貴, 張霽, 張金渝,等. 重樓屬植物化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J]. 中草藥, 2016, 47(18): 3301-3323.

[21] 劉佳, 張鵬, 宋發(fā)軍,等. 重樓地上部分四種重樓皂苷含量的分析[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2015(5): 1233-1235.

[22] 劉佳, 楊亞利, 張鵬,等. 4種重樓不同部位4種重樓皂苷含量的分析[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2016(16): 44-48.

[23] 鄒亮, 周濃, 張海珠,等. HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地滇重樓中的4種重樓皂苷[J]. 華西藥學(xué)雜志, 2009, 24(5): 521-523.

[24] 曾衛(wèi)民, 趙庭周. ‘滇重樓’地上莖葉可利用性分析[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào), 2012, 28(18): 266-270.

[25] 馮麗麗, 張琳, 李海峰,等. 滇重樓次生代謝產(chǎn)物甾體皂苷活性成分代謝規(guī)律的研究[J]. 中國(guó)藥學(xué)雜志, 2015, 50(8): 664-670.

[26] 鐘月姣, 劉瑩, 于新海,等. 重樓活性成分及藥理作用的研究進(jìn)展[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī), 2016(3): 69-71.

[27] 王方方. 滇重樓莖葉皂甙Ⅱ誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡及其機(jī)制的研究[D]. 昆明:昆明醫(yī)學(xué)院, 2006.

[28] 張華. 滇重樓莖葉總皂苷抑制白血病K562細(xì)胞分子機(jī)制的研究[D]. 昆明:昆明醫(yī)科大學(xué), 2013.

[29] 閔沙東. 滇重樓莖葉總皂甙抗人白血病祖細(xì)胞作用的研究[D]. 昆明:昆明醫(yī)科大學(xué), 2012.

[30] 張顏. 滇重樓莖葉總皂苷抗白血病模型的建立及其藥效學(xué)的研究[D]. 昆明:昆明醫(yī)學(xué)院, 2011.

[31] 許新恒, 康夢(mèng)瑤, 匡坤燕,等. 滇重樓莖葉總皂苷抗肝癌HepG2細(xì)胞活性[J]. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué), 2016, 5(8): 1865-1870.

[32] 楊福冬. 滇重樓莖葉總皂甙抗BGC823胃癌模型藥效學(xué)及機(jī)制研究[D]. 昆明:昆明醫(yī)學(xué)院, 2009.

[33] 李菊, 張榮平, 賀智勇,等. 重樓地上部分與地下部分皂苷的抗腫瘤作用[J]. 昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2016, 37(5): 46-50.

[34] 韋蒙, 許新恒, 李俊龍,等. 滇重樓莖葉總皂苷提取工藝優(yōu)化及其體外抗氧化活性分析[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2015(10): 1794-1800.

[35] 卜偉, 趙君, 沈志強(qiáng),等. 滇重樓地上部分與地下部分總皂苷止血、鎮(zhèn)痛、抗炎作用比較[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2009, 21(b10): 370-372.