Ki-67 和PCNA 表達(dá)與乳腺癌及乳腺癌化療敏感性的關(guān)系

魏 昕 楊舉倫 (遵義醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校病理教研室，遵義 563000)

乳腺癌是最常見(jiàn)的困擾中老年女性的惡性腫瘤之一，臨床流行病學(xué)研究表明乳腺癌已成為歐美國(guó)家發(fā)病率最高的惡性腫瘤。乳腺癌的治療與預(yù)防在于乳腺癌的早期診斷，但是由于其發(fā)病隱匿，早期臨床癥狀不明顯，易被患者和醫(yī)生忽視，確診時(shí)多已為晚期甚至伴有遠(yuǎn)處淋巴轉(zhuǎn)移灶的形成，造成乳腺癌最后保乳手術(shù)率低，低治愈率的結(jié)局［1］。由于乳腺癌部位的特殊性，臨床上乳腺癌治療的主要方式仍為化療或是手術(shù)結(jié)合化療的綜合治療。乳腺癌化療方式目前以蒽環(huán)類化療藥物為主，但是不同患者對(duì)化療敏感性不同［2］，為此，本研究利用我院病例資源，探討分析乳腺癌組織中核增殖相關(guān)抗原(Ki-67)及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)變化與乳腺癌的關(guān)系及其對(duì)乳腺癌化療敏感性的關(guān)系，為臨床乳腺癌的有效化療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對(duì)象為我院近年來(lái)就診的已經(jīng)病理確診的84 例原發(fā)性乳腺癌患者。年齡為21～63 歲，平均年齡為(41.2 ±1.4)歲;所有患者均經(jīng)過(guò)臨床確診，且無(wú)其他心血管或神經(jīng)系統(tǒng)等嚴(yán)重疾患，病理診斷及臨床分期參考2010 年中國(guó)版乳腺癌NCCN 指南［3］。

1.2 化療方案 所有患者均為首次確診，且無(wú)惡性腫瘤病史。所選患者化療CEF 方案共48 例:第1、8 天環(huán)磷酰胺800 mg/m2，第2、3 天吡柔比星60 mg/m2，第4～7 天5-FU 500 mg/m2;CTF 方案36例:第2、3 天吡柔比星30 mg/m2，或第2 天吡柔比星60 mg/m2，其余時(shí)間與CEF 方案一致，所有藥物均為靜脈注射，化療時(shí)間為2～7 個(gè)周期。

1.3 Ki-67 及PCNA 檢測(cè)方法［4］采用免疫組化SP 法，實(shí)驗(yàn)步驟按說(shuō)明書進(jìn)行。經(jīng)抗原修復(fù)，DAB顯色。Ki-67、PCNA 陽(yáng)性均為核呈棕黃色，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的百分比，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞25%判為陽(yáng)性。表達(dá)陽(yáng)性以下簡(jiǎn)稱陽(yáng)性，記為“+”，表達(dá)陰性以下簡(jiǎn)稱陰性，記為“-”。整個(gè)切片未見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞為“-”，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)1%～25%定為“+”，25%～50%為“++”，50%～75%為“+++”，陽(yáng)性細(xì)胞在75%以上定位“++++”。

1.4 化療敏感性評(píng)定方法 化療敏感性評(píng)定以化療效果決定，而化療效果以原發(fā)灶的變化來(lái)衡量，化療前后分別測(cè)量腫瘤最大直徑。根據(jù)“實(shí)體瘤治療療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)”［5］進(jìn)行評(píng)估，乳腺癌原發(fā)灶臨床緩解分為:臨床檢測(cè)手段未發(fā)現(xiàn)腫瘤為完全緩解(CR);腫瘤最長(zhǎng)徑之和縮小30%或以上為部分緩解(PR);腫瘤非PR 且非進(jìn)展(PD)則定義為穩(wěn)定(SD)，PD 為腫瘤最長(zhǎng)徑之和增加20%，病灶增加前非CR、非PR 且非SD。本研究中以CR+PR 計(jì)算腫瘤化療總有效率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 研究中所有數(shù)據(jù)均使用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用±s 表示，進(jìn)行t 檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究患者一般情況 84 例研究患者中浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌58 例，浸潤(rùn)性小葉癌8 例，單純癌8 例，其他類型10 例;TNM 分期:Ⅰ期33 例，Ⅱ期38 例，Ⅲ、Ⅳ期13 例。所有患者均于手術(shù)治療后行化療治療。

2.2 Ki-67 及PCNA 表達(dá)及其與乳腺癌關(guān)系 通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)到的Ki-67 及PCNA 表達(dá)陽(yáng)性并結(jié)合患者一般臨床資料，Ki-67 陽(yáng)性率與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分型分期呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。而PCNA 陽(yáng)性率與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關(guān)，P＜0.05，與腫瘤臨床分型分期無(wú)關(guān)，P ＞0.05。具體數(shù)值情況見(jiàn)表1。

表1 Ki-67 及PCNA 表達(dá)及其與乳腺癌的關(guān)系Tab.1 Ki-67 and PCNA and its relationship with breast cancer

表2 Ki-67 及PCNA 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)與乳腺癌化療敏感性關(guān)系Tab.2 Ki-67 and PCNA individual and joint detection and breast cancer chemosensitivity relations

2.3 Ki-67 及PCNA 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)與乳腺癌化療敏感性關(guān)系 單項(xiàng)檢測(cè)時(shí)，Ki-67+總有效率為80.8%明顯高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率為72.7%明顯高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可為乳腺癌化療敏感性的判定指標(biāo)。聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，與Ki-67+/PCNA-組相比，Ki-67+/PCNA+有效率無(wú)差異，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明顯降低，P＜0.05。見(jiàn)表2。

3 討論

乳腺癌是女性惡性疾病中最常見(jiàn)的一種惡性腫瘤，其好發(fā)年齡為40～60 歲，但隨著流行病學(xué)的深入，目前其發(fā)病年齡越來(lái)越年輕化，發(fā)病率也呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，其原因仍未完全明了，可能與某些基因的缺失或過(guò)表達(dá)有關(guān)［6］。乳腺癌由于其發(fā)病部位的特殊性，成為很多女性十分擔(dān)憂的原因。一旦發(fā)病，最根本的解決辦法是進(jìn)行乳房切除及淋巴結(jié)清掃這種根治性手術(shù)，很多患者為追求形體的完美，選擇化療治療。因此，尋找一種有效的化療方式，找到能預(yù)測(cè)化療敏感性的指標(biāo)成為臨床工作的重難點(diǎn)。

Ki-67 是在細(xì)胞增殖過(guò)程中表達(dá)產(chǎn)生的一種核抗原，其產(chǎn)生量與細(xì)胞有絲分裂有關(guān)。Ki-67 在多種腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，與多種腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后有關(guān)［7］。本研究中共調(diào)查84 例乳腺癌患者，其Ki-67 檢出陽(yáng)性例數(shù)為52 例，陽(yáng)性率為61.9%，并且提示其表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤臨床分期有密切正相關(guān)關(guān)系，在腫瘤分期越嚴(yán)重的患者中，其陽(yáng)性表達(dá)可能性越大。在腫瘤化療敏感性的實(shí)驗(yàn)中，Ki-67+患者的化療總有效率為80.8%，明顯高于Ki-67-患者的56.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。

增殖細(xì)胞核抗原PCNA 是細(xì)胞核內(nèi)的一種酸性蛋白，是真核細(xì)胞DNA 合成所必需的輔酶。PCNA代表著細(xì)胞的增殖活性，活性越高其細(xì)胞間的張力越大，黏附性越低，越容易脫離原發(fā)灶，使腫瘤細(xì)胞向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及擴(kuò)散，被很多專家及學(xué)者認(rèn)為是細(xì)胞增殖狀態(tài)的理想預(yù)后標(biāo)志物［8］。本研究中顯示，乳腺癌中PCNA 表達(dá)陽(yáng)性例數(shù)為62 例，陽(yáng)性率為73.8%，研究中還提示PCNA 的表達(dá)與腫瘤臨床分型分期無(wú)明顯相關(guān)性，P ＞0.05。但是PCNA 表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)，即淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的患者中PCNA 表達(dá)多為陽(yáng)性，這與PCNA 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及擴(kuò)散的特性是一致的。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外一些研究表明，PCNA 與多種腫瘤的預(yù)后關(guān)系密切，有關(guān)PCNA 與乳腺癌預(yù)后的關(guān)系研究也有大量的報(bào)道［9］，認(rèn)為PCNA 的表達(dá)與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及預(yù)后有關(guān)。

在乳腺癌化療敏感性研究中，Ki-67+總有效率為80.8% 明顯高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率為72.7%明顯高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可為乳腺癌化療敏感性的判定指標(biāo)。聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，與Ki-67+/PCNA-組相比，Ki-67+/PCNA+有效率無(wú)差異，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明顯降低，P＜0.05。這表明Ki-67+及PCNA-可以作為預(yù)測(cè)乳腺癌患者化療敏感性的指標(biāo)。

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