血清白三烯B4及C反應(yīng)蛋白在慢性阻塞性肺疾病中的作用研究

牛艷慧，王 鑫，王曉靜，郭麗萍

(1.河北省胸科醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，河北 石家莊 050041；2.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河北 石家莊 050000)

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一種具有氣流受限特征的疾病，氣流受限不完全可逆，病程呈進(jìn)行性發(fā)展，病死率很高。白三烯B4(leukotriene B4，LTB4)和C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)是導(dǎo)致炎癥發(fā)生的2個常見介質(zhì)。因此，研究COPD不同時期血清中LTB4及CRP水平的變化，可以確定其在COPD發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 資料與方法

1.1 研究對象：選擇2010年8月—2011年5月因COPD急性發(fā)作在河北省胸科醫(yī)院住院的患者30例，通過病史、體檢、X線片/胸部CT檢查、肺功能檢查明確診斷，符合2007年中華醫(yī)學(xué)會修訂版COPD診治指南[1]的標(biāo)準(zhǔn)。具體入選標(biāo)準(zhǔn)包括年齡>45歲；肺功能檢查符合COPDⅡ/Ⅲ分級；經(jīng)治療達(dá)到穩(wěn)定期2個月以上能來院復(fù)查者。排除標(biāo)準(zhǔn)包括入選時正在應(yīng)用激素類藥物；其他肺部疾病、胸膜疾病和胸廓畸形；支氣管哮喘及同類疾??；其他與炎癥因子升高相關(guān)的疾病，如急性心肌梗死、活動性肺結(jié)核、惡性腫瘤、結(jié)締組織病、慢性肝病、炎癥性腸炎、急性腦出血及肺外細(xì)菌感染等。病程分期標(biāo)準(zhǔn)符合2007年中華醫(yī)學(xué)會修訂版COPD診治指南[1]。COPD急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD)指患者出現(xiàn)超越日常狀況的持續(xù)惡化，并需改變基礎(chǔ)COPD常規(guī)用藥者，通常在疾病過程中，患者咳嗽、咳痰、氣短和(或)喘息加重，痰量增多，可伴有發(fā)熱等炎癥明顯加重的表現(xiàn)。COPD穩(wěn)定期(stable chronic obstructive pulmonary disease，SCOPD)指患者咳嗽、咳痰、氣短等癥狀穩(wěn)定或癥狀輕微。同時選取同一時期來我院門診體檢的健康人20例作為對照組(Control)。具體入選標(biāo)準(zhǔn)包括年齡>45歲；體檢時肺功能檢查結(jié)果正常。排除標(biāo)準(zhǔn)同上。入選COPD患者組男性21例，女性9例，年齡47～61歲，平均(55±3)歲。對照組男性13例，女性7例，年齡50～63歲，平均(57±3)歲。2組性別、年齡構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 儀器：ci8200全自動生化分析儀(美國雅培公司)；酶聯(lián)免疫檢測儀(芬蘭雷勃)；全自動洗板機(jī)8*12(美國)；電熱恒溫水箱600型(天津)；CRP測定試劑盒(上海云大生物工程有限公司)；酶聯(lián)檢測ELISA試劑盒(上海森雄)；酶標(biāo)儀(奧地利TECAN公司)

1.2.2 炎癥因子測定：用促凝管于清晨7:30分別抽取入選AECOPD患者、治療后達(dá)SCOPD患者及對照組空腹靜脈血3mL，經(jīng)37℃溫育30min，以2 500r/min離心10min，離心后將上清液于-20℃凍存，解凍后集中應(yīng)用雙抗體夾心ELISA(avidinbiotincomplex-ELISA，ABC-ELISA)法測定LTB4，其試劑盒購自上海森雄科技實業(yè)有限公司，嚴(yán)格按說明書操作。采用散射比濁法測定CRP，其試劑盒購自上海云大生物工程有限公司，嚴(yán)格按說明書操作。

2 結(jié) 果

SCOPD患者血清中LTB4水平(43.82±10.45)ng/L明顯高于對照組的(13.33±1.71)ng/L，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；AECOPD患者血清中LTB4水平(143.84±20.21)ng/L不僅高于SCOPD水平而且明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。SCOPD患者血清中CRP水平(11.10±1.34)mg/L明顯高于對照組的(4.92±1.43)mg/L，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，AECOPD患者血清中CRP水平(43.77±7.48)mg/L明顯高于SCOPD及對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

GroupsnLTB4(ng/L)CRP(mg/L)AECOPD30143.84±20.21?#43.77±7.48?#SCOPD3043.82±10.45?11.10±1.34?Control2013.33±1.714.92±1.43

*P﹤0.01vscontrol #P<0.01vsSCOPD byqtest

3 討 論

COPD是世界慢性病防治重點之一，引起了世界各國的重視。世界銀行和世界衛(wèi)生組織預(yù)計到2020年COPD將占世界疾病經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)的第5位。研究[2-3]證實氣道炎癥反應(yīng)是造成COPD患者氣道重構(gòu)及進(jìn)行性氣道阻塞的主要原因，炎癥細(xì)胞及其細(xì)胞因子在炎癥反應(yīng)中起著重要作用。

LTB4是COPD發(fā)病機(jī)制相關(guān)介質(zhì)中研究最早的趨化因子之一，是目前已知最強的細(xì)胞趨化劑，能吸引血小板、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和嗜酸粒細(xì)胞，使其在炎癥區(qū)域內(nèi)募集和活化[4]，生成大量炎性產(chǎn)物，從而擴(kuò)大局部炎癥反應(yīng)；此外，研究發(fā)現(xiàn)LTB4與COPD的嚴(yán)重度分級呈正相關(guān)[5]，參與COPD的發(fā)病。Crooks等[6]的體外LTB4化學(xué)趨化作用實驗表明，加入LTB4受體拮抗劑后，AECOPD患者痰液對健康人外周血中性粒細(xì)胞的化學(xué)趨化作用明顯下降，達(dá)到29%，而治療結(jié)束后患者的痰液對中性粒細(xì)胞的化學(xué)趨化作用僅有10%下降。可見COPD患者對中性粒細(xì)胞的化學(xué)趨化作用變化規(guī)律與LTB4的變化規(guī)律是一致的，從而證明LTB4在AECOPD起著重要作用。阻斷LTB4生物合成或拮抗其作用，將作為以后治療COPD的新途徑之一。通過觀察和分析COPD患者外周血白細(xì)胞產(chǎn)生LTB4的情況，發(fā)現(xiàn)COPD患者血清中白細(xì)胞產(chǎn)生的LTB4水平明顯增多，且伴隨著LTB4水平的升高，患者1秒鐘用力呼氣量呈顯著下降趨勢，提示外周血白細(xì)胞產(chǎn)生LTB4的水平與氣道阻塞顯著相關(guān)，進(jìn)一步證明炎癥因子LTB4在COPD病程中的作用。本研究結(jié)果顯示AECOPD患者血清LTB4水平明顯高于SCOPD患者，而SCOPD患者血清LTB4水平又高于健康者，與有關(guān)報道相符[7]，提示LTB4可能參與了COPD的炎癥過程。目前孟魯司特鈉片作為白三烯受體的拮抗劑已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于哮喘病患者，起到擴(kuò)張小氣管，減輕氣道痙攣，緩解炎癥反應(yīng)的作用。既然LTB4可能參與了COPD的炎癥過程，那么白三烯受體拮抗劑可能會在COPD的治療中起一定作用，但是這尚需要進(jìn)一步深入研究。

CRP是急性感染的敏感指標(biāo)之一，是目前最為敏感的炎癥蛋白，當(dāng)組織發(fā)生炎癥時，巨噬細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素等炎癥介質(zhì)，刺激肝臟合成大量急性期蛋白質(zhì)，使血清中CRP水平明顯升高[8]。CRP可以通過結(jié)合血小板激活因子調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的控制過程[9]，避免炎癥的持續(xù)發(fā)生和擴(kuò)大。有報道AECOPD患者的全身性炎癥反應(yīng)程度與下呼吸道的炎癥程度呈正相關(guān)，因而認(rèn)為CRP水平可以反映下呼吸道局部的炎癥反應(yīng)情況[10]。有研究表明AECOPD患者血清CRP水平與氣流受限程度呈正相關(guān)[11]。研究[12]發(fā)現(xiàn)COPD患者的肺功能損害與高水平的CRP密切有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，AECOPD組血清CRP水平明顯高于對照組(P<0.01)，SCOPD組CRP水平雖然仍高于對照組，但是較AECOPO明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。提示CRP參與了AECOPD的發(fā)病過程，它可作為炎癥反應(yīng)的早期指標(biāo)，其水平增加代表了機(jī)體對炎癥反應(yīng)的防御機(jī)制，隨著炎癥反應(yīng)減輕，血清中CRP水平迅速下降。表明CRP的水平變化可以作為評估COPD嚴(yán)重程度和預(yù)后的指標(biāo)之一。

綜上所述，血清中LTB4、CRP水平在AECOPD及SCOPD均有不同程度升高，提示這些指標(biāo)均是造成COPD炎癥反應(yīng)的因素之一，在COPD的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。LTB4、CRP的水平變化可以作為評估COPD嚴(yán)重程度和預(yù)后的重要指標(biāo)。

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