益母草水提物對子宮收縮活動的影響

李丹，謝曉芳，彭成，熊亮，趙小梅

·藥理毒理·

益母草水提物對子宮收縮活動的影響

李丹，謝曉芳，彭成，熊亮，趙小梅

目的：益母草水提物對大鼠離體子宮平滑肌收縮功能的影響。方法：實(shí)驗(yàn)前兩日雌性未孕大鼠每日肌肉注射苯甲酸雌二醇1 mg．kg-1，于第3日頸椎脫臼處死動物，迅速剖取子宮，用BL-420E生物機(jī)能系統(tǒng)記錄子宮收縮曲線；加入水提物藥液20、20、40 μL，采用累加給藥方式，每次給藥后記錄10 min收縮曲線，比較給藥前后收縮張力、頻率和活動力的變化。結(jié)果：益母草水提物對未孕大鼠子宮均具有促進(jìn)收縮作用，使子宮活動力、收縮張力均值和最小值均明顯增加（P＜0.05或P＜0.01），且呈一定量效關(guān)系；同時，水提物可抑制縮宮素對子宮的收縮作用，使子宮活動力、收縮張力的均值和最大值均顯著降低（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論：益母草水提物對子宮活動具有雙向調(diào)節(jié)作用，對未孕大鼠正常子宮具有興奮作用，對痙攣?zhàn)訉m具有舒張作用。

]益母草；離體子宮；雙向調(diào)節(jié)

益母草為唇形科植物益母草（Leonurus japonicus Houtt.）的新鮮或干燥地上部分，性味苦、辛、微寒，歸肝、心包、膀胱經(jīng)。功效活血調(diào)經(jīng)，利尿消腫，清熱解毒，用于治療月經(jīng)不調(diào)，惡露不盡，水腫尿少，瘡瘍腫毒等[1]。本實(shí)驗(yàn)采用離體子宮模型觀察益母草水提物對未孕大鼠離體子宮收縮活動的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 提取物制備

取益母草藥材500 g，加水煎煮2次，每次1 h，合并水煎液，濾過，濾液濃縮得到浸膏為水提物（W2），每g相當(dāng)于6 g生藥，按生藥量用蒸餾水配成0.6 g．mL-1，備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物

SD大鼠，普通級，全雌，體重180～220g，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究中心提供，質(zhì)量合格證號：SCXK（川）2008-11，檢疫后用。

1.3 主要試劑及儀器

縮宮素注射液（河南輔仁懷慶堂制藥有限公司，批號1204021，用蒸餾水配成1U．mL-1，備用）；苯甲酸雌二醇注射液（天津金耀氨基酸有限公司，批號1005051）。NaCl、KC1、CaCl2、NaHCO3、無水葡萄糖試劑，均由成都市科龍化工試劑公司生產(chǎn)，采用去離子水配置洛氏液（配置方法：1000 mL含NaCl 9.2 g、KC1 0.42 g、CaCl20.24 g、NaHCO30.15 g、無水葡萄糖1.0 g)。BL-420E生物機(jī)能系統(tǒng)，JH-2型張力換能器，HW-400E型恒溫水浴平滑肌槽，均由成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 離體子宮的制備[2]

取健康、成年雌性未孕大鼠，實(shí)驗(yàn)前2日每日肌肉注射苯甲酸雌二醇1 mg．kg-1以造成動情期。于第3日頸椎脫臼處死動物，迅速剪開腹腔剖取子宮置于盛有洛氏液的玻璃皿中，輕輕剝離子宮上附有的結(jié)締組織和脂肪組織。取子宮中間段2～3cm，一端固定于盛有洛氏液20 mL的浴槽，另一端連接張力換能器，浴槽中營養(yǎng)液保持（37±0.5）℃，并通以（95% O2+5% CO2）的混合氣體，速度1～2個小氣泡/s，前負(fù)荷1 g。用BL-420E生物機(jī)能系統(tǒng)記錄子宮收縮曲線。

2.2 給藥方法

待曲線穩(wěn)定30 min，采用累積加藥方式給藥，加入提取物W2藥液，采用累加給藥方式（W2劑量為20、20、40 μL，終濃度相當(dāng)于生藥量0.0006、0.0012、0.0024 g．mL-1），每次加藥后記錄10 min離體子宮收縮活動，三次加完后用洛氏液沖洗3次，再加入等量的洛氏液，待曲線穩(wěn)定后，用同樣的加藥方式加入下一組藥物；加入1 U．mL-1縮宮素160 μL，記錄曲線10 min后再加入高劑量的藥液記錄10 min，觀察離體子宮肌收縮活動的變化。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行配對t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析給藥前后的變化，以（±s）表示，P ＜ 0.05 為顯著性差異，P＜0.01為極顯著性差異。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 對未加縮宮素子宮活動的影響

與給藥前相比，益母草水提物中、高劑量使子宮活動力、收縮張力均值和最小值均明顯增加（P＜0.05或P＜0.01），低劑量對子宮無明顯作用。由此可見，益母草水提物具有興奮正常子宮平滑肌活動的作用。結(jié)果見表1，圖1。

表1 益母草藥材不同部位對正常大鼠離體子宮收縮活動的影響（±s）

表1 益母草藥材不同部位對正常大鼠離體子宮收縮活動的影響（±s）

注：與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 指標(biāo) N 給藥前 低劑量 中劑量 高劑量空白組 活力 10 1682.90±358.30 1653.70±271.38 1702.50±284.26 1710.10±233.53水提物 8 1245.00±195.78 1314.25±215.61 1327.25±180.60* 1361.88±195.19**空白組 頻率 10 7.20±1.93 7.10±1.79 7.20±1.87 6.80±1.40水提物 8 7.88±3.00 7.00±3.02 7.63±2.97 7.63±2.67空白組 平均值 10 2.80±0.59 2.75±0.45 2.83±0.47 2.85±0.39水提物 8 2.07±0.32 2.18±0.36 2.21±0.30* 2.30±0.32**空白組 最大值 10 5.71±0.80 5.40±1.28 5.72±0.77 5.74±0.71水提物 8 4.52±1.51 4.37±1.50 4.22±1.33 4.08±1.31空白組 最小值 10 1.66±0.37 1.67±0.34 1.68±0.36 1.69±0.37水提物 8 1.43±0.16 1.56±0.27 1.63±0.24* 1.70±0.26**

圖1 益母草水提物對大鼠子宮收縮的影響（從左到右依次為給藥前、低劑量、中劑量、高劑量）

3.2 對縮宮素所致子宮痙攣的影響

與造模前比較，給予縮宮素后大鼠離體子宮平滑肌條強(qiáng)烈收縮，活動力明顯增加，收縮張力均值和最小值明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。給予益母草水提物后，使子宮活動力和收縮張力的均值、最大值降低，表現(xiàn)為抑制縮宮素對子宮的興奮作用。結(jié)果詳見表2，圖2。

表2 益母草藥材不同部位對給予縮宮素后大鼠離體子宮收縮活動的影響（±s）

表2 益母草藥材不同部位對給予縮宮素后大鼠離體子宮收縮活動的影響（±s）

注：與造模前比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與造模后比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

組別 指標(biāo) N 造模前 造模后 給藥后空白組 活力 10 1668.75±320.07 2714.88±411.84** 2661.38±421.18水提物 8 1351.00±261.41 2082.38±695.25** 1744.38±535.32▲▲空白組 頻率 10 8.00±2.51 8.13±4.09 9.13±3.76水提物 8 5.25±1.58 5.00±3.89 5.00±3.70空白組 平均值 10 2.78±0.53 4.52±0.69** 4.43±0.70水提物 8 2.24±0.43 3.46±1.16** 2.90±0.89▲▲空白組 最大值 10 5.66±0.97 5.94±0.52 5.80±0.59水提物 8 4.55±1.22 4.69±1.48 4.17±1.46▲空白組 最小值 10 1.69±0.33 2.00±0.35* 2.88±0.74▲▲水提物 8 1.54±0.38 2.03±0.69* 2.07±0.61

圖2 益母草水提物對縮宮素所致痙攣?zhàn)訉m收縮的影響

4 討論

現(xiàn)代研究表明，益母草藥理作用相當(dāng)廣泛，其對子宮有雙向調(diào)節(jié)作用，即當(dāng)子宮在正常狀態(tài)下用藥引起子宮興奮收縮，而當(dāng)子宮在痙攣狀態(tài)時用藥則引起松弛[3]。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，益母草水提物具有一定興奮大鼠離體子宮平滑肌的作用，使子宮活動力、收縮張力均值和最小值均明顯增加，并呈一定的量效關(guān)系。益母草水提物能對抗縮宮素致子宮興奮，使子宮活動力和收縮張力的均值、最大值降低。

據(jù)本試驗(yàn)結(jié)果可知，益母草水提物對子宮具有收縮和興奮作用，這種雙向作用可能是由于子宮不同生理狀態(tài)所致，也可能是其所含不同成分所致，機(jī)制有待在今后的研究中探討。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:272.

[2] 徐叔云,陳修,卞如濂.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)?第三版[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社, 2002: 1582.

[3] 李鳳娟.淺析婦產(chǎn)科中的益母草應(yīng)用[J].中醫(yī)臨床研究, 2012, 4(8):53.

（責(zé)任編輯：陳思敏）

Effect of aqueous extract of Yimucao on isolated smooth muscle of uterus

/LI Dan, XIE Xiao-fang, PENG Cheng, XIONGLiang, ZHAO Xiao-mei//(Pharmacy College, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine; State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources Co-founded by Sichuan Province and MOST, Chengdu 611137, China)

Objective: To investigate the effect of aqueous extract of Yimucao on uterine smooth muscle of vitro. Method: The effect of aqueous extract decoction on the spontaneous activity of uterine smooth muscle was observed with BL-420E biological signaling system and the activity of isolated uterus smooth muscle was recorded. The doses of the aqueous extract were 20, 20, 40 μL using cumulative mode of administration. The indexes included the amplitude，frequency and mobility in rat’s uterine smooth muscle movement track. Result: The aqueous extract had an effect on unpregnant rat uterus, and the activity, average and minimum values were signifcantly increased (P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01). It can inhibit oxytocin effect on the contraction of the uterus, which could signifcantly decrease uterine activity and the average and maximum values of tension (P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01). Conclusion: Yimucao has two-way adjustment function on uterine activity. It stimulates the normal uterus of rats and inhibits the convulsive uterus.

Yimucao；isolated uterus；two-way adjustment function

R 285.5

A

1674-926X(2014)02-019-03

國家“十二五”重點(diǎn)科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2009BAI84B00）

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137

李丹，在讀碩士研究生，主要從事中藥復(fù)方藥理毒理研究

Tel:13558661832 Email:fdqlidan@163.com

彭成，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事中藥復(fù)方藥理與疾病動物模型研究 Tel:028-61800018

Email:pengchengchengdu@126.com

2013-07-04