江西省撫州市婦幼保健醫(yī)院,江西 撫州 344000
仙桃草,學(xué)名蚊母草,為玄參科婆婆屬植物,帶蟲(chóng)癭的全草入藥。2010版《中國(guó)藥典》記載:仙桃草活血消腫,止血,止痛,主要用于跌打傷痛等諸痛。本研究通過(guò)VEGF的信號(hào)傳導(dǎo)通路探討仙桃草促進(jìn)骨折愈合的機(jī)制,現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康新西蘭長(zhǎng)耳大白兔64只,8~10月,體重2.0~2.5kg,雌雄各半,購(gòu)自南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)部。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)材料 仙桃草由本院中藥房提供,VEGF Elisa檢測(cè)試劑盒由美國(guó)PeproTech公司提供。
1.2 方法
1.2.1 造模及分組 64只新西蘭大白兔適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分成治療組和對(duì)照組,每組各32只。3%戊巴比妥鈉lml/kg兔耳緣靜脈注射麻醉,對(duì)兔左前肢常規(guī)消毒,外側(cè)切口約1.5~2.0cm,逐層剝離暴露橈骨中段。在左側(cè)橈骨中段約3mm橫行鋸斷,制造標(biāo)準(zhǔn)骨折模型,不作任何固定,生理鹽水沖洗切口,逐層縫合切口。術(shù)后常規(guī)分籠飼養(yǎng),肌肉注射40萬(wàn)單位青霉素,共3d,每天1次。
1.2.2 制藥及給藥 仙桃草先用高出藥面2~3mm的溫水浸泡15~20min,后水煎煮3次,趁熱榨渣取汁,過(guò)濾后合并藥液,濃縮成含生藥5g/ml的藥液,無(wú)菌封瓶,放在4℃冰箱保存?zhèn)溆?。術(shù)后當(dāng)天治療組進(jìn)行仙桃草提取液灌胃,對(duì)照組灌胃相同體積的生理鹽水,每日1次。給藥量按以下公式計(jì)算。兔給藥量(g·kg-1)=人給藥量(g·kg-1)×93/100×人體體重(kg)1/3/兔平均體重(kg)1/3。
1.2.3 標(biāo)本檢測(cè) 于實(shí)驗(yàn)第0天、7天、14天及21天每組各處置8只動(dòng)物。麻醉后在無(wú)菌操作下快速取出骨折處骨痂組織段1cm左右放入離心管,液氮驟冷4min后放在-80℃冰箱保存,后嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明采用Elisa方法進(jìn)行VEGF檢測(cè)。
1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以SPSS 17.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件處理,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,結(jié)果采用t檢驗(yàn),以P<0.05或P<0.01表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果表明,與對(duì)照組比較,治療組第7、14天VEGF的表達(dá)增強(qiáng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);VEGF的表達(dá)第7天達(dá)到峰值,之后表達(dá)逐漸減弱。
表1 骨折區(qū)組織VEGF的表達(dá)
注:與對(duì)照組比較,▲P<0.05。
骨折,指骨骼的完整性或連續(xù)性發(fā)生部分或完全斷裂,古稱(chēng)折骨[1]。《全國(guó)中草藥匯編》和《中華本草》均記載仙桃草具有活血消腫,止血止痛的功效。主治跌打損傷,癰疽瘡瘍等。
研究表明,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是新血管生成和血管內(nèi)皮細(xì)胞的特定絲分裂的重要介質(zhì)[2]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子具有促進(jìn)血管生成、維持血管功能以及增加血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性的作用[3]。VEGF作為促進(jìn)骨折愈合的重要因子,具有促進(jìn)血管形成、加速骨折愈合的作用[4]。
本研究結(jié)果分析,與對(duì)照組比較,治療組第7、14天VEGF的表達(dá)增強(qiáng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05) ;VEGF的表達(dá)第7天達(dá)到峰值,之后表達(dá)逐漸減弱。結(jié)果提示,骨折當(dāng)天仙桃草治療效果還未顯現(xiàn),而骨折中后期仙桃草治療效果不明顯;骨折早期,仙桃草能夠促進(jìn)VEGF的表達(dá),達(dá)到促進(jìn)骨折愈合的效果。
[1]李玄.中醫(yī)骨傷科基礎(chǔ)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:53.
[2] Gerstenfeld LC, Cullinane DM, Barnes GL, et al. Fracture healing as a post-natal developmental process: molecular, spatial, and temporal aspects of its regulation[J]. J Cell Biochem,2003,88(5):873-884.
[3] Le AX, Miclau T, Hu D.Molecular aspects of healing in stabilized and non-stabilized fractures[J].J Orthop Res,2001,19(1)78-84.
[4] 鮑小明,張民.VEGF在骨質(zhì)疏松性骨折愈合中的作用[J].中國(guó)矯形外科雜志,2012,20(22):2054-2056.