小駁骨的化學成分與藥理作用研究進展

唐聞聞，曾佳，王藝純，黃婷

(1.上海市龍華醫(yī)院藥劑科，上海 200032;2.上海市計劃生育科學研究所，國家人口和計劃生育委員會計劃生育藥具重點實驗室，上海生殖健康藥具工程技術研究中心，上海 200032;3.吉林省食品藥品檢驗所中藥室，吉林130033)

小駁骨是《中華人民共和國藥典》2010年版一部［1］新增藥材，又名接骨草、烏骨黃藤、裹籬樵等，為爵床科植物小駁骨(Gendarussa vulgaris Nees)的干燥地上部分。其味辛、苦，性平，歸肝、腎、肺經，具有祛瘀鎮(zhèn)痛、續(xù)筋接骨之功效，用于跌打損傷、筋傷骨折、風濕骨痛、血瘀經閉及產后腹痛［1］。因其續(xù)筋接骨之力很強，故有“小駁骨丹”之稱。小駁骨在我國民間應用廣泛，內服多水煎或研末沖服，外用則取鮮品搗爛，或用酒調后熱敷患處［2］，《本草綱目拾遺》《生草藥性備要》《嶺南采藥錄》《陸川本草》等醫(yī)藥古籍中均有記載。近年來關于小駁骨化學成分及現代藥理學作用的研究受到國內外學者的重視，從小駁骨提取物中發(fā)現了一些新的藥理活性。筆者對小駁骨的化學成分及藥理作用在國內外的研究進展作一綜述，以期為該藥的深入研究提供一定的參考。

1 化學成分

1.1 生物堿 LU等［3］從小駁骨地上部分的95%乙醇提取物中分離得到3個生物堿，其中1個為原小檗堿類新化合物13-hydroxyl gusanlung A，另外兩個分別為gusanlung A和gusanlung B。細胞毒活性檢測表明13-hydroxyl gusanlung A對肝癌細胞株 HepG2具有一定的細胞毒活性(GI50:2.08 μg·mL－1)。

1.2 揮發(fā)油 小駁骨含有揮發(fā)油成分，其性狀為淡黃色透明油狀液體，且具特殊濃郁香味。蘇玲等［4-5］分別采用氣相色譜-質譜聯用(GC-MS)對小駁骨的揮發(fā)油成分進行分析，初步鑒定出萜類、醇類、芳香族類、烯類、酮類和烷烴等共41種化合物，其中萜類成分占大多數。但含量均較低，含量達1%以上的成分有12種。相對含量較高的成分主要有植物醇(39.70%)、植物酮(4.75%)、1-辛烯-3-醇(2.84%)和廣藿香醇(2.74%)等。萜類化合物有較好的抗血小板聚集、擴張心腦血管、增加血流量、抑菌鎮(zhèn)痛等生物活性，提示可能與小駁骨祛風濕、散瘀血、續(xù)筋骨作用有關。

1.3 黃酮 黃酮類化合物具有抗氧化、抗炎等廣泛藥理活性［6-7］。PAVAL等［8］報道小駁骨中含有芹菜素、牡荊黃素等黃酮類成分，芹菜素具有抗炎作用，其抗炎機制為降低氧化性應激及阻斷炎癥因子的表達［9］;牡荊黃素也具抗炎作用，它主要通過抑制5-脂加氧酶(5-lipoxygenase，5-LOX)與環(huán)氧化酶(cyclo oxygenase-2，COX-2)通路來發(fā)揮抗炎活性［10］。此外，LU 等［3］從小駁骨地上部分的95%乙醇提取物中分離出華良姜素和芫花素。

1.4 苷類 郗硯彬［11］采用硅膠柱色譜，并利用質譜(mass spectrometry，MS)、磁共振 (nuclear magnetic resonance，NMR)從小駁骨地上部分的75%乙醇提取物中分離出胡蘿卜苷，為首次從小駁骨中分離。LU等［3］從小駁骨地上部分的95%乙醇提取物中分離到刺五加苷E，文獻報道刺五加苷E具有促性腺和誘生干擾素作用［12-13］。

1.5 無機元素 劉文粢等［14］用ICPQ-1012型電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀測定小駁骨莖葉、花和藥酒中鈣(Ca)、鎂(Mg)、鋅(Zn)、鐵(Fe)、銅(Cu)等15 種無機元素的含量。結果表明，在小駁骨莖葉、花和藥酒中，Ca、Mg含量極高，遠遠高于其他元素含量，其中莖葉中Ca含量最高，藥酒中Mg含量最高。Ca可加速骨的生長和骨折的愈合，Mg是骨骼礦化和建立有機骨板的重要元素，Sr可促進骨骼鈣化，Zn和Mn等元素在骨的生成和代謝中起著重要作用，作者認為這些元素是小駁骨治療骨折的重要物質基礎之一。Fe、鉻(Cr)、Cu、鎳(Ni)、錳(Mn)、Zn 都具有一定的活血作用，這些元素與小駁骨揮發(fā)油中芳樟醇、苯甲醇等多種鎮(zhèn)痛抗菌物質起著活血鎮(zhèn)痛的協同作用。

1.6 香豆素類 LU等［3］從小駁骨地上部分95%乙醇提取物中分離得到巖白菜素，文獻報道巖白菜素具有止咳、防治大鼠實驗性慢性氣管炎［15］、抗炎［16-17］和免疫增強作用［18］。

1.7 其他 文獻報道，小駁骨還含有β-谷甾醇、還原糖［19］、木酚素類、木栓酮、羽扇醇、取代型芳族胺［20］、酚二聚體［21］和三萜類化合物［20］。其中木酚素類為抗風濕病的主要成分［22］。在已知的血管生成抑制劑中，三萜類化合物占據重要的位置［23］。

2 藥理作用

目前文獻報道的小駁骨的藥理作用主要有抗炎鎮(zhèn)痛、保肝抗氧化、免疫抑制、抗生成血管和抗艾滋病毒等，近年來對其抗炎鎮(zhèn)痛的活性和機制研究相對深入，但其他藥理作用的研究并不多見。

2.1 抗炎止痛作用 PAVAL等［24］分別采用夫羅因德佐劑和膠原誘導大鼠炎癥模型研究小駁骨乙醇提取物的抗炎活性，分別給予大鼠小駁骨95%乙醇提取物與阿司匹林陽性對照，結果小駁骨提取物與阿司匹林的抗炎活性相似。JOTHIMANIVANNAN等［25］對小駁骨95%乙醇提取物進行抗炎和鎮(zhèn)痛活性研究，抗炎活性研究采用角叉菜膠致小鼠足腫脹模型和棉球肉芽腫模型，鎮(zhèn)痛活性研究采用埃迪氏熱平皿實驗和乙酸致痛扭體實驗模型，分別給予小鼠小駁骨乙醇提取物250和500 mg·kg－1，結果在2 000 mg·kg－1劑量下小鼠未顯示出大量死亡，500 mg·kg－1給藥劑量對小鼠足腫脹和棉球肉芽腫增生的抑制率分別為52%和45%。足腫脹熱皿反應具有劑量依賴的特點，醋酸引起疼痛扭體在500 mg·kg－1劑量時顯示33%的抑制力。與醋氯酚酸對照組比較，小駁骨乙醇提取物顯示劑量依賴的抗炎活性和良好的鎮(zhèn)痛作用，作者認為這可能是由于其黃酮類化合物抑制了致炎致痛的內分泌物形成和釋放而發(fā)揮作用。KAVITHA等［26-27］研究小駁骨對角叉菜膠致大鼠足腫脹急性炎癥模型的抗炎活性，發(fā)現小駁骨根甲醇提取物100 mg·kg－1可顯著抑制角叉膠誘發(fā)大鼠足腫脹5 h后的水腫形成，并可抑制大鼠血漿單核細胞COX、5-LOX與15-LOX活性，由髓過氧物酶活性降低推斷小駁骨甲醇提取物能減少嗜中性粒細胞滲入足組織，對足組織COX-2活性有53%抑制作用。同時，采用乙酸乙酯萃取法對小駁骨甲醇提取物進行純化，與其他提取物和諾華公司鎮(zhèn)痛藥voveran相比，50 mg·kg－1乙酸乙酯部位分別對角叉菜膠誘導大鼠足腫脹3和5 h后有80%和93%抑制作用，且呈劑量依賴性地抑制脂多糖誘導的人外周血單核細胞(hPBMCs)COX、5-LOX、白細胞介素(interleukin，IL)-6 與核因子 κB(NF-κB)，并降低脂多糖誘導的hPBMCs誘生型一氧化氮合酶(iNOS)和COX-2 mRNA的表達水平。VARMA等［28］研究小駁骨葉的70%乙醇提取物對脂多糖誘導的巨噬細胞系RAW 264.7細胞一氧化氮(nitrogen monoxidum，NO)的產生、iNOS及基質金屬蛋白酶9(MMP-9)基因表達的抑制作用，結果顯示，其醇提物呈濃度(200～50 μg·mL－1)依賴性地抑制脂多糖(1 μg·mL－1)誘導的巨噬細胞NO產生，并顯著抑制巨噬細胞iNOS mRNA表達，同時下調其MMP-9基因表達，這可能是小駁骨的抗炎作用機制。

2.2 保肝抗氧化作用 KRISHNA等［29］研究小駁骨莖提取物的體外抗氧化活性及其甲醇提取部位的體內保肝活性。采用DPPH自由基清除活性法、過氧化氫清除活性法及乙二胺四醋酸(EDTA)存在與否情況下三價鐵離子的減少來評價其抗氧化活性，采用四氯化碳誘導的白化小鼠肝損傷實驗評價其體內保肝活性。甲醇提取部位含有更多酚類及黃酮類成分，顯示良好的抗氧化作用，并在300 mg·kg－1劑量下顯示較好的保肝作用，但隨劑量的增加其保肝活性降低。小駁骨莖提取物的保肝作用較為溫和，作者認為可能與其總酚類和總黃酮的含量有關。

2.3 免疫抑制作用 AROKIYARAJ等［30］通過胸腺攝取淋巴細胞增殖實驗研究了小駁骨甲醇提取物對淋巴細胞增殖的抑制作用，結果顯示100 μg·mL－1濃度的甲醇提取物對淋巴細胞的抑制率為84%;作者又對甲醇提取物在正己烷、苯、乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、乙醇及水等溶劑中進行二次提取，并證實所有上述提取物在50 μg·mL－1濃度時均能抑制淋巴細胞增殖。

2.4 抗血管生成作用 PERIYANAYAGAM 等［31］采用雞胚絨毛尿囊膜試驗測定小駁骨葉的抗血管生成作用。結果表明，其水提物和無水乙醇提取物在10 μg·mL－1濃度以下時均無抗血管生成作用，50 μg·mL－1乙醇提取物及 100 μg·mL－1水提物均顯示新生血管形成抑制作用，且呈劑量依賴關系。

2.5 抗人獲得性免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)作用 WORADULAYAPINIJ等［32］分別對小駁骨水提取物及80%乙醇提取物進行抗艾滋病毒研究，發(fā)現在200 μg·mL－1濃度時其水提取物顯示90.75%HIV-1逆轉錄抑制能力，而其醇提物顯示16.82%的HIV-1逆轉錄抑制能力。

3 結束語

小駁骨雖在我國民間應用已有幾千年的歷史，但在安全性、有效性、穩(wěn)定性及藥理活性等方面還缺乏系統的研究，成為其進一步開發(fā)利用的瓶頸?，F代中藥的研究是建立在對其化學物質認識的基礎上明確其有效成分，盡可能闡明其作用機制和代謝過程。小駁骨的現代應用主要用于治療發(fā)熱、半身不遂、風濕病、關節(jié)炎、頭痛、耳痛、肌肉痛、呼吸病及消化系統疾病等。目前文獻報道的小駁骨化學成分主要有生物堿、黃酮、苷類、萜類及揮發(fā)油等，但對這些成分所發(fā)揮的藥效學機制還尚未展開深入研究;關于其藥理作用的研究主要集中在抗炎鎮(zhèn)痛方面，而保肝抗氧化、免疫抑制、抗血管生成及抗艾滋病毒等作用甚至其他新的藥理活性的研究還有待完善和發(fā)現。從小駁骨的研究現狀來看，有望將其開發(fā)成具有良好抗風濕、抗炎鎮(zhèn)痛作用的中藥制劑，以發(fā)揮傳統中藥療效好、毒副作用小的優(yōu)勢。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:44.

［2］江秀娟，林惠蓉，陳新.中藥材小駁骨的質量標準研究［J］.臨床醫(yī)學工程，2009，16(10):26－28.

［3］LU S M，ZHANG G L.Alkaloids from Gendarussa vrlgaris Nees［J］.Natural Product Res，2008，22(18):1610－1613.

［4］陳青，蘇玲，朱華，等.駁骨丹的生藥學研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2010，21(4):896－898.

［5］蘇玲，蔡毅，朱華，等.小駁骨揮發(fā)油化學成分GC-MS分析［J］.廣西中醫(yī)學院學報，2009，12(2):56－58.

［6］KIRTIKAR K R，BASU B D.Indian medicinal plants［M］.Dehra Dun:International Book Distributors，2005.

［7］IELPO M T L，BASILE A，MIRANDA R，et al.Immuno pharmacological properties of flavonoids［J］.Fitoterapia ，2000，71(Suppl 1):101－109.

［8］PAVAL J，KAITHERI S K，POTU B K，et al.Comparing the anti-arthritic activities of the plants Justicia gendarussa Burm F.and Withania somnifera Linn［J］.Int J Green Pharm，2009，3(4):281－284.

［9］SAWATZKY D，WILLOUGHBY D，COLVILLE-NASH P，et al.The involvement of the apoptosis-modulating proteins Erk 1/2，Bcl-xL，and Bax in the resolution of acute inflammation in vivo［J］.Am J Pathol，2006，168(1):33－41.

［10］SRIDHAR C，KRISHNARAJU A V，SUBBARAJU G V.Antiinflammatory constituents of teramnus labialis［J］.Ind J Pharm Sci，2006，68(1):111－114.

［11］郗硯彬.湖北栝樓種子、駁骨丹和魚腥草化學成分研究［D］.北京:中國中醫(yī)科學院，2004:6.

［12］劉起華，朱禮，李文蘭.刺五加主要活性成分化學與藥理研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，1999，10(4):305－306.

［13］楊吉成，劉靜山.多糖類及刺五加苷類的干擾素促誘生效應［J］.中草藥，1990，21(1):27－29.

［14］劉文粢，黃愛東，顧熊飛.小駁骨丹無機元素的含量測定［J］.廣東微量元素科學，2002，9(8):57－58.

［15］江蘇新醫(yī)學院.中藥大詞典［M］.上海:上海人民出版社，1999:2359.

［16］劉文江，段青宏.中藥百兩金的藥理作用研究［J］.中草藥，1986，17(9):21－24.

［17］LI R W，LEACH D N，MYERS S P，et al.A new antiinflammatory glucoside from Ficus racemosa L［J］.Planta Med，2004，70(5):421－426.

［18］阿斯亞，拜山佰，劉發(fā).巖白菜素的免疫增強作用［J］.新疆醫(yī)學學報，1998，21(3):189－193.

［19］WAHI S P，WAHI A K，KAPOOR R.Chemical study of the leaf of Justicia gendarussa Burm［J］.J Res Indian Med，1974，9:65－66.

［20］CHAKRAVARTHY A K，DASTIDAR P G，PAKRASH S C.Simple aromatic amines from Justicia gendarussa-13C NMR spectra of the bases and their analogues［J］.Tetrahedron，1982，38(12):1797－1802.

［21］MRUNTHUNJAYA K HUKKERI V I.Antioxidant and free radical scavenging potential of J.gendarussa Burm，leaves in vitro［J］.Natural Prod Sci，2007，3(3):199－206.

［22］APERS S，VLIETINCK A，PIETERS L.Lignans and neolignans as lead compounds［J］.Phytochem，2003，2(3):201－217.

［23］APERS S，PAPER D，BURGERMEISTER J，et al.Antiangiogenic activity of synthetic djhydrobenzofuran lignans［J］.J Nat Prod，2002，65(5):718－720.

［24］PAVAL J，KAITHERI S K，POTUB K，et al.Anti-arthriticpotential of the plant Justicia gendarussa Burm F［J］.Clinics，2009，64(4):357－360.

［25］JOTHIMANIVANNAN C，KUMAR R S，SUBRAMANIAN N.Anti-Inflammatory and analgesic activities of ethanol estract of aerial parts of Justicia gendarussa Burm［J］.Int J Pharmacol，2010，6(3):278－283.

［26］KAVITHA S K，VIJI V，KRIPA K，et al.Protective effect of Justicia gendarussa Burm.f.on carrageenan-induced inflammation［J］.J Nat Med，2011，65(3－4):471－479.

［27］KAVITHA S K，VIJI V，SHOBHA B，et al.Anti-inflammatory potential of an ethyl acetate fraction isolated from Justicia gendarussa roots through inhibition of iNOS and COX-2 expression via NF-κB pathway［J］.Cell Immunol ，2012，272(2):283－289.

［28］VARMA R S，ASHOK G，VIDYASHANKAR S，et al.Ethanol extract of Justicia gendarussa inhibits lipopolysaccharide stimulated nitric oxide and matrix metalloproteinase-9 expression in murine macrophage ［J］.Pharmaceutical Biol，2011，49(6):648－652.

［29］KRISHNA K L，MRUTHUNJAYA K，JAGRUTI A.Antioxidant and hepatoprotective potential of stem methanolic extract of Justicia gendarussa burm［J］.Int J Pharmacol，2010，6(2):72－80.

［30］AROKIYARAJ S，PERINBAM K，AGASTIAN P，et al.Immunosuppressive effect of medicinal plants of Kolli hills on mitogen-stimulated proliferation of the human peripheral blood mononuclear cells in vitro［J］.Ind J Pharmacol，2007，39(4):180－183.

［31］PERIYANAYAGAM K，UMAMAHESWARI B，SUSEELA L，et al.Evaluation of antiangiogenic effect of the leaves of Justicia gendarussa(Burm.f)(Acanthaceae)by chrio allontoic membrane method American［J］.J Infect Dis，2009，5(3):180－182.

［32］WORADULAYAPINIJ W，SOONTHORNCHAREONNON N，WIWAT C.In vitro HIV type 1 reverse transcriptase inhibitory activities of Thai medicinal plants and Canna indica L.rhizomes［J］.J Ethno Pharmacology，2005，101(1－3):84－89.