龍 華
(浙江寧波市第七醫(yī)院(鎮(zhèn)海區(qū)人民醫(yī)院) 設備科,浙江寧波315202)
LH750血細胞分析儀是美國貝克曼庫爾特公司生產的高端血細胞分析儀之一,其優(yōu)點是檢測速度較快,操作較為簡便,功能齊全。該款設備采用的細胞計數(shù)檢測方法采用電阻抗原理,白細胞分類檢測方法采用VCS原理,血紅蛋白檢測方法采用光電比色原理。下面,就儀器使用中常見的一些故障現(xiàn)象進行分析與處理講述。
1.1 自動吸樣組成
自動吸樣功能模塊主要由以下組成:吸樣泵、自動吸樣針、前血探測器、分血閥(BSV)、分類剪切閥、網織剪切閥、后血探測器。
1.2 自動吸樣流程
(1)樣本管到達吸樣位→波紋管缸體動作使吸樣針露出→推管器將樣本管推向吸樣針→吸樣針進入樣本管內。
(2)BSV逆時針旋轉使吸樣泵負壓傳到吸樣針吸取血樣→(血樣通過)前血探測器→BSV→分類剪切閥(VL85)→網織剪切閥(VL87)→后血探測器→管路內血樣質量及完整性檢查→完整則進入步驟(3);不完整、嚴重貧血或有汽泡等,引發(fā)報警:吸樣N、P、B、C,重復步驟(1)(2)。
(3)BSV順時針旋轉→紅細胞稀釋液泵(PM2)動作→用稀釋液將BSV中的1.6μl血樣推入到紅細胞/血小板池計數(shù)。同時白細胞稀釋液泵(PM3)動作→用稀釋液將BSV外片內的28 μl血樣推入白細胞池內計數(shù)(包括血紅蛋白測量)。分類剪切閥VL85動作→分類稀釋泵(PM4)用試劑將VL85內的31μl血樣推入分類混勻池分類計數(shù)。網織剪切閥VL87動作→染色泵(PM5)用網織染液將VL87內的31μl血樣推入染色池內對網織紅細胞計數(shù)。各取樣完成后自動用稀釋液反沖吸樣管路。
1.3 自動吸樣常見故障及分析
(1)吸樣時,報警吸樣C。一般是由于前后血探測器電壓差超出范圍引發(fā),儀器認為樣本管道反沖不好,吸樣管路有殘留樣本或沒充滿稀釋液。
(2)吸樣中,報警吸樣N。一般是前血探測器電壓未在規(guī)定時間內由稀釋液感應電壓降到血樣感應電壓閾值內,儀器認為無血樣通過而引發(fā)。可能原因有:a、血樣量不足;b、吸樣管道堵塞或泄漏;c、BSV無動作或轉動不到位;d、血樣的血紅蛋白太低(<6g/L)。
(3)吸樣中,報警吸樣B。一般是由于通過樣本管路內血樣被前血探測器檢測出質量不合格或含有氣泡,前血探測器電壓無法保持在血的感應電壓閾值內而引發(fā)??赡茉蛴?a、血樣量不足;b、吸樣針或樣本管道堵塞。
(4)吸樣后,報警吸樣P。一般是由于前后血探測器電壓不一致,儀器認為管路內血樣質量和完整性有問題而引發(fā)??赡茉蛴?a、血樣量不足;b、BSV轉動不到位或部分堵塞。
1.4 維修實例
故障一:儀器在自動進樣運行模式下報錯:ASPIRATION-B—
故障處理:分析報錯原因可能為血樣量不足、吸樣針或樣本管道堵塞。打開儀器前蓋觀察試管內血樣量正常,自動進樣針無法對準標本管口。根據(jù)該情況,先對搖床限位控制進行檢查。將右側蓋板打開,前后移動搖床到限位處,觀察對應的傳感器指示燈是否點亮,點亮則限位正常。經檢查正常。再對自動進樣針進行檢查。取出自動進樣針,壓下波紋管外套,檢查針是否彎曲或堵塞。經檢查發(fā)現(xiàn)自動進樣針彎曲,小心將針扳直;同時,再清洗分血片,清理結晶;之后做沖洗,試做樣本,正常。
故障二:儀器在自動進樣模式運行中報Diluter 1(稀釋加液器1)出錯,顯示“Door Open Run Stopped”信息。
故障處理:分析導致Diluter報錯的大致原因有:吸樣N、P、B、C;搖床未動作、未退回、未回到水平位;吸樣針波紋管套未升上來、未降下來;前后血探測器未檢測到有血樣通過、前血探測器檢測到有氣泡;稀釋加液器故障等。此次故障相關信息提示為“Door Open Run Stopped”,分析應與以上原因無關。通過查看軟件,可能引起報“Door Open Run Stopped”的原因為 Diluter front door open during Automatic mode operation.提示處理方法為Close Diluter front door and continue operation.但實際上Diluter front door并未打開,分析應該與Diluter Front Door傳感器或其電源排線有關。檢查Diluter Front Door傳感器與電源排線,排查發(fā)現(xiàn)排線正常,傳感器存在故障。待與廠商聯(lián)系,取得傳感器后更換;清洗FLOWCELL,清洗負壓調節(jié)閥。在自動進樣模式下試做樣本,儀器恢復正常。
1.5 手動吸樣故障分析處理
故障一:手動進樣針插針塊被堵住(無法上移)Manual Sampling Probe Wipe Obstructed(Not Up)。
故障處理:分析原因可能是由于手動吸樣針的插針塊上下運動時阻力增大,做F28,ENTER,檢查擦針塊運動,發(fā)現(xiàn)運動阻力確實較大。先對插針塊軸桿進行清理潤滑,使之順滑,再檢查插針塊運動,發(fā)現(xiàn)阻力仍大??紤]插針塊馬達性能變差,阻力增大,更換馬達,再做F28,ENTER,檢查插針塊運動順暢。做沖洗后試做樣本,正常。
故障二:開機進行START UP或手動進樣時儀器報警“Probe Obstruction”(探針堵塞),系統(tǒng)提示“Probe Wipe Up/Down Fail”(手動吸樣針的插針塊上下運動時感應器位置報警)。
故障處理:進行重啟后儀器故障仍存在。分析原因可能是由于手動吸樣針的插針塊上下運動時阻力增大,做F28,ENTER,檢查擦針塊運動,調整潤滑,問題仍存在。檢查插針塊馬達性能狀態(tài)正常。分析可能為探針感應器報警引起。將儀器手動進樣系統(tǒng)前蓋打開,移開外部鐵架,發(fā)現(xiàn)傳感器上灰塵較多,由此引起擦針塊在清洗探針上下移動時發(fā)生感應錯誤報警。用75%酒精擦拭上下傳感器,然后再用干棉簽擦干,重新裝上,試機正常。
2.1 分類原理
白細胞分類通過鞘流技術和VCS原理實現(xiàn)。鞘流技術通過使WBC單個通過流動池實現(xiàn)。VCS原理的實現(xiàn),先在樣本內加入溶血劑使紅細胞溶解,然后加入抗溶血劑中和溶血劑,使白細胞表面、胞質及細胞大小等特點保持不變,用直流電壓測量通過流動池的WBC的體積即為V,高頻電流測量WBC的核質比即為C,通過激光散射測量WBC的結構即為S,從而將WBC根據(jù)體積、形態(tài)、結構等進行分類。網織紅細胞計數(shù)也是用VCS原理,利用染色液將所有的細胞進行染色,再用漂洗液將所有細胞的染色部分清洗掉,網織紅細胞RNA上的顏色無法漂洗掉。樣本進入流動池測量VCS。
2.2 維修實例
故障一:RBC、PLT等結果偏高。
故障處理:觀察發(fā)現(xiàn),RBC稀釋液泵動作正常,但打出的液體量偏少。對RBC稀釋液泵進行檢查,發(fā)現(xiàn)泵膜已磨損,效果受到影響,更換RBC稀釋液泵,同時進行系數(shù)調整。試做樣本,結果正常。
故障二:WBC、RBC、PLT數(shù)據(jù)做不出。
故障處理:檢查WBC池、RBC池液面正常,按F02,檢查溶血素量正常。分析可能管路及小孔存在一定的堵塞。執(zhí)行F01和F09進行小孔排堵,效果不明顯,直接采用次氯酸鈉溶液清洗小孔,先按DRAIN(排水)鍵,再分別從WBC池、RBC池右上方的單向閥注射10mL的10%次氯酸鈉溶液,再按F05,次氯酸鈉溶液從外室經過小孔后到達內室,保持5min,最后再按PRIME APER(灌注上沖)鍵,沖洗后試做樣本,結果正常。
故障三:無分類數(shù)據(jù)。
故障處理:檢查環(huán)境正常,試劑處于有效狀態(tài),溶血素泵動作正常,混合室動作正常,到流動池的進樣管無異物。觀察流動池中激光正常,但流動池存在結晶樣異物。對流動池進行清理,反復清洗干凈后,試做樣本正常。
故障四:WBC、HGB偏低。
故障處理:分析可能為WBC計數(shù)池沒有完全排空導致樣本稀釋比例增加,或者是BSV的中片沒有旋轉或轉動不到位,導致WBC的稀釋比例增加,或BSV轉動偏慢,造成一部分到RBC計數(shù)池的稀釋液到達了WBC計數(shù)池,導致WBC的稀釋比例增加。對BSV的軸桿進行清潔,問題仍存在。仔細檢查發(fā)現(xiàn)WBC排廢管子被V12B壓扁,更換排廢管,試做樣本正常。
3.1 氣壓報警:5/30/60 PSI Pressure High等報警壓力報警,可調節(jié)電源箱上的壓力調節(jié)鈕。
3.2 試劑報警:Level-C:清潔劑用完;Level–D:稀釋劑用完;Level–L:溶血劑用完;Level-P:分類試劑用完;Level-R:網織紅試劑;Level–W:廢液滿。
3.3 Low Vacuum Low/high:計數(shù)負壓低或高,此時要檢查儀器左側背面的負壓保護瓶是否進水,浮子是否落下。
3.4 Low Vacuum drift:計數(shù)負壓漂移,可按F92,ENTER,鍵盤屏幕顯示負壓讀數(shù),此時可調節(jié)右側負壓調節(jié)鈕,調節(jié)壓力至6.000左右即可。若無法調整,可能堵塞嚴重所致,需將調節(jié)閥拆下進行清洗。
3.5 Backwash Tank Not Full:儀器正面左側反沖瓶未滿,檢查稀釋劑是否用完。如稀釋劑正常,則按儀器鍵盤F30,ENTER,如果灌注的速度比較慢,應該為高負壓不足,處理高負壓管道。如果灌注時進來氣泡,可能是VC28瓶子破裂,更換。
3.6 VACUUN OVERFLOW TANK:負壓溢流瓶是儀器高負壓的存儲瓶。壓力不正常時,拔掉從右側VL40閥過來的兩根圓管,并觀察氣泵的負壓指示,13~16inchHg說明儀器高負壓正常。如果大于16inchHg,負壓保護瓶頂部可能有結晶需清洗,或重新插拔儀器VAC端。
3.7 Bellows Not Down/up:自動進樣穿刺針上下位置報警,檢查感應器位置并根據(jù)指示燈調整。
3.8 Manual Probe Not In:手動吸樣針位置報警,檢查是否有障礙擋住手動吸樣感應器。
4.1 日保養(yǎng):(1)每天開機前用蒸餾水清洗分血片上的結晶,然后用紙巾吸干。(2)每天用刷子清除儀器表面灰塵。(3)每天執(zhí)行開關機程序,關機浸泡至少30min。(4)按F92檢查Low Vac,必要時進行調整至6.00;按F09;按F44
4.2 周保養(yǎng):(1)每周清洗一下電源箱的三塊過濾網和主機背面一條過濾網,清洗時最好在關機狀態(tài)。(2)用棉簽清洗自動進樣針組件的表面。(3)清潔搖床。
4.3 月保養(yǎng):(1)每2個月左右建議做計數(shù)小孔保養(yǎng)。先將計數(shù)池排空,然后用注射器分別向紅細胞和白細胞計數(shù)池注入10mL1∶1稀釋的次氯酸鈉溶液。(2)在鍵盤上按F12,ENTER將溶液吸到小孔后面,等待5-10min后按F11,ENTER將溶液反沖小孔。(3)按PRIME APERT。(4)按CLEAR APERT 2-3次,反沖小孔。
4.4 其他注意事項:實驗室的溫度濕度電源配置等必須符合要求,需注意控制室內的灰塵,保持環(huán)境整潔。儀器每天開機運行“START?UP”程序,進行自檢、清洗和空白值的測定。開始工作前檢查試劑情況。在儀器運行工作中注意觀察各項壓力指標是否正常。記錄常見的報警提示供以后參考。每天工作結束后進行日常保養(yǎng),定期進行周保養(yǎng)、月保養(yǎng)。良好的工作環(huán)境、規(guī)范的操作、及時有效的保養(yǎng),將對降低儀器故障率和保障檢測數(shù)據(jù)的準確性起到較大的作用。
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