腫節(jié)風(fēng)有效成分檢測方法研究概述

康夢瑩，馬家寶，陳小媛，梁建麗，陳 勇

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530002)

?

腫節(jié)風(fēng)有效成分檢測方法研究概述

康夢瑩，馬家寶，陳小媛，梁建麗，陳 勇*

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530002)

對近年來腫節(jié)風(fēng)有效成分黃酮類、香豆素類、有機(jī)酸類、皂苷類、揮發(fā)油類、多糖類等檢測方法的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行分析總結(jié)，以便充分開發(fā)利用腫節(jié)風(fēng)類藥物資源，為腫節(jié)風(fēng)及其制劑提供綜合性、可量化的質(zhì)量評價(jià)方法。

腫節(jié)風(fēng)；有效成分；檢測方法

腫節(jié)風(fēng)(Sarcandraglabra)又名草珊瑚、接骨金粟蘭、九節(jié)風(fēng)、九節(jié)茶、九節(jié)蘭、節(jié)骨茶等，為金粟蘭科(Chloranthaceae)植物草珊瑚(Sarcandraglabra(Thunb.)Nakai)的干燥全草[1]，是《中華人民共和國藥典》2005年版一部收載的法定藥材。腫節(jié)風(fēng)味苦、辛，性平，歸心、肝經(jīng)，具有清熱涼血、活血消斑、祛風(fēng)通絡(luò)作用，可用于治療血熱紫斑、紫癜、風(fēng)濕痹痛、跌打損傷等病癥[2]?，F(xiàn)有研究表明腫節(jié)風(fēng)的化學(xué)成分主要包括黃酮類(異甘草素、異甘草苷、7-O-甲基柚皮素)、香豆素類(異嗪皮啶、嗪皮啶、嗪皮苷) 、有機(jī)酸類(反丁烯二酸、綠原酸)、倍半萜類(白術(shù)內(nèi)酯)以及揮發(fā)油類等，因此其藥理作有也具有多樣性[3]?，F(xiàn)就近年來腫節(jié)風(fēng)中各有效成分檢測方法的研究情況綜述如下。

1 化學(xué)成分

1.1 黃酮類

腫節(jié)風(fēng)中總黃酮含量較高，其中以葉的含量最高，根其次，莖最低。黃酮類化合物是腫節(jié)風(fēng)重要的有效成分，有明確的藥理作用[4]，其檢測方法主要以紫外分光光度法為主。

黃明菊等[5]采用紫外光譜儀、紅外光譜儀以及核磁共振儀從腫節(jié)風(fēng)水提物中測得落新婦苷等5個(gè)黃酮苷類化合物，以及首次測得3個(gè)葡萄糖醛酸類化合物。童家賀等[6]采用薄層色譜對乙酸乙酯提取部位進(jìn)行鑒別，并結(jié)合高效液相色譜測定總黃酮含量，對藥材質(zhì)量進(jìn)行了考查，發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地腫節(jié)風(fēng)藥材所含成分及總黃酮含量差異較大。譚健兵等[7]以高效液相色譜法測定腫節(jié)風(fēng)藥材中山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷及異秦皮啶的含量，首次建立山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷與異秦皮啶的含量測定方法, 專屬性較強(qiáng), 為腫節(jié)風(fēng)藥材多指標(biāo)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供了依據(jù)。李可強(qiáng)[8]采用HPLC法測定中藥材腫節(jié)風(fēng)中黃酮類成分落新婦苷及柚皮苷的含量，以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)為流動(dòng)相, 采用梯度洗脫，檢測波長為290nm，落新婦苷及柚皮苷的平均回收率分別為97.3%、95.6%,RSD分別為2.2%、2.3%,為腫節(jié)風(fēng)黃酮類有效化合物的鑒定提供了又一有效依據(jù)。

1.2 香豆素類

腫節(jié)風(fēng)香豆素類成分主要為異秦皮啶,在體外活性實(shí)驗(yàn)中顯示出一定的抑制腫瘤細(xì)胞作用。異秦皮啶是藥典中腫節(jié)風(fēng)主要質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)之一。

羅奇志等[9]采用高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜，以乙腈-11%甲酸水溶液梯度洗脫,紫外和電噴霧質(zhì)譜同時(shí)在線檢測，全離子掃描模式掃描,對每一組分峰進(jìn)行質(zhì)譜分析，鑒定出異秦皮啶等5個(gè)化學(xué)成分，此技術(shù)無需繁瑣、復(fù)雜的提取分離即能推斷出大量化合物的分子量、結(jié)構(gòu)信息,對認(rèn)識(shí)中藥化學(xué)成分的全貌有其突出優(yōu)勢,更有利于化合物的確認(rèn)。周斌等[10]利用高效液相色譜測定腫節(jié)風(fēng)不同部位中異嗪皮啶的含量，結(jié)果顯示，腫節(jié)風(fēng)藥材根中異嗪皮啶含量較高，葉中含量較低。吳鐵榮等[11]以異嗪皮啶為研究對象，建立腫節(jié)風(fēng)藥材中該成分與新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、迷迭香酸的相對校正因子，利用相對校正因子計(jì)算六種成分的含量，實(shí)現(xiàn)一測多評。此方法操作簡單，專屬性及重復(fù)性好，實(shí)現(xiàn)了只用異嗪皮啶一種對照品同時(shí)測定新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、迷迭香酸的含量。王菲等[12]采用硅膠柱層析, 以環(huán)己烷-乙酸乙酯溶劑系統(tǒng)等梯度洗脫方法，將抗腫瘤活性成分洗脫分離出來，并用核磁共振儀、質(zhì)譜儀進(jìn)行測定，共得13個(gè)化合物。通過獲得的1H NMR與13C NMR圖譜分析，首次發(fā)現(xiàn)了3,3'-雙異秦皮定、白術(shù)內(nèi)酯III等4個(gè)新化學(xué)成分。

1.3 有機(jī)酸類

有機(jī)酸是目前發(fā)現(xiàn)的中草藥抗菌消炎活性成分比較多的一類，其中反丁烯二酸及綠原酸也是目前腫節(jié)風(fēng)主要的質(zhì)量控制指標(biāo)之一。

羅永東等[13]利用快速溶劑萃取結(jié)合液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，以正負(fù)離子全掃描模式檢測腫節(jié)風(fēng)藥材中的化學(xué)成分，準(zhǔn)確鑒定了反丁烯二酸及綠原酸等9種化學(xué)成分，為腫節(jié)風(fēng)藥材化學(xué)成分的快速篩選提供了方法。陳東鴻等[14]采用薄層色譜及高效液相色譜法對腫節(jié)風(fēng)藥材進(jìn)行鑒定及含量測定，在中國藥典2010年版一部腫節(jié)風(fēng)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，增加了腫節(jié)風(fēng)中迷迭香酸、反丁烯二酸、綠原酸的薄層色譜鑒別和特征圖譜，其中綠原酸與對照品相比，斑點(diǎn)清晰且含量較高。盧瑞枝等[15]采用高效液相色譜方法測定，流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸水溶液(13∶87),在流速為0.5mL/min、檢測波長為327nm情況下建立測定方法，平均加樣回收率為100.19%，RSD為1.47%，是腫節(jié)風(fēng)有機(jī)酸類有效的測定方法。張廣財(cái)?shù)萚16]采用高效液相色譜波長切換法同時(shí)測定腫節(jié)風(fēng)中反丁烯二酸、異秦皮啶和落新婦苷多指標(biāo)成分的含量，此實(shí)驗(yàn)成功實(shí)現(xiàn)了同時(shí)測定3種指標(biāo)性成分，減少了檢測時(shí)間，并且操作方便，重復(fù)性好。

1.4 倍半萜類

黎雄等[17]利用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、ODS柱色譜及液相色譜等分離技術(shù)從腫節(jié)風(fēng)70%乙醇提取物的正丁醇和乙酸乙酯萃取部分分離得到4個(gè)倍半萜內(nèi)酯類成分。

1.5 揮發(fā)油

腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油具有抗腫瘤活性，其中β-欖香烯是鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油的主要成分。

楊榮平等[18]采用水蒸氣蒸餾法分別對腫節(jié)風(fēng)的莖和葉進(jìn)行提取, 將提取物的化學(xué)成分經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜(GC- MS)法進(jìn)行分離鑒定，用歸一化法計(jì)算各組分的相對百分含量。共從腫節(jié)風(fēng)莖揮發(fā)油中鑒定出29種化合物, 其含量占總揮發(fā)油的75.88%；從腫節(jié)風(fēng)葉揮發(fā)油中鑒定出64種化合物, 其含量占總揮發(fā)油的87. 98%。吳素香等[19]利用TLC 鑒別及HPLC 含量測定鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油中β-欖香烯成分，可作為檢測腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油β-欖香烯的有效方法。張勝娜等[20]利用毛細(xì)管氣相色譜, 選擇適宜的程序升溫條件對鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油進(jìn)行分析, 獲得了較為理想的包含特征信息的鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油GC指紋圖譜。

1.6 多糖

金磊等[21]采用超聲提取法制備腫節(jié)風(fēng)多糖，并將在發(fā)酵條件優(yōu)化方面體現(xiàn)出重要應(yīng)用價(jià)值的響應(yīng)面優(yōu)化法(RSM)應(yīng)用到多糖制備的工藝研究中，利用對紫外分光光度計(jì)測得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元二次回歸來擬合影響因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系，通過對回歸方程的分析尋求最優(yōu)工藝參數(shù)。

1.7 其它

從腫節(jié)風(fēng)中分離得到的化合物還有胡蘿卜苷(β- sitosteryl-D-glucoside)、β-谷甾醇和白樺脂酸(betulinic acid)等[22-24]。李先春等[25]分別用原子吸收光譜法、紫外可見分光光度法及X-射線熒光法測定了腫節(jié)風(fēng)中Zn、Se、Cu、Mn、Fe 、Mg 等微量元素的含量，萃取-熒光法、萃取-光度法、原子吸收光譜法分別用于測定了腫節(jié)風(fēng)中硒的含量。

2 結(jié)語

腫節(jié)風(fēng)中化學(xué)成分復(fù)雜，含有有機(jī)酸類(包括綠原酸和反丁烯二酸)、黃酮類、香豆素類(異秦皮啶)、揮發(fā)油類、多糖類及其它成分等，以反丁烯二酸和異秦皮啶為主，并以異秦皮啶含量高低來評價(jià)腫節(jié)風(fēng)品質(zhì)的優(yōu)劣，但異秦皮啶并不代表腫節(jié)風(fēng)的全部成分。其有效成分檢測方法主要為紫外可見分光光度法、高效液相色譜法、高效毛細(xì)管電泳法、高效液相指紋圖譜等。目前雖然對于腫節(jié)風(fēng)有效成分分析及檢測方法的研究取得了一定進(jìn)展，但仍然存在不足，如國內(nèi)對腫節(jié)風(fēng)化學(xué)成分的研究主要集中在對其黃酮類、香豆素類及揮發(fā)油類的研究，對其它研究較少；此外，腫節(jié)風(fēng)具有多種藥理活性，因此有必要深入研究其它活性成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)及構(gòu)效關(guān)系、定量方法，全面評價(jià)藥材的質(zhì)量，以便充分開發(fā)利用腫節(jié)風(fēng)藥用植物資源，為腫節(jié)風(fēng)及其制劑提供綜合的和可量化的質(zhì)量評價(jià)方法。

[1] 肖培根.新編中藥志[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002:195-199.

[2] 國家藥典委員會(huì).中國藥典[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:154-155.

[3] 董偉,徐國良,張啟云,等.腫節(jié)風(fēng)的藥理作用及其在血小板減少性疾病中的應(yīng)用[J].中藥藥理與臨床,2013,29(1):176-178.

[4] 周斌,劉可越,常軍,等.中藥腫節(jié)風(fēng)的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2009,26(12) :982.

[5] 黃明菊,曾光堯,譚建兵,等.腫節(jié)風(fēng)中黃酮苷類成分研究[J].中國中藥雜志,2008,33(14):1700-1702.

[6] 童家賀,李薇,潘超美.不同產(chǎn)地腫節(jié)風(fēng)的薄層鑒別及總黃酮含量測定[J]. 中藥新藥與臨床藥理,2007,18(4):318-320.

[7] 譚健兵,黃明菊,曾光堯,等. 高效液相色譜法測定腫節(jié)風(fēng)藥材中異秦皮啶與山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷的含量[J].中南藥學(xué),2009,7(3):177-179.

[8] 李可強(qiáng),張廣財(cái),宋宇寧,等.腫節(jié)風(fēng)中落新婦苷及柚皮苷的HPLC分析[J].中草藥,2010,41(1):137-139.

[9] 羅奇志,戴開金,馬安德. 腫節(jié)風(fēng)化學(xué)成分的高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜分析[J].中藥材,2009,4(32):526-529.

[10] 周斌,李忠貴,李雁霞,等.中藥腫節(jié)風(fēng)不同部位中異嗪皮啶和總黃酮含量的動(dòng)態(tài)分析[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2011,22(5):1148-1149.

[11] 吳鐵榮,許妍,羅躍華.一測多評法同步測定腫節(jié)風(fēng)藥材中6種成分[J].中藥材,2011,34(11): 1730-1734.

[12] 王菲,袁勝濤,朱丹妮. 腫節(jié)風(fēng)抗腫瘤活性部位的化學(xué)成分[J].中國天然藥物,2007,5(3):174-178.

[13] 羅永東,林培玲,吳水生,等. 應(yīng)用ASE-LC-ESI-MS 法快速篩選腫節(jié)風(fēng)的化學(xué)成分[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2011,7(12):29-31.

[14] 陳東鴻,江芳,陳航,等.腫節(jié)風(fēng)對照藥材標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].藥物分析雜志,2013,33(4):695-700.

[15] 盧瑞枝,季巧遇,吳文茂,等。反相高效液相色譜法測定腫節(jié)風(fēng)藥材中綠原酸的含量[J].江西中醫(yī)藥,2010,11(41): 70-72.

[16] 張廣財(cái), 張朔,李可強(qiáng),等.高效液相色譜波長切換法同時(shí)測定腫節(jié)風(fēng)中多指標(biāo)成分的含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2008,28(23):2051-2052.

[17] 黎雄,張玉峰,楊柳,等.腫節(jié)風(fēng)倍半萜類化學(xué)成分研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào), 2011,46(11):1349-1351.

[18] 楊榮平,王賓豪,勵(lì)娜,等.GC-MS法分析腫節(jié)風(fēng)莖和葉中揮發(fā)油化學(xué)成分[J]. 中國藥房,2008,19(3):2368-2370

[19] 吳素香,呂圭源,趙麗珊,等. HPLC測定鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油中β-欖香烯的含量[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2010,27(1):59-61

[20] 張勝娜,吳素香,陳素紅,等.鮮腫節(jié)風(fēng)揮發(fā)油GC指紋圖譜研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2010,17(1):50-53.

[21] 金磊,關(guān)欣,張珍珍,等.響應(yīng)面法優(yōu)化腫節(jié)風(fēng)多糖超聲提取工藝的研究[J].藥物生物技術(shù),2012,19(5):414-418.

[22] 王鋼力,陳道峰,林瑞超.腫節(jié)風(fēng)的化學(xué)成分及其制劑質(zhì)量控制研究進(jìn)展[J].中草藥,2003,34(8):12 -14.

[23] 羅永明,劉愛華,余邦偉,等. 中藥草珊瑚的化學(xué)成分研究[J].中國藥學(xué)雜志，2005,40(17): 1296-1298.

[24] 曾愛華,羅永明.草珊瑚化學(xué)成分研究[J].中藥材,2005,28(4):292-293.

[25] 李先春,王敦清.測定草珊瑚中硒含量的方法研究[J].江西師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,1998,22(1):53-56.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

2014-03-05

康夢瑩(1990-)，女，廣西中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生，研究方向?yàn)樗幬镔|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

陳勇(1961-)，男，廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院教授，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量評價(jià)與分析。

R284

A

1673-2197(2014)13-0043-02