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    金黃色葡萄球菌致黃牛猝死的診斷及防治

    2014-03-08 04:57:24陳文忠徐國周
    云南畜牧獸醫(yī) 2014年4期
    關(guān)鍵詞:東川區(qū)黃牛青霉素

    陳文忠,徐國周

    (昆明市東川區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所,云南 昆明 654100)

    近年來,昆明市東川區(qū)碧谷鎮(zhèn)梅子村農(nóng)戶飼養(yǎng)的黃牛相繼出現(xiàn)零星死亡。據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和實(shí)驗(yàn)室診斷,確診為金黃色葡萄球菌感染。經(jīng)藥敏試驗(yàn),選用高敏藥物對患畜進(jìn)行治療,對全村黃牛采取綜合防治措施,有效地控制了黃牛死亡和疫病的發(fā)生及擴(kuò)散。連續(xù)3年的追蹤調(diào)查,已無黃牛猝死癥的發(fā)生,疫病得到有效控制。

    1 發(fā)病情況

    碧谷鎮(zhèn)梅子村地處半山區(qū),較封閉和貧窮,飼養(yǎng)黃牛293頭。從出現(xiàn)第1頭黃牛突然死亡之后,連續(xù)2年間歇性地出現(xiàn)黃牛零星死亡,1個月內(nèi)相繼死亡12頭,并不斷出現(xiàn)病畜。全村前后共發(fā)病89頭,死亡29頭,僅黃牛出現(xiàn)此病癥,呈零星散發(fā),四季均可發(fā)生,但多于秋末和冬春季節(jié)發(fā)生,成年牛較幼牛多發(fā),無性別差異。畜主細(xì)心者,發(fā)現(xiàn)牛食草減少或精神差,即請村獸醫(yī)治療,可治愈,否則待出現(xiàn)不食和頜下淋巴出現(xiàn)明顯腫脹(脖頸粗腫)癥狀、呼吸困難時報(bào)獸醫(yī)者,往往以死亡為轉(zhuǎn)歸。一般出現(xiàn)癥狀后幾小時或1~2 d即死亡。

    2 臨床癥狀及剖檢

    急性者往往無任何前期癥狀,于使役中或放牧后突然倒地,口吐白沫,耳梢、四肢冰涼,全身肌肉顫抖,四蹄蹬踢,來不及救治或于治療中死亡。有的前一天晚進(jìn)食尚好,第二天早上死于廄中。

    亞急性者,出現(xiàn)癥狀1~3 d后死亡,病程最長的一例達(dá)6 d死亡。體溫初期略高,38.0~38.5℃,后期正?;蚱?。流涎、廢食、反芻減少或停止,呼吸粗糲、急促,頜下淋巴腫大(最小有鵝蛋大),四肢震顫,脖頸長伸,最后倒地,呼吸極度困難死亡。

    3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

    3.1 涂片檢驗(yàn)

    取病畜的脾、淋巴、肝、腎、血液觸涂革蘭氏染色鏡檢,見單個、短鏈或成堆的球形、卵圓形排列整齊的葡萄球菌,革蘭氏染色陽性。

    3.2 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定

    3.2.1 普通培養(yǎng)

    無菌操作取肝、脾、淋巴制成乳液和混懸液,以鉑金耳取乳液、混懸液及血液分別劃線接種于營養(yǎng)瓊脂平板,牛血清培養(yǎng)基,置37℃,經(jīng)24~48 h培養(yǎng),檢查菌落,見幾種培養(yǎng)基均有灰白色至金黃色、不透明、邊緣整齊,大小在1~3 mm、光滑、具黏性和光澤、中央凸起的菌落生長。

    3.2.2 分離和鑒定培養(yǎng)

    無菌操作挑取單個典型菌落分別接種于新鮮羊血培養(yǎng)基、卻浦曼培養(yǎng)基、肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行分離及鑒定培養(yǎng),經(jīng)37℃,24~48 h,置需氧和厭氧環(huán)境中培養(yǎng)后觀察,見三種培養(yǎng)基上均有菌落生長,新鮮羊血平板上生長的菌落周圍呈β溶血環(huán),卻浦曼培養(yǎng)基的顏色由紅色變?yōu)槌赛S色,肉湯培養(yǎng)基于14 h后呈現(xiàn)均勻渾濁,表面長有淡黃色薄菌膜,管底有少量沉淀。

    3.2.3 血漿凝固酶和生化試驗(yàn)

    以滅菌吸管吸取0.5 mL肉湯培養(yǎng)菌液接種于2.5 mL兔血漿試管中,37℃水浴培養(yǎng)3~4 h,見紫紅色凝固塊,呈典型陽性反應(yīng)。

    生化試驗(yàn):分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,發(fā)酵甘露醇,還原硝酸鹽。

    我們的團(tuán)隊(duì)采用這種隧道內(nèi)游離輸尿管方法,結(jié)合經(jīng)典Wertheim手術(shù)的輸尿管內(nèi)側(cè)入路法,找到輸尿管入膀胱“輸尿管末端”的解剖標(biāo)志點(diǎn),切除2 cm的膀胱宮頸韌帶,ligasure離斷子宮神靜脈和膀胱下靜脈的陰道支,解剖無血管區(qū)的膀胱陰道側(cè)間隙(paravesico vaginal space, PVVS;圖2),完整向外推移輸尿管伴行,位于輸尿管下方的盆神經(jīng)叢;子宮頸主韌帶暴露在直視下,切除3 cm宮旁組織。2011年11月11日上述技術(shù)成功后,我們在國際手術(shù)同行透明監(jiān)督下,由探索性研究,延推2期注冊登記的標(biāo)準(zhǔn)化臨床研究。

    3.2.4 動物實(shí)驗(yàn)

    取0.5 mL肉湯培養(yǎng)液,行家兔耳靜脈接種(家兔來自東川區(qū)制藥廠實(shí)驗(yàn)用健康兔,體重1.3 kg)。靜脈接種觀察:于10 h左右出現(xiàn)癥狀,34 h死亡,剖檢見肝、腎、心臟、淋巴結(jié)膿腫,取臟器和血液涂片,染色、鏡檢,見與上述感染和培養(yǎng)相同的革蘭氏陽性葡萄球菌。

    3.2.5 結(jié)果

    據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)、分離、鑒定、生化試驗(yàn)以及動物實(shí)驗(yàn),本次病樣檢驗(yàn)結(jié)果為金黃色葡萄球菌感染。

    4 防治

    4.1 藥敏試驗(yàn)

    以紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)(藥敏試紙由昆明制藥股份有限公司生產(chǎn),批號:20111105)。試驗(yàn)結(jié)果:青霉素、鏈霉素、慶大霉素、SMZ(復(fù)方新諾明)高敏,抑菌圈>15 mm。因此,青霉素、鏈霉素、慶大霉素、SMZ為首選治療藥物。

    4.2 治療

    對有輕微癥狀如精神沉郁、食草異常者,給予抗菌消炎、強(qiáng)心補(bǔ)液,采用青霉素、葡萄糖鹽水、安鈉咖,配合維生素C、維生素B1靜脈注射,每天1次,連用3 d?;蛘邞c大霉素、SMZ配合維生素B族,肌肉注射,每天2次,連用5 d。同時輔以消炎清熱中藥(知母、白頭翁、黃芩、黃柏、金銀花、莪術(shù)、白術(shù)等)灌服。對其他健康牛,加人工鹽抗生素舔飼,人工鹽每頭牛100~150 g、SMZ每千克體重0.01~0.02 g、羥氨芐青霉素每千克體重0.01~0.015 g,每天1次,連喂5 d,同時供給清潔飲水。

    4.3 防控

    全村用石灰乳進(jìn)行廄舍、道路、環(huán)境消毒,發(fā)病戶用具、食槽用2%的燒堿消毒,糞便清除后堆積2個月以上使用。同槽健康畜采取人工鹽加抗菌素舔飼。加強(qiáng)牲畜飼養(yǎng)觀察,及時發(fā)現(xiàn)和處置感染個體。

    4.4 追蹤調(diào)查

    經(jīng)2~3個療程的治療和保健,1個月內(nèi)疫病得到有效控制。全村發(fā)病89頭,治愈60頭,治愈率67%,黃牛猝死癥停止發(fā)生。之后的3年內(nèi)該村黃牛未再發(fā)生此病。

    5 小結(jié)與討論

    (1)據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果,本次發(fā)生的黃牛猝死癥為金黃色葡萄球菌感染所致。金黃色葡萄球菌是致病菌,可產(chǎn)生多種毒素和酶,如溶血素、殺白血球素、凝固酶、溶纖維蛋白酶等,破壞機(jī)體細(xì)胞功能,干擾正常代謝,致機(jī)體出現(xiàn)膿腫病灶、敗血癥及中毒。據(jù)記載,金黃色葡萄球菌對牛一般只引起急、慢性乳房炎,本次致黃牛猝死,可能與細(xì)菌量及所分泌的毒素的毒力有關(guān),在黃牛體質(zhì)稍差的情況下,細(xì)菌毒素、敗血癥及頜下淋巴結(jié)急速腫脹等因素致呼吸困難,是引起猝死的主要因素。本次未作細(xì)菌毒力測定與分析,其原因有待進(jìn)一步研究。

    (2)對癥狀較緩和或早期發(fā)現(xiàn)的病畜,及時給予治療會收到良效。首選藥物為青霉素、鏈霉素、慶大霉素、土霉素、SMZ等進(jìn)行交叉使用,輔以中藥進(jìn)行消炎清熱效果更佳。同槽健康畜采取人工鹽加抗菌素舔飼,可防止疫病的發(fā)生。

    (3)近幾年來,東川區(qū)家畜“猝死癥”時有發(fā)生,據(jù)已知病因有:一是炭疽桿菌、巴氏桿菌等細(xì)菌所致;二是食入鼠藥或其他毒物所致。本次檢出金黃色葡萄球菌引起家畜猝死,應(yīng)予以重視。

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