GC法測(cè)定清眩片中薄荷腦的含量

陽文武，郭 婭，張德偉，肖 琦

（重慶萬州食品藥品檢驗(yàn)所，重慶萬州404000）

GC法測(cè)定清眩片中薄荷腦的含量

陽文武，郭 婭，張德偉，肖 琦

（重慶萬州食品藥品檢驗(yàn)所，重慶萬州404000）

目的建立測(cè)定清眩片中薄荷腦含量的氣相色譜方法。方法運(yùn)用氣相色譜法，采用DB－WAX毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25μm）；FID檢測(cè)器；柱溫為110℃；分流進(jìn)樣，分流比為50∶1。結(jié)果薄荷腦在0.04～1.00 mg·mL－1范圍內(nèi)與色譜峰面積呈良好的線性關(guān)系（r＝0.999 4），平均回收率為99.44%，RSD為1.2%（n＝6）。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于清眩片的質(zhì)量控制。

清眩片；氣相色譜法；薄荷腦

清眩片由川芎、白芷、薄荷、荊芥穗、石膏等五味藥組成，收載于《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑》第四冊(cè)，具有散風(fēng)解熱的功效，用于治療風(fēng)熱頭痛目眩，偏正頭痛，鼻塞牙痛。原標(biāo)準(zhǔn)收載有3個(gè)鑒別項(xiàng)，包括兩個(gè)化學(xué)鑒別和一個(gè)川芎、白芷的薄層鑒別［1］。薄荷作為方中的臣藥，沒有得到有效的檢測(cè)，檢驗(yàn)項(xiàng)目不夠全面，為更有效的控制其質(zhì)量，提高其內(nèi)在標(biāo)準(zhǔn)，本文采用氣相色譜法對(duì)方中薄荷的薄荷腦進(jìn)行含量測(cè)定。

1 儀器與試藥

安捷倫7890A氣相色譜儀包括氫焰離子化檢測(cè)器、SPH－300氫氣發(fā)生器（北京中惠普分析技術(shù)研究所）；SHZ－82水浴恒溫振蕩器（國(guó)旺實(shí)驗(yàn)儀器公司）；薄荷腦對(duì)照品（批號(hào)：110728－200506，供含量測(cè)定用）由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；乙酸乙酯為色譜純；氮?dú)饧兌取?9.999%，清眩片（重慶格瑞林藥業(yè)有限公司，批號(hào)分別為130601、130502、 130401，規(guī)格：復(fù)方）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件［2～5］色譜柱為DB－WAX毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25μm），載氣為氮?dú)?，流?.2 mL·min－1，進(jìn)樣量：1μL，分流比：50∶1，進(jìn)樣口溫度：150℃，檢測(cè)器溫度：230℃，柱溫：110℃，保持8 min。

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取薄荷腦對(duì)照品10 mg，加乙酸乙酯溶解并定容于10 mL量瓶中，制成1 mg·mL－1的對(duì)照品貯備液；精密量取貯備液1 mL至25 mL量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，制成每1 mL含40μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備［6～9］取本品10片，研細(xì)，混勻，稱取約0.5 g，精密稱定，置50 mL具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯25mL，密塞，稱定重量，振蕩（振蕩速度160次／min，室溫）5 min，再稱定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.2.3 陰性對(duì)照品溶液的制備 按處方工藝制備不含薄荷的樣品，同供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 專屬性試驗(yàn) 分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液各1μL，依法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果陰性對(duì)照品溶液無干擾，見圖1。

圖1 氣相色譜圖

2.3.2 線性關(guān)系考察 分別精密吸取質(zhì)量濃度為0.04、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mg·mL－1的薄荷腦對(duì)照品溶液1μL進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度進(jìn)行回歸，得方程為Y＝1.47×105X－1.24×104，r＝0.999 4（n＝6）。結(jié)果表明，薄荷腦進(jìn)樣量在0.04～1.0 mg·mL－1范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

2.3.3 精密度實(shí)驗(yàn) 精密吸取“2.2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次1μL，按上述色譜條件測(cè)定色譜峰面積，計(jì)算RSD＝0.4%（n＝6）。

2.3.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 分別取“2.2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液和“2.2.2”項(xiàng)下的供試品溶液，放置0、2、4、6、8、12 h后，注入氣相色譜儀，記錄峰面積。對(duì)照品溶液的RSD為1.0%，供試品溶液的RSD為1.1%，表明對(duì)照品溶液和供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.5 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批號(hào)樣品6份，按“2.2.2”項(xiàng)制備6份供試品溶液，分別測(cè)定薄荷腦含量，計(jì)算RSD＝0.8%，表明方法的重復(fù)性良好。

2.3.6 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取含量為0.166 mg／片的樣品6份，平均片重：0.458 5 g，分別加入薄荷腦對(duì)照品適量，按“2.2.2”項(xiàng)下方法處理，依法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量測(cè)定 取本品3批（批號(hào)分別為130601、130502、130401），按含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，外標(biāo)法計(jì)算供試品中薄荷腦的含量，結(jié)果分別為0.166、0.168、0.162 mg／片。

表1 薄荷腦加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

3 討論

因制法中已提取過薄荷的揮發(fā)油，故在提取方式的選擇時(shí)沒有采用揮發(fā)油測(cè)定法提?。?］。提取溶劑的選擇：分別用乙酸乙酯、石油醚（60～90℃）作為提取溶劑［4］，結(jié)果表明用乙酸乙酯為提取溶液所測(cè)得含量較高；提取方式的考察：對(duì)超聲處理5 min及振蕩5 min兩種提取方式進(jìn)行考察，結(jié)果表明以振蕩處理所測(cè)得含量較高；振蕩處理時(shí)間考察：分別用乙酸乙酯振蕩1、5、10 min，結(jié)果表明振蕩處理5 min所測(cè)得含量與振蕩處理10 min所測(cè)得含量相當(dāng)，故最終選擇用乙酸乙酯振蕩5 min來制備供試品溶液。

色譜條件中流速的確定，剛開始采用1.0 mL· min－1的流速，結(jié)果峰形不好，有拖尾，加大流速后，效果明顯改善，故最終采用1.2 mL·min－1的流速。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)——中藥成方制劑（第4冊(cè)）［S］.北京：國(guó)家藥典委員會(huì)，1994.

［2］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版（一部）［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：354，471.

［3］ 曾小平，陳新國(guó)，黃俊忠.GC法測(cè)定克癢敏醑中薄荷腦、冰片和水楊酸甲酯的含量［J］.中藥新藥與臨床藥理，2014，25（1）：74－76.

［4］ 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局.國(guó)家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編：中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)部分（內(nèi)科肝膽分冊(cè)）［S］.北京：國(guó)家藥品監(jiān)督管理局，2002.

［5］ 郭景瑞，王彥厚，王鳳山.GC法測(cè)定凝膠膏劑中薄荷腦的含量［J］.藥學(xué)研究，2012，31（3）：151－153.

［6］ 來國(guó)防，周蘭，程賓，等.氣相色譜法測(cè)定舒樂熱熨劑中4種揮發(fā)性成分［J］.藥學(xué)研究，2011，30（2）：86－88.

［7］ 李顯峰，張旭晶，畢雪艷，等.氣相色譜法測(cè)定金梔潔齦含漱液中薄荷腦的含量［J］.中南藥學(xué)，2010，8（7）：491－493.

［8］ 張婷，龔志成，馬虹英，等.復(fù)方薄荷腦微乳中薄荷腦的含量測(cè)定［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，29（9）：1224－1226.

［9］ 王天亮，諸葛俊.氣相色譜法同時(shí)測(cè)定活絡(luò)酊中樟腦、薄荷腦的含量［J］.中成藥，2010，32（9）：1644－1646.

Determ ination ofmenthol in Qingxuan Tablets by GC

YANGWen-wu，GUO Ya，ZHANG De-wei，XIAO Qi
（Wanzhou Institute for Food and Drug Control，Wanzhou 404000，China）

ObjectiveTo establish the gas chromatography assay for the determination ofmenthol in Qingxuan Tablets.MethodsThe gas chromatographywas equipped with FID detector，and a DB－WAX（30.0m×0.32mm，0.25μm）eapillary column was used，the column temperaturewas110℃，the split ratiowas50∶1.ResultsThe linear range ofmenthol was0.04～1.00 mg·mL－1（r＝0.999 4），and the average recovery ratewas99.44%，RSD was1.2%（n＝6）.ConclusionThe established method was simple，accurate and better repeatable，which can be used for the quality control of Qingxuan Tablets.

Qingxuan Tablets；GC；Menthol

R927.2

A

2095－5375（2014）08－0444－002

陽文武，男，研究方向：中藥材及中成藥的質(zhì)量控制，E－mail：oyww2008＠163.com