應(yīng)用同時(shí)蒸餾萃取與氣質(zhì)聯(lián)譜法測(cè)定天麻低極性組分

劉祥義 趙聲富 趙芬萍 仇全雷 程立君

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應(yīng)用同時(shí)蒸餾萃取與氣質(zhì)聯(lián)譜法測(cè)定天麻低極性組分

劉祥義1趙聲富2趙芬萍1仇全雷1程立君2

（1.西南林業(yè)大學(xué)，云南 昆明 650224；2.昭通宏聯(lián)天麻開(kāi)發(fā)有限公司，云南 昭通 657000）

研究利用同時(shí)蒸餾萃取裝置，以CH2Cl2為溶劑，提取鮮、干天麻樣品中的低極性組分，通過(guò)GC-MS測(cè)定，用峰面積歸一化法確定相對(duì)百分含量。結(jié)果表明：鮮干天麻中低極性組分及其含量的差異均較明顯，但也有共同的成分。鮮天麻中的低極性組分和含量均高于干天麻樣品中的低極性組分，鮮天麻中有較高含量的酯類(lèi)。

天麻；同時(shí)蒸餾萃?。粴赓|(zhì)聯(lián)譜；低極性組分；分析

天麻（Bl.）又名定風(fēng)草、離合草、仙人腳、鬼督郵、赤箭等，為蘭科、天麻屬（）多年生異養(yǎng)草本植物[1]，是古今醫(yī)家常用的名貴中藥，也是保健珍品，至今已有兩千多年的臨床應(yīng)用歷史。天麻有抗癲癇、抗驚厥、抗風(fēng)濕，鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痙、鎮(zhèn)痛，補(bǔ)虛即“三抗、三鎮(zhèn)、一補(bǔ)”之說(shuō)?，F(xiàn)代藥理研究表明，天麻對(duì)神經(jīng)中樞系統(tǒng)有鎮(zhèn)靜、抗驚厥、鎮(zhèn)痛作用，對(duì)心血管系統(tǒng)有強(qiáng)心作用，還有耐缺氧和增強(qiáng)免疫功能等作用[2,3]。

本研究采用同時(shí)蒸餾萃取儀分別提取干天麻和鮮天麻的低極性成分，利用氣質(zhì)聯(lián)譜技術(shù)對(duì)其進(jìn)行分析和鑒定[4,5]，并通過(guò)HPMSD化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算, 求得各化學(xué)成分在低極性成分中的相對(duì)含量，以期為天麻的鑒別及開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

天麻樣品采自云南省昭通市彝良縣羅家墳鄉(xiāng)，經(jīng)鑒定為烏天麻（Bl. f. glauca S.choco）。

1.2 儀器和試劑

儀器：HP5890/HP5973GC-MS型色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，同時(shí)蒸餾萃取設(shè)備。試劑：二氯甲烷，無(wú)水硫酸鈉，高純氮?dú)狻?/p>

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

（1）樣品處理。同一個(gè)樣品剔除霉變及生蟲(chóng)部分，洗凈后分為兩半，一半為鮮樣，另一半為干樣。鮮樣處理：將洗凈鮮天麻，晾干表面水分，切碎，備用。干樣處理：將洗凈的鮮天麻，按常規(guī)天麻加工方式蒸熟，切片，在60 ℃烘箱中烘干后，用研缽研細(xì)，備用。

（2）天麻低極性成分的提取。稱(chēng)取切碎的鮮天麻及研細(xì)的干天麻各100 g，放入500 mL圓底燒瓶中，加入100 mL純水，連接到同時(shí)蒸餾萃取裝置一端，120 ℃油浴加熱。另取20 mL二氯甲烷置于100 mL圓底燒瓶中，接在同時(shí)蒸餾萃取裝置的另一端，以65 ℃恒溫水浴加熱燒瓶，連續(xù)萃取3 h。二氯甲烷萃取液用5 g無(wú)水硫酸鈉干燥，微弱氮?dú)獯抵? mL。利用GC/MS 分析其低極性組分。

（3）GC-MS分析條件。①色譜條件為石英毛細(xì)管柱HP—FFAP（30 m×0.25 mm，0.25 μm)。程序升溫：從45 ℃開(kāi)始，保持5 min，以4 ℃/min的升溫幅度升到150 ℃，再以6 ℃/min的升溫幅度升到250 ℃，載氣為He，柱流量110 mL/min，進(jìn)樣口溫度250 ℃，分流比80∶1，進(jìn)樣量1.0 μL。② 質(zhì)譜條件：離子源EI源溫度230 ℃，電子能量70 eV，發(fā)射電流34.6 μA，倍增器電壓1 706 V，接口溫度230 ℃，溶劑延遲3 min，質(zhì)量范圍40～500 amu（m/z）。

2 結(jié)果與分析

干、鮮天麻樣品的總離子流見(jiàn)圖1、圖2，低極性組分測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

圖1 干天麻樣品總離子流圖

圖2 鮮天麻樣品總離子流圖

干天麻中共測(cè)出36個(gè)低極性組分，相對(duì)含量為84.20%。其中烴類(lèi)有31種，包括烷烴24個(gè)，相對(duì)含量為65.89%，烯烴1個(gè)，相對(duì)含量為1.51%，芳香烴3個(gè)，相對(duì)含量為5.20%；醇類(lèi)為α-紫羅蘭醇，相對(duì)含量為5.22%，酚類(lèi)是2,4-二（1,1-二甲基乙基）-苯酚，相對(duì)含量為2.90%；酯類(lèi)有硼酸三乙酯和鄰苯二甲酸二丁酯，相對(duì)含量為1.89%；羧酸為十四酸，相對(duì)含量為1.35%（表1）。

鮮天麻樣品中的低極性組分共有35個(gè)，相對(duì)含量為86.98%。其中烷烴類(lèi)有24個(gè)，相對(duì)含量為63.13%；醇類(lèi)為α-紫羅蘭醇，相對(duì)含量為7.27%，酚類(lèi)是4-甲基苯酚和2,4-二（1,1-二甲基乙基）-苯酚，相對(duì)含量為6.12%；酯類(lèi)有8種，包括硫磺酸酯5個(gè)，硼酸三乙酯、6-十四烷基硫酸丁酯、苯乙酸異丁酯各1個(gè)，相對(duì)含量為11.59%（表1）。

表1 天麻樣品中低極性組分

組分名稱(chēng)相對(duì)峰面積/%組分名稱(chēng)相對(duì)峰面積/%組分名稱(chēng)相對(duì)峰面積/% 干樣鮮樣干樣鮮樣干樣鮮樣 甲苯 1.71…硫磺酸-2-丙基十三酯… 1.72硫磺酸-丁基十四酯…3.26 三乙基硼酸酯 0.740.582,4,6-三甲基-辛烷1.29…2,6,10-三甲基-十五烷2.43… 2,4-二甲基庚烷 3.881.562,3,5-三甲基-癸烷2.30…2,6,10,14-四甲基-十五烷0.87… 4-甲基辛烷 3.272.474-甲基十二烷… 0.58十六烷3.275.26 p-對(duì)二甲苯 2.53…8-甲基-十七烷1.44…硫磺酸-2-丙基十五酯…0.88 o-對(duì)二甲苯 0.96…10-甲基-二十烷… 1.61十七烷3.643.89 a--蒎烯 1.51…硫磺酸-丁基十二酯… 1.64十八烷…2.03 3,6-二甲基癸烷10.107.87α-紫羅蘭醇5.22 7.27十九烷…1.05 3,7-二甲基癸烷 1.300.66硫磺酸-2-丙基十四酯… 1.226-十四烷基硫酸丁酯…0.55 5-甲基-5-丙基-壬烷 0.911.26十四烷1.07…二十五烷2.01… 4-甲基苯酚…2.435-甲基十四烷… 0.88二十八烷1.451.98 2,6,6-三甲基辛烷 1.061.542-甲基十四烷… 2.47三十四烷0.890.92 3,3-二甲基-辛烷 2.09…3-甲基十四烷… 2.5610-甲基-十九烷2.00… 2,6,10,15-四甲基十七烷 0.65…十五烷7.6914.27三十一烷0.59… 2,4-二（1,1-二甲基乙基）-苯酚 2.903.69十二烷0.69 2.54苯乙酸異丁酯…1.73 5-丙基十二烷…1.53二十七烷1.53 2.45四十四烷0.670.52 2-甲基-十一烷 4.38…7-甲基十五烷… 1.53十四酸1.35… 2-甲基-十二烷 4.42…四十三烷… 1.12鄰苯二甲酸二丁酯1.15…

注：天麻合計(jì)峰面積干樣為84.20%，鮮樣為87.98%。

3 結(jié) 論

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，鮮干天麻低極性成分組成具有較大的差異；在揮發(fā)性成分組成上有17個(gè)共同的成分；鮮天麻中含量多大于干天麻。鮮天麻中含有較高的硫磺酸酯類(lèi)成分，而硫磺酸酯具有較好的保健功能。在加工干天麻的過(guò)程中，由于有蒸煮和烘干過(guò)程，其中低沸點(diǎn)物質(zhì)有所揮發(fā)，使同種組分在加工過(guò)程中受到較大損失，硫磺酸酯類(lèi)和烷基硫酸酯則損失殆盡；干天麻中烴類(lèi)數(shù)量和含量增加，表明經(jīng)加工后的干天麻與鮮天麻氣味差異較大。說(shuō)明要保留鮮天麻低極性成分，合理保存和加工是非常重要的。

應(yīng)用同時(shí)蒸餾萃取裝置提取天麻中的低極性組分，具有效率高，便于操作的優(yōu)點(diǎn)，結(jié)合GC-MS測(cè)定，可為天麻的鑒別及開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

[1] 《全國(guó)草藥匯編》編委會(huì), 全國(guó)草藥匯編:下冊(cè)[M]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 1971: 165-166.

[2] 楊世林, 蘭進(jìn), 徐錦堂. 天麻的研究進(jìn)展[J]. 中草藥, 2000, 31(1): 66-69.

[3] 岑信釗. 天麻化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中藥材, 2005, 28(10): 958-961.

[4] 羅盛旭, 梁振益, 楊雪蕊. 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析茶樹(shù)油的成分[J]. 化學(xué)分析計(jì)量, 2003, 12(5): 37-39.

[5] 李?lèi)? 靜寶元. 葡萄柚精油的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].食品研究與發(fā), 2009, 30(12): 128-131.

Simultaneous distillation-extraction and GC-MS analysis of

Liu xiangyi1, Zhao fenping1, Zhao shenfu2, Qiu quanlei1,Cheng lijun2

(1. Southwest Forestry University, Kunming 650224, Yunnan；2. Zhaotong Honglian Gastrodia Development Limited Company, Zhaotong 650070,Yunnan)

Low-polarity components were extracted from fresh and dryby simultaneous distillation and extraction with CH2Cl2solvent, and determined by GC-MS. The result showed that the contents of low-polarity components in dry and freshhave a significant difference. The content of low-polarity components in fresh samples was higher than that in the dry samples. Freshhave a higher level of ester.

; simultaneous distillation-Extraction; GC-MS; low-polarity components

S646

A

2095-0934（2014）04-214-03