胰島素樣生長(zhǎng)因子在宮頸癌中的研究進(jìn)展

張 嵐(綜述),張軼清(審校)

(蕪湖市第二人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科,安徽 蕪湖 241000)

腫瘤病因?qū)W一直是醫(yī)學(xué)研究中的熱門領(lǐng)域，各類細(xì)胞因子在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起到的作用逐漸被發(fā)現(xiàn)并被深入探討，胰島素樣生長(zhǎng)因子(insulin-like growth factor，IGF)便是此類研究的重點(diǎn)之一，其龐大家族中的各類成員在生理、病理環(huán)節(jié)中承擔(dān)著不同的作用，在一定程度上調(diào)節(jié)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲過程，在宮頸癌中也是如此?，F(xiàn)將IGF家族成員的功能及其在宮頸癌中的研究進(jìn)展綜述。

1 IGF家族簡(jiǎn)介

IGF是一種重要的肽類激素，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、代謝、增殖及分化的作用，IGF系統(tǒng)包括IGF-1、IGF-2、IGF1型受體(IGF-1 recepter，IGF-1R)、IGF-2R及多種胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP)、IGFBP水解酶等。

IGF-1是由70個(gè)氨基酸組成的具有自分泌特點(diǎn)的單鏈多肽，基因位于12q22～24.1上，其在機(jī)體大多數(shù)組織中表達(dá)，循環(huán)中的IGF-1主要由肝細(xì)胞合成，其生物學(xué)功能包括胰島素樣促代謝作用和促有絲分裂作用。IGF-2是由67個(gè)氨基酸組成的偏酸性單鏈多肽，基因位于11p15上，具有促細(xì)胞有絲分裂、刺激細(xì)胞增殖及DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄、刺激組織器官的生長(zhǎng)和分化、抑制細(xì)胞凋亡的作用。IGF-1R是IGF系統(tǒng)的功能受體，介導(dǎo)IGF-1和大部分IGF-2的功能，對(duì)IGF-1的親和力最高。IGF-1R是四聚體糖蛋白，胞外區(qū)與配體結(jié)合后激活細(xì)胞內(nèi)的酪氨酸蛋白激酶，引起一系列酶促反應(yīng)及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，起到促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、引起并維持細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化、促腫瘤發(fā)生、抗細(xì)胞凋亡的作用。IGF-2R是單鏈跨膜糖蛋白，無酪氨酸蛋白激酶作用，可介導(dǎo)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，對(duì)IGF-2親和力最大，主要參與新合成的溶酶體酶的分選和運(yùn)輸，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、促進(jìn)分化，攝取和降解IGF-2，誘導(dǎo)多種特異性應(yīng)答，如與G蛋白相互作用激活絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)信號(hào)通路。

目前發(fā)現(xiàn)的IGFBP共有6種，按照發(fā)現(xiàn)的時(shí)間順序分別命名為IGFBP-1～I(xiàn)GFBP-6，其與IGF相關(guān)的生物學(xué)功能主要是調(diào)節(jié)IGF的生物利用度，即通過與IGF受體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合IGF、抑制IGF促進(jìn)細(xì)胞增殖與分化的作用。IGFBP水解酶可將IGFBP裂解成與IGF低親和力的片段，體內(nèi)多種蛋白水解酶都具有這一活性，如激肽釋放酶、組織蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMPs)等。

2 IGF在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用

IGF促細(xì)胞增殖的功能主要由IGF-1R介導(dǎo)，IGF-2R則降解循環(huán)中的IGF-2。IGF-1、IGF-2及IGF-1R在多種類型的腫瘤中頻繁表達(dá)并與腫瘤的惡性程度及淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)。IGF-2R發(fā)揮的生物學(xué)效應(yīng)則與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展呈負(fù)相關(guān)。

IGF-1R與IGF結(jié)合后，胞內(nèi)區(qū)激活MAPK、磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B，PI3K/AKT)信號(hào)通路，促進(jìn)MMP的表達(dá)和激活，上調(diào)血漿尿激酶、尿激酶型纖溶酶激活物(urokinase-type plasminogen activator，uPA) 的表達(dá)，促進(jìn) uPA與受體結(jié)合，從而促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)的降解，增加惡性腫瘤細(xì)胞的侵襲力。體外研究及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，IGF-1R單克隆抗體中和IGF-1R后，可降低游離IGF-1R的水平，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[1]。

IGF-2R起抑制腫瘤的作用，IGF-2R的缺乏可促進(jìn)溶酶體酶分泌、ECM降解，增加腫瘤細(xì)胞的侵襲力，促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。igf2r/m6p基因是IGF-2R的編碼基因，是近年來備受關(guān)注的抑癌基因，igf2r/m6p基因缺失、突變導(dǎo)致IGF-2R 合成減少或空間構(gòu)象改變，與配體不能結(jié)合或結(jié)合力降低，引起循環(huán)中IGF-2水平增高、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transfer grower factor-β1，TGF-β1)的激活大大減少，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞過度生長(zhǎng)、增殖。

IGFBP同樣參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，在癌細(xì)胞株、腫瘤患者的血清及腫瘤組織中都可以檢測(cè)到IGFBP的變化。Liu等[2]在前列腺癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，IGFBP-3能上調(diào)p21的表達(dá)，參與p21與細(xì)胞周期蛋白的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，使細(xì)胞停止在G1期，從而抑制細(xì)胞增殖。Kawasaki等[3]認(rèn)為，IGFBP-3由野生型抑癌基因p53誘導(dǎo)產(chǎn)生，可作為p53的下游基因參與抑癌過程。Fu等[4]的實(shí)驗(yàn)表明，IGFBP-6能夠不依賴IGF誘導(dǎo)直腸癌LIM1215細(xì)胞系的凋亡，抑制腫瘤生長(zhǎng)。

3 IGF與宮頸癌的關(guān)系

3.1IGF系統(tǒng)與宮頸癌發(fā)病的關(guān)系 眾所周知，人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是宮頸癌的主要致病因素。宮頸癌是高危型HPV感染宿主基因而導(dǎo)致的病毒性癌癥，癌變過程與病毒致病蛋白E6、E7的表達(dá)相關(guān)，這些蛋白可以使p53、pRb蛋白滅活，導(dǎo)致細(xì)胞持續(xù)增殖、增加DNA突變風(fēng)險(xiǎn)、最終導(dǎo)致癌癥的發(fā)生。

近年來，IGF家族是否增加HPV的易患性及其在HPV病毒持續(xù)感染中的作用逐漸被揭示。Pacholska-Bogalska等[5]研究IGF-1 P1啟動(dòng)子多態(tài)性與宮頸癌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，證明IGF-1基因的調(diào)控可影響正常上皮組織增生、增加HPV感染后致癌的可能性；經(jīng)核苷酸序列分析IGF-1基因在不同腫瘤類型中的表達(dá)，認(rèn)為P1啟動(dòng)子第383號(hào)位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性C>T可能成為判斷宮頸癌發(fā)展及宮頸上皮組織持續(xù)感染的有力標(biāo)志。Harris等[6]研究發(fā)現(xiàn)，高IGF-1/IGFBP-3比例可增加HPV的致癌性，IGF系統(tǒng)影響著高危型HPV的生物學(xué)行為。然而，Schaffer 等[7]檢測(cè)329例患者及621例對(duì)照人員發(fā)現(xiàn)，IGF-1表達(dá)增加可減少HPV-16.18型感染后的致癌風(fēng)險(xiǎn)，但I(xiàn)GFBP-3與HPV感染無關(guān)。上述IGF-1介導(dǎo)的作用在<30歲的婦女中表現(xiàn)明顯，說明年輕患者中IGF-1的水平與宮頸癌前病變——宮頸上皮內(nèi)瘤樣變程度呈負(fù)相關(guān)，這與之前的報(bào)道[5-6]不相符，因此IGF-1在宮頸癌中的作用尚需進(jìn)一步研究。Steller等[8]在宮頸癌細(xì)胞株中檢測(cè)到IGF-2 mRNA而未檢測(cè)到IGF-1 mRNA，IGF-2與宮頸癌的關(guān)系較IGF-1密切。

研究表明IGF-1R可下調(diào)p53基因產(chǎn)物的表達(dá)[9]，因而推斷HPV感染后的宮頸癌其IGF-1R的表達(dá)增加促使p53蛋白水平減少。Kuramoto等[10]使用免疫組織化學(xué)的方法測(cè)定臨床宮頸癌患者宮頸組織中IGF-1R的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在宮頸上皮內(nèi)瘤樣變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)Ⅲ級(jí)及浸潤(rùn)癌患者組織中IGF-1R表達(dá)顯著增高，且表達(dá)強(qiáng)度隨病變的發(fā)展而增加，有趣的是，IGF-1R在CINⅠ和CINⅡ級(jí)病變的基底層幾乎不表達(dá)，但在CINⅢ級(jí)及浸潤(rùn)癌組織中全層均勻表達(dá)，因此認(rèn)為IGF-1R的高表達(dá)模式可作為CIN分級(jí)的參考。Serrano等[11]分別測(cè)定HPV陽性及HPV陰性的宮頸癌細(xì)胞株中IGF-1及不同胰島素受體(insulin receptor，IR)亞型的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)HPV陽性組表達(dá)IGF-1R、IR-A、IR-B、IR/IGF-1R等多種受體，但HPV陰性組僅表達(dá)IR-A；PI3K和 MAPK信號(hào)途徑在兩種細(xì)胞株中都被激活，但未發(fā)現(xiàn)與腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移及侵襲有關(guān)。

2007年，Serrano等[12]檢測(cè)16例低度鱗狀上皮內(nèi)病變(low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL)患者、24例高度鱗狀上皮內(nèi)病變(high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL)患者、23例宮頸癌患者及42例對(duì)照者的IGF-1 mRNA、IGF-2 mRNA、IGFBP-3 mRNA、IGF-1R mRNA的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)對(duì)照組IGF-1 mRNA的表達(dá)水平與其他組無明顯差異；IGF-2 mRNA在LSIL中的表達(dá)低于對(duì)照組，但在HSIL與宮頸癌患者中的表達(dá)與對(duì)照組一致；IGF-1R mRNA在宮頸癌及HSIL患者中的表達(dá)低于對(duì)照組；IGFBP-3 mRNA在宮頸癌患者中的表達(dá)也低于對(duì)照組。說明IGF-1R和 IGFBP-3的下調(diào)可能增加癌癥發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn)。3年后，Serrano等[13]又通過酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法分別檢測(cè)LSIL、HSIL、宮頸癌、對(duì)照組中IGF-2及IGFBP-3的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)IGF-2在宮頸癌患者中的表達(dá)顯著低于對(duì)照組；IGFBP-3在HSIL中的表達(dá)顯著高于對(duì)照組，且不受HPV感染滴度的影響；IGFBP-3在LSIL和宮頸癌中的表達(dá)與對(duì)照組比較無明顯差異，說明宮頸癌進(jìn)展與IGF系統(tǒng)的變化有關(guān)而與HPV感染的濃度無關(guān)，IGFBP-3在宮頸癌致病中的作用值得進(jìn)一步研究。

3.2IGF系統(tǒng)與宮頸癌發(fā)展和轉(zhuǎn)移的關(guān)系 腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的基本要素和先決條件是瘤細(xì)胞有不斷增殖的能力。IGF-2與IGF-1R結(jié)合后激活MAPK和 PI3K/AKT 信號(hào)通路，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞增殖和抗細(xì)胞凋亡。Mathur等[14]認(rèn)為，通過宮頸活檢測(cè)定IGF-2表達(dá)有助于宮頸癌及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的檢出。一項(xiàng)研究表明，宮頸癌患者血清IGF-2 水平與對(duì)照組相比顯著升高，并且血清IGF-2水平顯示出以下趨勢(shì)：持續(xù)宮頸癌組>晚期宮頸癌組>早期宮頸癌組>持續(xù)CIN組，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)宮頸癌術(shù)后宮頸癌中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)C與IGF-2存在顯著的正相關(guān)，而VEGF-C與IGFBP-3存在負(fù)相關(guān)[15]，血清VEGF-C上調(diào)對(duì)于宮頸癌轉(zhuǎn)移的早期診斷非常有意義，VEGF-C與IGF-2可共同促進(jìn)早期惡性細(xì)胞的增殖和淋巴轉(zhuǎn)移。

多個(gè)體外及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，IGF-1R單克隆抗體可以降低IGF-1和IGF-2促腫瘤生長(zhǎng)和分化的作用，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，并導(dǎo)致其大量凋亡[16-18]。Burtrum等[19]研究發(fā)現(xiàn)，有些癌基因通過提高IGF-1R基因的活性而發(fā)揮致癌作用，IGF-1R基因的表達(dá)是這些癌基因發(fā)揮致癌作用的先決和必備條件。

K-Cl協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)子(K-Cl cotransporter，KCC)是一種存在于細(xì)胞膜上的膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在細(xì)胞體積調(diào)節(jié)、上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)及離子穩(wěn)態(tài)等方面起重要作用[20]。目前已發(fā)現(xiàn)4種編碼人類KCC基因的遺傳密碼，即KCC1-KCC4[21]。實(shí)驗(yàn)證明，KCC是人類宮頸癌生長(zhǎng)和侵襲的重要調(diào)節(jié)器[22]。因此，有學(xué)者從IGF系統(tǒng)與KCC的相關(guān)性中探討其在宮頸癌侵襲與發(fā)展中的作用，Zhang等[23]研究發(fā)現(xiàn)，加入IGF-2的宮頸癌細(xì)胞株中的KCC1 mRNA和蛋白表達(dá)量顯著增加，且表現(xiàn)出明顯的劑量-時(shí)間依賴性，但如果加入特定的通路阻滯劑阻止細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶MAPK(extracellular-signal regulated kinase 1/2MAPK,ERK1/2MAPK)和PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，則不能產(chǎn)生上述作用，說明IGF-2是通過ERK1/2MAPK和 PI3K/AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑使宮頸癌組織中的KCC1基因表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)與侵襲。Chen等[24]認(rèn)為，IGF-1可激發(fā)KCC4在活體組織中的功能，因而阻斷KCC4的表達(dá)可能為IGF-1依賴的腫瘤轉(zhuǎn)移患者提供可行的治療方向。

近年來，腫瘤淋巴管生成與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系逐漸成為眾多學(xué)者關(guān)注的熱點(diǎn)，目前已證實(shí)的淋巴管生成因子有VEGF-C、VEGF-D、VEGF受體3等。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤淋巴管的生成增加了淋巴道轉(zhuǎn)移的發(fā)生機(jī)會(huì)，腫瘤細(xì)胞首先侵入毛細(xì)淋巴管，然后聚集形成瘤栓進(jìn)入下一級(jí)淋巴管和局部淋巴結(jié)，形成淋巴道轉(zhuǎn)移[25]。宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機(jī)制探討也成為婦科腫瘤領(lǐng)域研究中的一個(gè)新方向。Meit等[26]的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明IGF-2及其受體可以誘導(dǎo)活體淋巴管生成，進(jìn)一步通過免疫組織化學(xué)、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和芯片分析在淋巴管內(nèi)皮發(fā)現(xiàn)了IGF受體，因而IGF-2及其受體可能是淋巴管新生的直接作用因子。由此可見，IGF系統(tǒng)中存在重要的淋巴管生成因子，通過誘導(dǎo)腫瘤淋巴管生成的途徑促進(jìn)宮頸癌腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。

3.3IGF系統(tǒng)與宮頸癌預(yù)后及風(fēng)險(xiǎn)判斷的關(guān)系 Huang等[27]探討IGF-1系統(tǒng)在早期宮頸癌中的意義，試圖發(fā)現(xiàn)IGF-1系統(tǒng)成員在宮頸癌預(yù)后預(yù)測(cè)中的作用。該試驗(yàn)選擇72例早期宮頸癌患者，采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清中總IGF-1及IGFBP-3的水平、免疫熒光法檢測(cè)組織中IGF-1R的水平，發(fā)現(xiàn)高表達(dá)IGF-1R的患者5年生存率顯著下降，說明檢測(cè)癌組織中IGF-1R的水平可以作為預(yù)后判斷的指標(biāo)，而術(shù)前血清IGF-1、IGFBP-3的水平不能預(yù)測(cè)患者復(fù)發(fā)或死亡。

張利群等[28]通過測(cè)定正常對(duì)照組人群、CIN組患者治療前、宮頸癌組患者治療前及治療后6～18個(gè)月后患者血清IGF-2的水平，發(fā)現(xiàn)宮頸癌組患者血清IGF-2水平較CIN組及對(duì)照組人群顯著升高，且IGF-2水平與宮頸癌的臨床分期呈正相關(guān)，宮頸癌患者治療后血清IGF-2水平較治療前顯著降低，認(rèn)為血清IGF-2水平與宮頸癌的發(fā)生相關(guān)，可以用于判斷宮頸癌預(yù)后及治療療效。Klopp等[29]的試驗(yàn)表明，IGF-2的表達(dá)在宮頸癌復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者中存在顯著差異。Slipicevic等[30]的試驗(yàn)同樣證明了IGF-2及IGFBP-3在判斷婦科惡性腫瘤預(yù)后中有重要作用。

腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移與血管生成有關(guān)，Landt等[31]認(rèn)為IGF-1及IGFBP-3可作為宮頸癌預(yù)后的預(yù)測(cè)指標(biāo)。Henríquez-Hernández等[32]通過對(duì)60例宮頸癌放療患者的隨訪發(fā)現(xiàn)，高微血管密度與IGF-1R的高表達(dá)密切相關(guān)，臨床分期及對(duì)放療的敏感性是影響患者預(yù)后最重要的因素，對(duì)放療敏感但癌組織中IGF-1R高表達(dá)及高微血管密度增高是預(yù)后不良的重要指標(biāo)。Lloret等[33]研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測(cè)B細(xì)胞淋巴瘤2蛋白、高微血管密度及IGF-1R對(duì)宮頸癌放療患者預(yù)后的判斷有重要意義，這三者高表達(dá)與無瘤生存率顯著相關(guān)，預(yù)示較差的臨床結(jié)局。

此外，IGF-2 mRNA結(jié)合蛋白3(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein,IMP3)，即胚胎腫瘤蛋白的表達(dá)與侵襲性癌癥高度相關(guān)，已成為近年來肺癌、胰腺癌、宮頸癌等的一種新的生物標(biāo)志[34]。Lu等[35]探討了CINⅡ和Ⅲ級(jí)患者中IMP3是否可以作為預(yù)測(cè)侵襲性鱗狀細(xì)胞癌的一個(gè)生物標(biāo)志，試驗(yàn)選擇1249例宮頸上皮無增生、CIN及侵襲性鱗狀細(xì)胞癌患者研究IMP3的表達(dá)情況，對(duì)宮頸活檢為CINⅡ和Ⅲ的 710例患者進(jìn)行了無癌生存的進(jìn)一步評(píng)估，通過用小干擾RNA改變 IMP3表達(dá)的方法探討IMP3 在細(xì)胞增殖以及HeLa 宮頸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移中的作用：與 CINⅠ級(jí)或無增生的宮頸組織相比，IMP3不僅在侵襲性鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)顯著增加，而且在后來并發(fā)侵襲性鱗狀細(xì)胞癌的CIN Ⅲ級(jí)患者中其表達(dá)也明顯增加；在宮頸切除術(shù)后的隨訪中，僅在IMP3陽性的CINⅡ級(jí)和Ⅲ級(jí)的患者中發(fā)現(xiàn)了侵襲性癌，而在IMP3陰性的CINⅡ級(jí)和Ⅲ級(jí)的患者中未查出侵襲性癌；宮頸癌細(xì)胞中IMP3表達(dá)下降可使細(xì)胞遷移明顯減少，而細(xì)胞增殖并無改變。IMP3在宮頸細(xì)胞從增生發(fā)展為侵襲性鱗狀細(xì)胞癌的過程中起著關(guān)鍵的作用，其可以用于判斷發(fā)展為有侵襲性癌風(fēng)險(xiǎn)的CIN患者的初步診斷。

4 小 結(jié)

IGF系統(tǒng)在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展等中發(fā)揮著重要的作用。對(duì)于宮頸癌高危人群行HPV聯(lián)合IGF檢測(cè)可能對(duì)腫瘤的發(fā)生具有更高的預(yù)見性，而在已確診的宮頸癌患者中進(jìn)行此類因子檢測(cè)可協(xié)助判斷預(yù)后，為臨床是否需行進(jìn)一步治療提供指導(dǎo)。同樣，IGF系統(tǒng)各類因子及其相關(guān)抗體的研發(fā)運(yùn)用，可能在宮頸癌的分子治療中起到作用。因此，IGF系統(tǒng)在宮頸癌的診斷、預(yù)后及靶向治療中具有廣泛的應(yīng)用前景。

[1] Shen MR,Hsu YM,Hsu KF,etal.Insulin like growth factor 1 is a potent stimulator of cervical cancer cell invasiveness and proliferation that is modulated by alphavbeta3 integrin signaling[J].Carcinogenesis,2006,27(5):962-971.

[2] Liu B,Lee KW,Anzo M,etal.Insulin-like growth factor-binding protein-3 inhibition of prostate cancer growth involves suppression of angiogenesis[J].Oncogene,2007,26(12):1811-1819.

[3] Kawasaki T,Nosho K,Ohnishi M,etal.IGFBP3 promoter methylation in colorectal cancer:relationship with microsatellite instability,CpG Island methylator phenotype and p53[J].Neoplasia,2007,9(12):1091-1098.

[4] Fu P,Thompson J A,Bach LA.Promotion of cancer cell migration:an insulin like growth factor (IGF)-independent action of IGF-binding protein-6[J].J Biol Chem,2007,282(31):22298-22306.

[5] Pacholska-Bogalska J,Józefiak A,Nowak W,etal.Association of the IGF-1 promoter P1 polymorphism with risk of cervical cancer[J].Eur J Gynaecol Oncol,2011,32(4):393-398.

[6] Harris TG,Burk RD,Yu H,etal.Insulin-like growth factor axis and oncogenic human papillomavirus natural history[J].Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2008,7(1):245-248.

[7] Schaffer A,Koushik A,Trottier H,etal.Biomarkers of Cervical Cancer Risk Study Team.Insulin-like growth factor-I and risk of high-grade cervical intraepithelial neoplasia[J].Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2007,16(4):716-722.

[8] Steller MA,Delgado CH,Bartels CJ,etal.Overexpression of the insulin-like growth factor-I receptor and autocrine stimulation in hu-man cervical cells[J].Cancer Res,1996,56(8):1761-1765.

[9] Xiong L,Kou F,Yang Y,etal.A novel role for IGF-1R in p53-mediated apoptosis through translational modulation of the p53-Mdm2 feedback loop[J].Cell Biol,2007,178(6):995-1007.

[10] Kuramoto H,Hongo A,Liu YX,etal.Immunohistochemical evaluation of insulin-like growth factor I receptor status in cervical cancer specimens[J].Acta Med Okayama,2008,62(4):251-259.

[11] Serrano ML,Sánchez-Gómez M,Bravo MM,etal.Differential expression of IGF-I and insulin receptor isoforms in HPV positive and negative human cervical cancer cell lines[J].Horm Metab Res,2008,40(10):661-667.

[12] Serrano ML,Sánchez-Gómez M,Bravo MM.Insulin-like growth factor system gene expression in cervical scrapes from women with squamous intraepithelial lesions and cervical cancer[J].Growth Horm IGF Res,2007,17(6):492-499.

[13] Serrano ML,Sánchez-Gómez M,Bravo MM.Cervical scrapes levels of insulin-like growth factor-Ⅱ and insulin-like growth factor binding protein 3 in women with squamous intraepithelial lesions and cervical cancer[J].Horm Metab Res,2010,42(13):977-981.

[14] Mathur SP,Landen CP,Datta SM,etal.Insulin-like growth factor Ⅱ in gynecological cancers:a preliminary study[J].Am J Reprod Immunol,2003,49(2):113-119.

[15] Mathur SP,Mathur RS,Gray EA,etal.Serum vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) as a specific biomarker for advanced cervical cancer:Relationship to insulin-like growth factor Ⅱ (IGF-Ⅱ),IGF binding protein 3 (IGF-BP3) and VEGF-B[J].Gynecol Oncol,2005,98(3):467-483.

[16] Shen MR,Hsu YM,Hsu KF,etal.Insulin-like growth factor 1 is a potent stimulator of cervical cancer cell invasiveness and proliferation that is modulated by αvβ3 integrin signaling[J].Carcinogenesis,2006,27(5):962-971.

[17] Pavelic K,Bukovic D,Pavelic J.The role of insulinlike growth factor 2 and its receptors in human tumors[J].Mol Med,2002,8(12):771-780.

[18] Maloney EK,Mclaughlin JL,Dagdigian NE,etal.An anti-insulin-like growth factor I receptor antibody that is a potent inhibitor of cancer cell proliferation[J].Cancer Res,2003,63(16):5073-5083.

[19] Burtrum D,Zhu Z,Lu D,etal.A fully human monoclonal antibody to the insulinlike growth factor I receptor blocks ligand-dependent signaling and inhibits human tumor growth in vivo[J].Cancer Res,2003,63(24):8912-8921.

[20] Lauf PK,Adragna NC.K-Cl cotranspor:t properties and molecular mechanism[J].Cell Physiol Biochem,2000,10(5/6):341-354.

[21] Delpire E,Mount DB.Human and murine phenotypes associated with defects in cation-chloride cotransport[J].Annu Rev Physiol,2002,64:803-843.

[22] Shen MR,Chou CY,Hsu KF,etal.KCl cotransport is an important modulator of human cervical cancer growth and invasion[J].J Biol Chem,2003,278(41):39941-39950.

[23] Zhang S,Wu X,Jiang T,etal.The up-regulation of KCC1 gene expression in cervical cancer cells by IGF-II through the ERK1/2MAPK and PI3K/AKT pathways and its significance[J].Eur J Gynaecol Oncol,2009,30(1):29-34.

[24] Chen YF,Chou CY,Wilkins RJ,etal.Motor protein-dependent membrane trafficking of KCl cotransporter-4 is important for cancer cell invasion[J].Cancer Res,2009,69(22):8585-8593.

[25] McCarter MD,Clarke JH,Harken AH,etal.Lymphangiogenesis is pivotal to the trials of a successful cancer metastasis[J].Surgery,2004,135(2):121-124.

[26] Bj?rndahl M,Cao R,Nissen LJ,etal.Insulin-like growth factors 1 and 2 induce lymphangiogenesis in vivo[J].Proc Natl Acad Sci U S A,2005,102(43):15593-15598.

[27] Huang YF,Shen MR,Hsu KF,etal.Clinical implications of insulin-like growth factor 1 system in early-stage cervical cancer[J].Br J Cancer,2008,99(7):1096-1120.

[28] 張利群,李楷濱,王立巖,等.檢測(cè)宮頸癌患者血清胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅱ的臨床意義[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2006,10:1153-1155.

[29] Klopp AH,Jhingran A,Ramdas L,etal.Gene expression changes in cervical squamous cell carcinoma after initiation of chemoradiation and correlation with clinical outcome[J].Int J Radiat Oncol Biol Phys,2008,71(1):226-236.

[30] Slipicevic A,?y GF,Askildt IC,etal.Diagnostic and prognostic role of the insulin growth factor pathway members insulin-like growth factor-Ⅱ and insulin-like growth factor binding protein-3 in serous effusions[J].Hum Pathol,2009,40(4):527-537.

[31] Landt S,Wehling M,Heidecke H,etal.Prognostic significance of angiogenic factors in uterine cervical cancer[J].Anticancer Res,2011,31(8):2589-2595.

[32] Henríquez-Hernández LA,Lloret M,Pinar B,etal.BCL-2,in combination with MVP and IGF-1R expression,improves prediction of clinical outcome in complete response cervical carcinoma patients treated by radiochemotherapy[J].Gynecol Oncol,2011,122(3):585-589.

[33] Lloret M,Lara PC,Bordón E,etal.MVP expression is related to IGF1-R in cervical carcinoma patients treated by radiochemotherapy[J].Gynecol Oncol,2008,110(3):304-307.

[34] Walter O,Prasad M,Lu S,etal.IMP3 is a novel biomarker for triple negative invasive mammary carcinoma associated with a more aggressive phenotype[J].Hum Pathol,2009,40(11):1528-1533.

[35] Lu D,Yang X,Jiang NY,etal.IMP3,a new biomarker to predict progression of cervical intraepithelial neoplasia into invasive cancer[J].Am J Surgical Pathol,2011,35(11):1638-1645.