“納米細(xì)菌”與牙周病

王斯瑋 綜述;楊 嵐，劉建國(guó) 審校

(貴州遵義563000:1.遵義醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)院;2.遵義醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院修復(fù)科;3.貴州省高等學(xué)?？谇患膊⊙芯刻厣攸c(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)

牙周病是一種慢性感染性疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜。目前已證實(shí)，牙菌斑生物膜的細(xì)菌及其產(chǎn)物是引發(fā)牙周病的始發(fā)因素。牙菌斑生物膜是牙齒表面的微生物菌落，主要由細(xì)菌及聚合物基質(zhì)組成，并可礦化形成牙石成為牙周病重要的局部促進(jìn)因素。牙石不僅妨礙口腔衛(wèi)生的實(shí)施，其表面的多孔隙結(jié)構(gòu)還有利于細(xì)菌毒素的吸附，從而為菌斑生物膜的進(jìn)一步聚集提供理想的表面;并可對(duì)牙齦組織產(chǎn)生一定刺激。目前盡管對(duì)牙石的化學(xué)成分有所了解，但對(duì)于其礦化機(jī)制尚不明確。近年來(lái)，有學(xué)者在腎臟、動(dòng)脈粥樣硬化斑塊、卵巢腫瘤的沙粒小體、鈣化胎盤(pán)、唾液、齦溝液、髓石、牙石及牙菌斑中均發(fā)現(xiàn)了一種超微結(jié)構(gòu)的礦化顆粒，由于該物質(zhì)具有獨(dú)特的性質(zhì)將其命名為“納米細(xì)菌”(Nanobacteria，NB)。然而，關(guān)于“納米細(xì)菌”的生物學(xué)行為仍存在爭(zhēng)議，有學(xué)者認(rèn)為，“納米細(xì)菌”缺少可信的核酸證據(jù)，而是由礦物質(zhì)離子和非礦化大分子化合物組成，因此將其命名為納米礦化顆粒(Calcifying Nanoparticles，CNPs)更為恰當(dāng)。本文就“納米細(xì)菌”的研究現(xiàn)狀及其與牙周病之間的關(guān)系作一綜述。

1 “納米細(xì)菌”概述

1.1 “納米細(xì)菌”的發(fā)現(xiàn)及特征

20世紀(jì)80年代Kajander等在進(jìn)行哺乳動(dòng)物體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)了一種超微結(jié)構(gòu)的細(xì)菌，革蘭氏染色為陰性，無(wú)莢膜及鞭毛，呈球狀或球桿狀，可通過(guò)微孔直徑0.1～0.4 μm的濾菌膜;進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，該細(xì)菌含有16sRNA基因序列，故將其歸屬于α-2蛋白質(zhì)菌屬(該菌屬還包括巴爾通氏菌和布魯氏菌);又由于其直徑低于理論細(xì)菌的下限(約20～500 nm)，因此又將其命名為“納米細(xì)菌”［1］?！凹{米細(xì)菌”生長(zhǎng)緩慢，倍增時(shí)間約為3 d，在pH 7.4的生理性鈣磷濃度環(huán)境中能形成羥基磷灰石碳酸鹽結(jié)晶并產(chǎn)生堅(jiān)硬礦化外殼;同時(shí)，該菌還具有一定的細(xì)胞毒性，可引起細(xì)胞的溶解和凋亡［2］。

1.2 “納米細(xì)菌”的致病性及其機(jī)制

1.2.1 “納米細(xì)菌”可引起細(xì)胞內(nèi)外礦化

多項(xiàng)研究表明:“納米細(xì)菌”可引起細(xì)胞內(nèi)外礦化，并作為成核核心引起鈣化病變，可能是導(dǎo)致結(jié)石等多種病理性鈣化疾病的重要原因?！凹{米細(xì)菌”所產(chǎn)生的堅(jiān)硬礦化外殼具有很強(qiáng)的抵抗力，高溫、強(qiáng)酸等不能將之殺滅，普通抗生素也需在高于正常臨床劑量下才對(duì)其有抑制作用，普通培養(yǎng)基和常規(guī)檢測(cè)方法均難以對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)及檢測(cè)［3］。用能量色散X射線光譜儀(EDX)對(duì)“納米細(xì)菌”的礦化外殼進(jìn)行分析顯示，其化學(xué)成分與羥基磷灰石相似［4］。Kajander等首先在腎結(jié)石中發(fā)現(xiàn)“納米細(xì)菌”，并根據(jù)科赫法則驗(yàn)證了“納米細(xì)菌”在過(guò)飽和溶液中可作為成核核心引起腎結(jié)石［5-6］。有學(xué)者在冠心病等心血管疾病的研究中發(fā)現(xiàn)，“納米細(xì)菌”可通過(guò)多種途徑進(jìn)入血液循環(huán)，并能附著于血管壁緩慢生長(zhǎng);且可通過(guò)其異常的鈣化能力使血液中鈣離子濃度升高，從而導(dǎo)致動(dòng)脈斑塊和血栓的形成［7］。另有研究發(fā)現(xiàn)，膽結(jié)石中也存在“納米細(xì)菌”，并利用“納米細(xì)菌”成功建立了膽結(jié)石動(dòng)物模型［8-9］。此外，在鈣化胎盤(pán)、卵巢腫瘤的沙粒小體、牙石、髓石中均有“納米細(xì)菌”檢出的相關(guān)報(bào)道［10-13］。

1.2.2 “納米細(xì)菌”的細(xì)胞毒作用

“納米細(xì)菌”的另一個(gè)特點(diǎn)是具一定的細(xì)胞毒作用，可引起細(xì)胞的溶解和凋亡。Ciftcioglu等利用MTT分析法及乳酸脫氫酶(LDH)釋放實(shí)驗(yàn)證明，“納米細(xì)菌”能感染人及哺乳動(dòng)物的3T6成纖維細(xì)胞并使之溶解和凋亡，其機(jī)制主要是通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞胞作用導(dǎo)致細(xì)胞空泡性變，在此過(guò)程中“納米細(xì)菌”可誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生大量的炎性介質(zhì)(如白細(xì)胞介素、熱休克蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶等)，從而導(dǎo)致被感染組織的細(xì)胞死亡［2］。Kajander等［14］認(rèn)為，“納米細(xì)菌”作為致炎因子能通過(guò)其細(xì)胞毒作用損傷腎小管的上皮細(xì)胞，受損的組織再生后則可導(dǎo)致多囊腎的形成。有研究者在13例多囊腎患者的囊液中檢測(cè)到超過(guò)75%含有脂多糖(LPS)的成分，約有85%的患者檢測(cè)出“納米細(xì)菌”，其中男性檢出率高于女性;同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，“納米細(xì)菌”與多囊腎中抗衣原體抗體LPS及巴爾通氏菌存在交叉反應(yīng)，四環(huán)素或檸檬酸鹽可抑制該細(xì)菌的生長(zhǎng)［15］。Shen等在3型前列腺炎動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn):大鼠注射“納米細(xì)菌”后1～2周發(fā)生了急性炎癥，4周后轉(zhuǎn)為慢性;分別在建模1、4、8周注射“納米細(xì)菌”2周后，各實(shí)驗(yàn)組大鼠血清中的 IL-1β和TNF-α水平均高于對(duì)照組［16］。Tsurumoto［17］、石慶新等［18］在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清中也檢測(cè)到了“納米細(xì)菌”［17-18］。

1.3 關(guān)于“納米細(xì)菌”的爭(zhēng)議

“納米細(xì)菌”的發(fā)現(xiàn)及其獨(dú)特的特性雖為病理性鈣化相關(guān)疾病的研究提供了新的思路，但仍存在一定的意見(jiàn)分歧。學(xué)者們通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)對(duì)“納米細(xì)菌”的生物學(xué)行為進(jìn)行研究后認(rèn)為:磷脂可以結(jié)合并促進(jìn)鈣磷酸鹽晶體的形成，所形成的晶體不僅具有與“納米細(xì)菌”相似的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)，還能象活生物那樣在體外進(jìn)行復(fù)制并增殖;而“納米細(xì)菌”不僅體積太小難以界定為理論上的細(xì)菌，而且從“納米細(xì)菌”中所檢測(cè)出的核酸序列實(shí)際是來(lái)自實(shí)驗(yàn)室的污染［19-20］。因此“納米細(xì)菌”是否能界定為細(xì)菌受到了極大的質(zhì)疑。

一種新的觀點(diǎn)認(rèn)為，所謂“納米細(xì)菌”是由礦物質(zhì)離子和非礦化大分子化合物組成，尚無(wú)足夠的證據(jù)證明其是一種獨(dú)立的生命體。首先，無(wú)生命活性的生物大分子所形成的納米粒子在結(jié)構(gòu)和形態(tài)學(xué)上都與“納米細(xì)菌”相似;其次，無(wú)生命活性生物大分子對(duì)帶電荷的分子如離子、碳水化合物、脂類(lèi)、核酸等也具有很強(qiáng)的結(jié)合力，當(dāng)?shù)V物質(zhì)離子過(guò)飽和時(shí)即可形成結(jié)晶、鈣化顆?；蚋鼮閺?fù)雜的結(jié)構(gòu)［21-23］。另外，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，礦物質(zhì)離子與非礦化大分子復(fù)合物中的蛋白主要是胎球蛋白A，其次是載脂蛋白、白蛋白等;免疫印跡法檢測(cè)顯示，針對(duì)“納米細(xì)菌”的特異性抗體與血清中的白蛋白、胎球蛋白A等均存在交叉反應(yīng)［24-26］。

根據(jù)以上觀點(diǎn)和相關(guān)研究結(jié)果，有學(xué)者認(rèn)為“納米細(xì)菌”并非生物體，只是一種蛋白—礦物復(fù)合物，因?yàn)閺闹鲃?dòng)脈瓣和股動(dòng)脈瓣鈣化斑塊、牙結(jié)石中分離培養(yǎng)的“納米細(xì)菌”并未檢測(cè)出16sRNA序列［12，27-28］。最先提出“納米細(xì)菌”概念的 Kajander、Ciftcioglu等也表示，由于缺乏滿意的16sRNA序列，將其命名為鈣化納米顆粒更為恰當(dāng);但納米礦化顆粒與病理性鈣化之間的關(guān)系仍需進(jìn)行深入研究和探討［7，29-30］。Jahnen-Dechent等報(bào)道，在腎結(jié)石中也可檢測(cè)到胎球蛋白，從而認(rèn)為胎球蛋白A可能作為病理性鈣化的抑制劑而具有監(jiān)管作用，該物質(zhì)的缺乏與人和鼠軟組織鈣化密切相關(guān)［26］。Hamano等通過(guò)對(duì)73位糖尿病及慢性腎臟疾病患者的胎球蛋白礦物質(zhì)復(fù)合物進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)后也認(rèn)為，胎球蛋白A與骨外病理性鈣化相關(guān)［31］。Alexander等研究發(fā)現(xiàn)，納米礦化顆?？勺鳛槌珊撕诵男纬纱丶癄罱Y(jié)構(gòu)，其形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)上與頭部、子宮腫瘤的圖像具有相似性［32］。

2 “納米細(xì)菌”與牙周病及其他口腔疾病的關(guān)系

2.1 “納米細(xì)菌”與牙周病相關(guān)性

“納米細(xì)菌”與牙周病之間的相關(guān)性提出主要基于幾個(gè)方面:①流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)“納米細(xì)菌”的檢出率和牙石的患病率均為男性高于女性［33］;②鹽酸四環(huán)素及乙二胺四乙酸(EDTA)可抑制“納米細(xì)菌”的復(fù)制，而這些藥物用于牙周病治療業(yè)已多年［3］;③開(kāi)發(fā)的含二磷酸鈉、磷酸二鈉、氯磷酸二鈉、硝酸稼、乙二胺四乙酸的抗“納米細(xì)菌”牙膏、漱口水對(duì)牙石的形成及牙周病均有預(yù)防效果［34］。

Zhang等認(rèn)為，來(lái)自血清的齦溝液可能存在“納米細(xì)菌”，而且牙石形成所需的堿性環(huán)境及鈣化過(guò)程與“納米細(xì)菌”相似，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn):在牙周病患者的牙石和齦溝液中均提取出“納米細(xì)菌”，其表面相關(guān)物質(zhì)為鈣、磷酸鹽，與牙石類(lèi)似;“納米細(xì)菌”通過(guò)受體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用可導(dǎo)致細(xì)胞空泡性變、細(xì)胞凋亡，并能誘導(dǎo)磷脂酰絲氨酸作為“納米細(xì)菌”及其他大分子的結(jié)合位點(diǎn)，從而引起更多的“納米細(xì)菌”聚集以及細(xì)胞外基質(zhì)的礦化［12］。張松梅、黃小慶等也報(bào)道，在慢性牙周炎患者的齦溝液和牙石中均檢測(cè)出“納米細(xì)菌”［35-36］。以上結(jié)果提示，“納米細(xì)菌”能在牙表面形成生物礦化中心，并與其周?chē)拟}及磷酸鹽結(jié)合而形成牙石。

此外，口腔是一個(gè)與外界交通、多種菌群混合居住的復(fù)雜環(huán)境，且含有豐富的血管，因此全身性疾病與口腔之間易通過(guò)血液循環(huán)發(fā)生交叉感染。已有文獻(xiàn)報(bào)道，牙周病和冠心病存在相關(guān)性［37］，而且在冠心病患者的相關(guān)樣本中也可檢測(cè)到“納米細(xì)菌”，那么“納米細(xì)菌”是否在兩者之間具有橋梁作用，值得進(jìn)一步探討［38］。

2.2 “納米細(xì)菌”與口腔其他疾病的關(guān)系

Badry等報(bào)道，在復(fù)發(fā)性唾液腺結(jié)石中可檢測(cè)到“納米細(xì)菌”［39］。曾勁峰等從髓石中分離培養(yǎng)、鑒定出“納米細(xì)菌”，并認(rèn)為該物質(zhì)對(duì)牙髓細(xì)胞有細(xì)胞毒性，這種階段性病理性鈣化標(biāo)志物可為髓石的防治、提高根管治療療效提供新的切入點(diǎn)［40］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，齲病的流行在有牙石的患者中顯著低于無(wú)牙石患者，據(jù)此有理論認(rèn)為:“納米細(xì)菌”可能參與齲壞牙釉質(zhì)的修復(fù)過(guò)程，可礦化缺損的牙體組織;因此須權(quán)衡“納米細(xì)菌”形成牙石導(dǎo)致牙周病及其在牙釉質(zhì)修復(fù)、齲病預(yù)防之間的利弊［41］。另有學(xué)者還提出，“納米細(xì)菌”可懸浮在云層中，并通過(guò)空氣傳播途徑引起全球范圍的口腔病理性鈣化疾病(牙石，髓石，唾液腺等)的流行［41-42］。

3 小結(jié)

近年來(lái)，關(guān)于“納米細(xì)菌”的研究已受到愈來(lái)愈多學(xué)者的關(guān)注，但其是否能界定為生物及其引起病理性鈣化的機(jī)制仍需進(jìn)一步研究，可通過(guò)加大樣本量、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、免疫機(jī)制研究等多種手段來(lái)揭示“納米細(xì)菌”的特性;針對(duì)其特殊的理化性質(zhì)，還可在檢測(cè)方法上尋找新的更為準(zhǔn)確快速的方法對(duì)其進(jìn)行鑒定。而有關(guān)“納米細(xì)菌”與口腔疾病，特別是牙周病的關(guān)系，目前研究尚少，仍需更多的證據(jù)證明“納米細(xì)菌”牙菌斑、唾液、齦溝液、髓石中的存在及其作用原理。如果“納米細(xì)菌”作為牙周病病因?qū)W能被確立，那么對(duì)牙周病乃至心血管疾病的防治將有重要意義。

［1］Kajander EO，Ciftcioglu N.Nanobacteria:an alternative mechanism for pathogenic intra-and extracellular calcification and stone formation［J］.Proc Nati Acad Sci SUA，1998，95(14):8274-8279.

［2］ift ?ioglu N，Kajander EO.Interaction of nanobacteria with cultured mammalian cells［J］.Pathophysiology，1998，4(4):259-270.

［3］?iftcio?lu N，Miller-Hjelle MA，Hjelle JT，et al.Inhibition of nanobacteria by antimicrobial drugs as measured by a modified microdilution method［J］.Antimicrob Agents Chemother，2002，46(7):2077-2086.

［4］Ciftcioglu N，McKay DS，Mathew G，et al.Nanobacteria:fact or fiction?Characteristics，detection，and medical importance of novel self-replicating，calcifying nanoparticles［J］.J investig Med，2006，54(7):385-394.

［5］Kajander EO，Ciftcioglu N，Bjorklund M，et al.Nanobacteria:A infectious cause for kidney stone formation［J］.Kidney Int，1999，56(5):1893-1898.

［6］Kajander EO，Ciftcioglu N，Aho K，et al.Characteristics of nanobacteria and their possible role in stone formation［J］.Urol Res，2003，31(2):47-54.

［7］Kajander EO.Nanobacteria-propagating calcifying nanoparticles［J］.Lett appl Microbiol，2006，42(6):549-552.

［8］Li Y，Wen Y，Yang Z.et al.Culture and identification of nanobacteria in bile［J］.Zhonghua Yi Xue Za Zhi，2002，82(22):1557-1560.

［9］Wang L，Shen W，Wen J，et al.An animal model of black pigment gallstones caused by nanobacteria［J］.Dig Dis Sci，2006，51(6):1126-1132.

［10］Guo Y，Zhang D，Lu H，et al.Association between calcifying nanoparticles and placental calcification［J］.Int J Nanomedicine，2012，7:1679-1686.

［11］Pasquinelli G，Papadopulos F，Nigro M.Nanobacteria and psammoma bodies:ultrastructural observations in a case of pathological placental calcification［J］.Ultrastruct Pathol，2010，34(6):344-350.

［12］Zhang SM，Tian F，Jiang XQ，et al.Evidence for calcifying nanoparticles in gingival crevicular fluid and dental calculus in periodontitis［J］.J Periodontol，2009，80(9):1462-1470.

［13］Yang F，Zeng J，Zhang W，et al.Evaluation of the interaction between calcifying nanoparticles and human dental pulp cells:a preliminary investigation［J］.Int J Nanomedicine，2011，6:13-18.

［14］Kajander EO，Ciftcioglu N，Miller-Hjelle M A，et al.Nanobacteria:controversial pathogens in nephrolithiasis and polycystic kidney disease［J］.Cur Opin Nephrol Hypertens，2001，10(3):445-452.

［15］Hjelle JT，Miller-Hjelle MA，Poxton IR，et al.Endotoxin and nanobacteria in polycystic kidney disease［J］.Kidney Int，2000，57(6):2360-2374.

［16］Shen X，Ming A，Li X，et al.Nanobacteria:a possible etiology for type III prostatitis［J］.J Urol，2010，184(1):364-369.

［17］Tsurumoto T，Matsumoto T，Yonekura A，et al.Nanobacterialike particles in human arthritic synovial fluids［J］.J Proteome Res，2006，5(5):1276-1278.

［18］石慶新，於青峰，涂茜，等.類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者血清中納米細(xì)菌檢測(cè)及鑒定［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2013，1(2):85-86.

［19］Cisar JO，Xu DQ，Thompson J，et al.An alternative interpretation of nanobacteria-induced biomineralization［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2000，97(21):11511-11515.

［20］Schlieper G，Krüger T，Heiss A，et al.A red herring in vascular calcification:‘nanobacteria’are protein-mineral complexes involved in biomineralization［J］.Nephrol Dial Transplant，2011，26(11):3436-3439.

［21］Martel J，Young JD.Purported nanobacteria in human blood as calcium carbonate nanoparticles［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2008，105(14):5549-5554.

［22］Young JD，Martel J，Young L，et al.Putative nanobacteria represent physiological remnants and culture by-products of normal calcium homeostasis［J］.PLoS One，2009，4(2):e4417.

［23］Young JD，Martel J，Young L，et al.Characterization of granulations of calcium and apatite in serum as pleomorphic mineraloprotein complexes and as precursors of putative nanobacteria［J］.PLoS One，2009，4(5):e5421.

［24］Raoult D，Drancourt M，Azza S，et al.Nanobacteria are mineralo fetuin complexes［J］.PLoS pathog，2008，4(2):e41.

［25］Wu CY，Martel J，Young D，et al.Fetuin-A/Albumin-mineral complexes resembling serum calcium granules and putative nanobacteria:demonstration of a dual Inhibition-seeding concept［J］.PLOS One，2009，4(11):e8058.

［26］Jahnen-Dechent W，Heiss A，Sch?fer C，et al.Fetuin-A regulation of calcified matrix metabolism［J］.Circ Res，2011，108(12):1494-1509.

［27］Barba I，Villacorta E，Bratos-Perez M A，et al.Aortic valvederived calcifyng nanoparticles:no evidence of life［J］.Rev Esp Cardiol(Engl Ed)，2012，65(9):813-818.

［28］Sommer AP，Tsurumoto T.Vascular cemeteries formed by biological nanoparticles［J］.J Nanoparticle Res，2013，15(4):1-9.

［29］Sharma OP.Nanobacteria-Not life forms but nano-particulate nidi for calcification［J］.Indian J Microbiol，2007，47(1):92.

［30］Ciftcioglu N，McKay DS.Pathological calcification and replicating calcifying-nanoparticles:general approach and correlation［J］.Pediatr Res，2010，67(5):490-499.

［31］Hamano T，Matsui I，Mikami S，et al.Fetuin-mineral complex reflects extraosseous calcification stress in CKD［J］.J Am Soc Nephrol，2010，21(11):1998-2007.

［32］Emelyanov A，Emelyanov K，Kuznetсova E.Cranberry bioactive substances composition change due to resources-saving processing［J］.Biochemistry and Biophysics，2013，1(1):1-6.

［33］Demir T.Is there any relation of nanobacteria with periodontal diseases?［J］.Med Hypotheses，2008，70(1):36-39.

［34］Kolahi J.Anti-nanobacterial therapy for prevention and control of periodontal diseases［J］.Dent Hypotheses，2010，1(1):4-8.

［35］張松梅，田菲，李靜，等.對(duì)納米細(xì)菌在牙結(jié)石形成過(guò)程中的作用的初步研究［J］.中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，2009，21(2):152-155.

［36］黃小慶，莫莉基，陳文霞.牙周炎患者唾液中納米細(xì)菌的分離、培養(yǎng)和初步鑒定［J］.實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志，2010，26(5):612-614.

［37］葛頌，吳亞菲，劉天佳，等.中、重度牙周炎與冠心病的研究［J］.華西口腔醫(yī)學(xué)雜志，2008，26(3):262-266.

［38］?iftio?lu N，McKay DS，Kajander EO.Association between nanobacteria and periodontal disease［J］.Circulation，2003，108(8):e58-e59.

［39］Badray A，Mokbel M，Mofty IE，et al.Nanobacteria:an infectious cause for salivary stone formation and recurrence［J］.Clinical Medicine Insights:Ear，Nose and Throat，2010，3:17-21.

［40］Zeng J，Yang F，Zhang W，et al.Association between dental pulp stones and calcifying nanoparticles［J］.Int J Nanomedicine，2011，6:109-118.

［41］Sommer AP.Wickramasinghe NC.Function and possible provenance of primordial proteins-PartⅡ:Microorganism aggregation in clouds triggered by climate change［J］.J Proteome Res，2005，4:180-184.

［42］Kolahi J，Shahmoradi M，Sadreshkevary M.Nanobacteria in clouds can spread oral pathologic calcifications around the world ［J］.Dental Hypotheses，2012，3(4):138.