乳癖消現(xiàn)代制劑及其質(zhì)量控制方法的研究進展

張 鵬，趙 鑫，范國榮， (.安徽中醫(yī)學院，安徽 合肥 30000；.第二軍醫(yī)大學藥學院藥物分析教研室，上海市藥物(中藥)代謝產(chǎn)物研究重點實驗室，上海 00433)

乳癖消是由鹿角、蒲公英、昆布、天花粉、雞血藤、三七、赤芍、海藻、漏蘆、木香、玄參、牡丹皮、夏枯草、連翹和紅花等十五味中藥組成，具有軟堅散結(jié)，活血消痛，清熱解毒的功效[1]。主要用于痰熱互結(jié)所致的乳癖、乳癰、乳房結(jié)節(jié)(數(shù)目不等、大小形態(tài)不一、質(zhì)地柔軟)，或產(chǎn)后乳房結(jié)塊(紅熱疼痛)、乳腺增生、乳腺炎等患者。原方多采用湯劑服用，患者依從性差。本文對近年用乳癖消開發(fā)出的現(xiàn)代劑型及其質(zhì)量控制技術進行綜述，為乳癖消進一步開發(fā)研究提供參考。

1 乳癖消片劑

片劑系指提取物、提取物加飲片細粉，或飲片細粉與適宜輔料混勻壓制的制劑，抑或用其他適宜方法制成的圓片狀或異形片狀的固體制劑[2]。乳癖消片劑是目前市場上銷售的主要劑型，其療效穩(wěn)定，服用方便，經(jīng)濟效益好。文獻報道乳癖消片質(zhì)量研究多采用高效液相色譜法，薄層掃描法，碘量法等方法對乳癖消片劑中的丹皮酚、芍藥苷、人參皂苷Rg1和碘等進行測定，以檢測乳癖消片的組成及質(zhì)量。

許亞玲等[3]采用高效液相色譜法，對全國31省、市、自治區(qū)的96批不同劑型的乳癖消樣品進行分析，以Waters C18柱為分析柱，乙腈-1%乙酸為流動相(33:67)，流速0.8 ml/min，274 nm為檢測波長。結(jié)果表明，丹皮酚在0.008 528～0.076 752 μg范圍內(nèi)線性關系良好，平均回收率為102.2 %，RSD=1.63%。各批次間丹皮酚含量較低且差異較大，丹皮酚在膠囊劑中含量較高，在薄膜衣片中的含量大于糖衣片中的含量。表明不同劑型因為生產(chǎn)工藝不同，對有效成分的含量影響較大。在測定丹皮酚的同時，還對96批乳癖消樣品中是否非法摻入甾體激素類藥物進行了檢測，以Diomaond C18柱為分析柱，乙腈-水為流動相(24:76)，醋酸潑尼松，醋酸可的松，醋酸地塞米松為對照品，在254 nm波長下進行測定。96批樣品中未發(fā)現(xiàn)甾體激素類藥物。該方法采用PDA檢測器進行定性鑒別，專屬性強，操作方便，對檢測中藥劑型中是否摻雜了化學類藥物提供了參考[4]。

孫金元[5]采用高效液相色譜法，以 Zorbax eclipse XDB C18柱為分析柱，甲醇-水為流動相(42:58)，甲醇為提取溶劑，對3批乳癖消樣品中的丹皮酚進行測定，測得平均加樣回收率為96.4 %，RSD=1.8 %。測得三批樣品中丹皮酚的含量均大于0.14 mg/g，符合中國藥典的相關規(guī)定，但并未進一步指出影響含量差異的因素。姜云云等[6]采用高效液相色譜法測定乳癖消片中的芍藥苷的含量，以Diamonsil C18柱為分析柱，乙腈-水為流動相(20:80)，檢測波長為230 nm，N2000工作站進行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果表明芍藥苷在4.0～16 μg/ml范圍內(nèi)線性關系良好，平均加樣回收率為99.75 %，RSD=1.07%。不同批次樣品中每片芍藥苷的平均含量大于0.38 mg，芍藥苷出峰時間小于10 min，方法簡便、可靠。徐國兵等[7]采用RP-HPLC測定三七皂苷R1和人參皂苷Rg1的含量，以Kromasil C18柱為分析柱，乙腈-0.05 %磷酸溶液為流動相(20:80)，檢測波長為203 nm。5批樣品中每片三七皂苷R1平均含量均大于0.24 mg，每片人參皂苷Rg1平均含量均大于1.38 mg。與常規(guī)薄層掃描法相比，該方法樣品處理簡單，樣品出峰時間短，重復性好，更適合用于乳癖消片的質(zhì)量控制指標。

劉汶[8]采用高效液相色譜法對乳癖消片中的芍藥苷含量測定則以CapcellPak柱為分析柱，乙腈-水為流動相(18:82)，檢測波長為230 nm，樣品采用50 %甲醇超聲30 min，過濾后直接進樣分析。甲醇提取后樣品中干擾峰較少，流動相比例調(diào)整后與中國藥典中提供的鹽溶液相比更加簡便，對色譜柱損害小，延長了使用壽命。李洪書等[9]采用高效液相色譜法，以AgilentEclipse XDB-C18柱為分析柱，乙腈-0.05 %磷酸溶液為流動相(20:80)，在203 nm波長下測定乳癖消片中三七皂苷R1和人參皂苷Rg1的含量。樣品前處理簡單，僅以水為提取溶劑，微波回流提取后離心取上清液，經(jīng)微孔濾膜過濾后直接進樣分析。該方法具有節(jié)省溶劑、成本低、效率高、環(huán)保等優(yōu)點。

傅海珍等[10]采用薄層掃描法測定3批乳癖消片中人參皂苷Rg1的含量。樣品經(jīng)萃取，顯色后在525 nm、700 nm波長下進行反射鋸齒掃描。測得每片人參皂苷Rg1的平均含量大于0.79 mg，但是發(fā)現(xiàn)不同廠家的樣品中人參皂苷Rg1含量差異較大，考慮藥材質(zhì)量是影響有效成分的主要因素之一。張振秋等[11]采用薄層掃描法，測定了6批乳癖消片中人參皂苷Rg1的含量。6批乳癖消中人參皂苷Rg1平均含量均大于5.53 mg/g。曹愛民等[12]采用薄層掃描法對3批乳癖消片中人參皂苷Rg1含量進行測定。樣品處理較復雜，索式提取后進行萃取，顯色，在525 nm、700 nm波長下測定。樣品中每片人參皂苷的平均含量大于0.56 mg。雖然萃取法去除了干擾組分，使得顯色斑點圓整，測得結(jié)果準確，重現(xiàn)性好，但是與高效液相色譜法相比，其耗時長，溶劑消耗大，對環(huán)境友好程度低。隨著高效液相色譜法的普及，薄層掃描法將被高效液相色譜法所取代，薄層掃描法更多的將用于化學成分的定性鑒別。

陳寧寧等[13]采用碘量法測定乳癖消片中活性成分碘，測定方法中以組方中用量大的海藻和昆布的總碘為定量分析對象，樣品經(jīng)灰化，顯色后，用0.01 mol/L硫代硫酸鈉液滴定，淀粉為指示劑。測得5批乳癖消片中每片總碘量在0.197 6 ～0.384 1 mg。該方法切入點獨特，海藻、昆布用量大且為治療乳房疾病的常用藥物，此法為控制乳癖消中的質(zhì)量提供了新的參考指標。

2 乳癖消顆粒劑

顆粒劑系指以提取物與適宜的輔料或飲片細粉制成具有一定粒度的顆粒狀制劑?？煞譃榭扇茴w粒、混懸顆粒、泡騰顆粒[14]。乳癖消顆粒劑的質(zhì)量控制多采用高效液相色譜法，以芍藥苷、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、連翹苷、哈巴俄苷、人參皂苷Rb1、去氫木香內(nèi)酯等為含量測定對象，反映乳癖消顆粒劑的質(zhì)量。

姜文紅等[15]采用高效液相色譜法測定乳癖消顆粒中的人參皂苷Rg1，以Diamonsil C18柱為分析柱，乙腈(A)-水(B)進行線性梯度洗脫(0～35 min，A：19%～100%，B：81%～0%)，結(jié)合DAD檢測器掃描分析，確定在203 nm波長下進行測定。樣品經(jīng)甲醇超聲提取后進樣分析，測得5批樣品中人參皂苷Rg1的平均含量大于1.88 g/袋。甲醇提取后樣品雜質(zhì)峰少，操作簡單，分析時間短，但是所采用的分析柱需耐純水相。

曹旦華等[16]采用高效液相色譜法同時測定乳癖消顆粒中芍藥苷、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、連翹苷、哈巴俄苷、人參皂苷Rb1、去氫木香內(nèi)酯的含量，以Alltima C18柱為分析柱，乙腈(A)-水(B)為流動相，梯度洗脫(0～105 min，A：10%～95%，B：90%～5%)，203 nm為檢測波長。樣品經(jīng)甲醇超聲提取后萃取，最后經(jīng)甲醇復溶后進樣分析?；鞓巳芤褐?種標準品的線性關系良好，R值均大于0.999，平均回收率均大于97.95 %，精密度、分離度、穩(wěn)定性良好。但樣品單針分析時間大于100 min，在實際測定中其條件還可以進行進一步優(yōu)化，縮短分析時間，提高效率。

蒲艷春等[17]采用高效液相色譜法測定了乳癖消顆粒中的三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量。以CAPCELL PAK C18柱為分析柱，乙腈(A)-水(B)為流動相，梯度洗脫(0～60 min，A：19%～36%，B：81%～64%)，檢測波長為203 nm。3種標準品的回收率均大于96%，RSD均小于2%。在分析皂苷的樣品處理中采用甲醇進行提取，已成為常見的提取方法，其提取的樣品中雜質(zhì)峰少，但顆粒劑中的輔料是否會對測定產(chǎn)生影響，是否存在人為添加的可能仍需進一步考察。

3 乳癖消膠囊劑

膠囊劑系指將飲片用適宜方法加工后，加入適宜輔料充于空心膠囊或密封于軟質(zhì)囊材中的制劑?？煞譃橛材z囊、軟膠囊(膠丸)和腸溶膠囊等[18]。乳癖消膠囊劑多為硬膠囊和軟膠囊，其中軟膠囊產(chǎn)品還未上市。

乳癖消膠囊的質(zhì)量控制多采用高效液相色譜法和薄層掃描法，主要檢測膠囊中的芍藥苷和人參皂苷Rg1的含量。

謝艷麗等[19]采用高效液相色譜法測定了不同批次乳癖消膠囊中的芍藥苷的含量。采用Hypersil BDS C18柱為分析柱，乙腈-0.1 %磷酸溶液為流動相(13:87)，檢測波長為230 nm。樣品經(jīng)稀乙醇超聲提取，過濾后直接進樣分析，平均回收率為98.7 %，RSD=0.7 %，測得3批樣品中芍藥苷的平均含量大于1.62 mg/g?？蔀槿轳毕z囊的質(zhì)量控制提供參考。樣品經(jīng)乙醇簡單提取后直接進樣，雖然操作簡化，但是雜質(zhì)峰的比例也可能增加，分析中可能會對目標色譜峰產(chǎn)生干擾。許亞玲等[4]則采用高效液相色譜法測定不同批次批乳癖消膠囊中的類固醇激素類藥物，結(jié)果表明，所測各批次中均不含類固醇激素類藥物。該方法為鑒別膠囊劑中是否存在違規(guī)添加化學藥物以增強療效提供了參考。

張小茜等[20]采用雙波長薄層掃描法測定乳癖消膠囊中人參皂苷Rg1的含量，樣品經(jīng)甲醇提取后，用正丁醇萃取，顯色后在535 nm、660 nm波長下，采用反射法鋸齒掃描，測得不同批次樣品中每粒人參皂苷Rg1的平均含量大于2.18 mg。薄層掃描法樣品前處理尤為關鍵，可減少雜質(zhì)斑點，排除背景干擾，其重現(xiàn)性、準確性較好。

4 乳癖消貼膏

貼膏劑系指以提取物、飲片或化學藥物與適宜的基質(zhì)和基材制成的供皮膚貼敷、可產(chǎn)生局部或全身性作用的一類片狀外用制劑，包括橡膠膏劑、凝膠膏劑(原巴布膏劑)和貼劑[21]。乳癖消貼劑的質(zhì)量控制以高效液相色譜法和氣相色譜法較為常用，檢測對象為芍藥苷和丹皮酚。

那順白乙拉等[22]采用高效液相色譜法測定乳癖消貼膏中的丹皮酚的含量，采用Shim-Pack VP-ODS C18柱為分析柱，甲醇-水為流動相(48:52)，檢測波長為274 nm。平均回收率為96.26%，RSD=1.39%。乳癖消貼膏中每片丹皮酚的平均含量大于0.683 mg，參考相關資料，丹皮酚含量偏低，可能與藥材投料和生產(chǎn)工藝有關，導致丹皮酚的流失?；魧幉╗23]以乳癖消浸膏為模型藥物，采用高效液相色譜法對貼片中的標示成分芍藥苷進行測定，以ODS-2 Hypersil C18柱為分析柱，乙腈-水為流動相(16:84，HAc 0.5%)，檢測波長為230 nm。測得平均含量為0.435%，RSD=1.09%。同時采用GC法對貼劑中的殘留有機溶劑進行檢測，以弱極性的FFAP柱為分析柱，F(xiàn)ID檢測器進行分析，氣相色譜法測得乙酸乙酯、異丙醇、乙醇3種殘留溶劑，未檢測到正庚烷、苯，且乳癖消貼片中殘留溶劑總量為2.1×10-4(質(zhì)量分數(shù))[24]。該方法操作簡單，可為乳癖消貼劑的質(zhì)量評價提供參考依據(jù)。

另有文獻報道，乳癖消巴布劑[25]和乳癖消橡膠膏在市場上有售，多報道其在臨床上的療效，有關其質(zhì)量控制研究目前未見報道。

5 結(jié)論

乳癖消作為經(jīng)典驗方，已經(jīng)被收錄于2010版藥典，但其現(xiàn)代劑型開發(fā)較少，目前市場上使用的一些劑型并未收錄于藥典，僅在民間或?qū)嶒炇倚》秶鷥?nèi)使用與研究，有關其質(zhì)量控制尚未建立相關的標準，仍需要進一步研究。乳癖消組方復雜，新劑型的研發(fā)和臨床使用都需要以質(zhì)量穩(wěn)定、安全、有效為基本原則，同時在目前已經(jīng)研究的基礎上開辟新的質(zhì)量控制指標，完善乳癖消的研究資料，為進一步開發(fā)奠定基礎。

【參考文獻】

[1] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(一部)[S]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：840-841．

[2] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(一部)[S]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄7．

[3] 許亞玲，羅 曼，周 蘭，等．HPLC法測定乳癖消片(膠囊)中丹皮酚的含量[J]．中國藥房，2011，22(8)：755-757．

[4] 許亞玲，申 璀，羅 曼，等．HPLC法同時檢測乳癖消片(膠囊)中是否非法摻入甾體激素類藥[J]．中國藥房，2011，22(36)：3 440-3 442．

[5] 孫金元．HPLC法測定乳癖消片中丹皮酚的含量[J]．中華中醫(yī)藥學刊，2007，25(5)：1 062-1 063．

[6] 姜云云，潘亞菊，范國榮．HPLC法測定乳癖消片中芍藥苷含量[J]．藥學實踐雜志，2007，25(5)：330-333．

[7] 徐國兵，王崢濤，潘 涅，等．RP-HPLC測定乳癖消片中三七皂苷R1和人參皂苷Rg1的含量[J]．中國中藥雜志，2006，31(13)：1 067-1 069．

[8] 劉 汶．高效液相色譜法測定乳癖消片中芍藥苷含量[J]．中國藥業(yè)，2007，16(11)：21．

[9] 李洪書，鄧春暉，陳 斌．微波技術在乳癖消片液相色譜分析中的應用[J]．藥物分析雜志，2010，30(1)：138-141．

[10] 傅海珍，楊 寧．薄層掃描法測定乳癖消片中人參皂苷Rg1的含量[J]．鎮(zhèn)江醫(yī)學院學報，2011，11(6)：749-751．

[11] 張振秋，翟鐵宏，劉桂梅．乳癖消中人參皂甙Rg1的含量測定[J]．遼寧中醫(yī)雜志，1997，24(11)：523．

[12] 曹愛民，孟憲生，沙 明．雙波長薄層掃描法測定乳癖消片中人參皂苷Rg1含量[J]．遼寧化工，2004，33(5)：303-304．

[13] 陳寧寧，魏敏吉，解健博．乳癖消片中碘含量測定方法研究[J]．沈陽藥學院學報，1993，10(4)：291-292．

[14] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(一部)[S]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄6．

[15] 姜文紅，張清波．HPLC測定乳癖消顆粒中人參皂苷Rg1的含量[J]．中國藥品標準，2006，7(4)：37-39．

[16] 曹旦華，張 劍，朱丹妮．HPLC同時測定乳癖消顆粒中7種成分的含量[J]．中國實驗方劑學雜志，2011，17(6)：74-76．

[17] 蒲艷春，徐艷麗，崔靜茹．HPLC同時測定乳癖消顆粒中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量[J]．中國現(xiàn)代應用藥學，2010，11(27)：1028-1030．

[18] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(一部)[S]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄10．

[19] 謝艷麗．高效液相色譜法測定乳癖消膠囊中芍藥苷的含量[J]．中國醫(yī)藥導報，2009，6(6)：35-36．

[20] 張小茜，周富榮．雙波長薄層掃描法測定乳癖消膠囊中人參皂甙Rg1的含量[J]．中國中藥雜志，2009，6(6)：282-283．

[21] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(一部)[S]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄8．

[22] 那順白乙拉，陳紅梅，楊 輝．HPLC法測定乳癖消帖膏中丹皮酚的含量[J]．中國民族醫(yī)藥雜志，2008，3(3)：61-62．

[23] 霍寧波．乳癖消貼片基質(zhì)構(gòu)成及芍藥苷釋放性能的考察[J]．廣東化工，2010，37(205)：125-127．

[24] 霍寧波．乳癖消貼片中標示成分及殘留溶劑的含量測定[J]．當代化工，2010，39(1)：102-104．

[25] 王秋菊，呂 娟，張予陽，等．乳癖消巴布膏的刺激性、過敏性及經(jīng)皮毒性研究[J]．藥學實踐雜志，2008，26(1)：31-34．