正交設(shè)計優(yōu)選依沙吖啶溶液的處方及制備工藝

王芳芳 (解放軍175醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院藥學(xué)科，福建 漳州 363000)

依沙吖啶(商品名：利凡諾)溶液外用于殺菌防腐，對G+菌及少數(shù)G-菌有較強(qiáng)的殺滅作用[1]，對球菌尤其是鏈球菌的抗菌作用較強(qiáng)，可用于創(chuàng)傷、黏膜感染及急性、亞急性皮炎、濕疹等皮膚病糜爛滲出期的治療，也可用于含漱。本品刺激性小，在臨床上使用較廣，但因其穩(wěn)定性差，遇高溫、高壓、光照會逐漸變質(zhì)，產(chǎn)生黃棕色沉淀，所以配制后應(yīng)避光、密閉保存。在臨床使用中，常因質(zhì)量下降或變質(zhì)而給醫(yī)院造成經(jīng)濟(jì)損失。

按照《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》配制的依沙吖啶溶液以硫代硫酸鈉作為抗氧劑[2]。但有文獻(xiàn)報道稱，硫代硫酸鈉與依沙吖啶存在配伍禁忌[3]。對乙氧基苯胺是一種被國內(nèi)外廣泛研究的抗氧劑[4]，可用于生產(chǎn)解熱鎮(zhèn)痛藥非那西丁、安癆息和消毒防腐藥依沙吖啶，雖然一定量的對乙氧基苯胺具有急劇毒性，但充當(dāng)外用溶液的抗氧劑時濃度極低，遠(yuǎn)未達(dá)到中毒量，具有一定的生物安全性。故本實驗將以對乙氧基苯胺為抗氧劑，探索其對依沙吖啶穩(wěn)定性的影響。

筆者應(yīng)用正交設(shè)計試驗對依沙吖啶溶液進(jìn)行穩(wěn)定性考察和處方優(yōu)選，以期為醫(yī)院配制依沙吖啶溶液提供更經(jīng)濟(jì)有效的方案。

1 儀器與試藥

1.1儀器 RHS-3C精密酸度計(廈門分析儀器廠)；2550型紫外分光光度計(Shimadzu公司)；HH-W420恒溫水浴箱(金壇市科析儀器有限公司)；KQ-300DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；氮?dú)?林德氣體)。

1.2試藥與試劑 乳酸依沙吖啶(藥用，遼源市迪康藥業(yè)有限責(zé)任公司)；對乙氧基苯胺(Sigma Aldrich Corp，批號：33943)；乳酸和乙醇(化學(xué)純，西隴化工股份有限公司)；濃硫酸(化學(xué)純，三明市三元化學(xué)試劑廠)；純化水(解放軍175醫(yī)院自制)。

2 方法與結(jié)果

2.1正交表設(shè)計及因素水平試驗 擬定影響依沙吖啶溶液穩(wěn)定性的3個因素，即pH值、抗氧劑和惰性氣體，其因素水平見表1。

表1 處方因素水平表

2.2依沙吖啶溶液的配制及加速試驗 在100 ml棕色容量瓶中加入現(xiàn)配的1%依沙吖啶溶液，按表1正交實驗表L9(33)設(shè)計，以適量乳酸調(diào)節(jié)pH值后，加入定量現(xiàn)配的5%對乙氧基苯胺母液，再用1%依沙吖啶溶液定容，混合均勻，最后通氮?dú)?，密封即得。每組方案做3個平行實驗。

采用初勻速法[5]，將已配制好的依沙吖啶溶液分裝于30 ml的棕色塑料瓶，分別置于40、45、50、55、60、65和70℃恒溫水浴鍋中，依次分別用水溫維持6.0、5.5、5.0、4.5、4.0、3.5和3.0 h。然后精密量取水浴前后的依沙吖啶溶液各2 ml，置于100 ml容量瓶中，再用0.05 mol/L硫酸液稀釋配得供試品溶液。

2.3紫外分光光度法測定含量并計算殘存率 以0.05 mol/L硫酸液為空白，供試品溶液在波長362 nm處有最大吸收，故本實驗選在此處測得溶液置水浴前、后的吸光度A0及A。

按下式計算水浴后供試品中依沙吖啶的濃度:

C=(A/A0)C0

再以C0為100%將C換算成殘存率(%)。數(shù)據(jù)處理列于表2。

表2 依沙吖啶溶液加速實驗后的殘存率(%)

2.4室溫貯存有效期預(yù)測 分別以依沙吖啶溶液在不同條件下分解初速度的對數(shù)lg[(100-C)%/t]對溫度的倒數(shù)1/T回歸，得出9種組合條件的直線方程，再將T=298.2K代入方程，分別推算室溫25℃的貯存期(表3)。

表3 不同條件下的依沙吖啶溶液的室溫貯存期

2.5正交試驗結(jié)果分析 正交試驗及方差分析結(jié)果見表4、表5。

表4 正交試驗L9(34)及結(jié)果

根據(jù)分析結(jié)果可知，惰性氣體對試驗結(jié)果有顯著影響，pH值對結(jié)果也有較大影響，而抗氧劑對乙氧基苯胺對結(jié)果的影響相對較小。優(yōu)化處方為A1B3C3，即在pH 4.0，0.10%對乙氧基苯胺+通氮

氣2 min時，依沙吖啶溶液的穩(wěn)定性最好，貯存期最長達(dá)16.1個月。

表5 正交試驗方差分析

F0.05(2,2)=19.00

進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，處方A2B1C3依沙吖啶溶液的穩(wěn)定性僅次于處方A1B3C3，貯存期為15.6個月。而且處方A2B1C3未添加抗氧劑，pH值更接近人體，溶液刺激性較小，同時考慮到生產(chǎn)成本及操作難易等問題，處方A2B1C3最佳，即維持在pH 4.5+通氮?dú)? min。

3 討論

本試驗數(shù)據(jù)顯示，抗氧劑對實驗結(jié)果的影響較小，但不能否定其作用。因為，惰性氣體已將溶液中的部分氧除去，相對于未通氮?dú)獾那闆r，抗氧劑的抗氧化優(yōu)勢不易體現(xiàn)。

對乙氧基苯胺極易氧化，實驗中本品母液需做特殊處理，如通氮?dú)馊パ?、現(xiàn)配現(xiàn)用等。

本試驗采用乳酸調(diào)節(jié)溶液的pH值，為避免每次配制溶液都調(diào)節(jié)酸堿度，操作煩瑣導(dǎo)致依沙吖啶溶液及抗氧劑對乙氧基苯胺迅速氧化變質(zhì)。筆者通過預(yù)實驗確定依沙吖啶溶液達(dá)到指定pH值所需的乳酸量基本穩(wěn)定。在實際操作中，直接量取預(yù)定量的乳酸加入混勻，調(diào)節(jié)pH值后再加抗氧劑，可簡化操作程序，提高貯存的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，降低因抗氧劑造成的系統(tǒng)誤差。

影響依沙吖啶溶液穩(wěn)定性的還有許多其他因素。王勁等[6]認(rèn)為，依沙吖啶的不穩(wěn)定現(xiàn)象與生產(chǎn)所用水質(zhì)有極大關(guān)系。注射用水制備的依沙吖啶溶液穩(wěn)定性優(yōu)于純化水。張又才、王之訓(xùn)等[7,8]的實驗結(jié)果顯示，光線對依沙吖啶溶液的分解有很大影響。光照時間越長，含量下降越多，故要注意避光貯放，且棕色玻璃瓶的遮光效果及密閉性優(yōu)于棕色塑料瓶。同時，溫度對依沙吖啶溶液的影響也較大[13]，溫度越高，分解反應(yīng)速度越快，故應(yīng)將藥品貯存在陰涼處。

綜上所述，pH值、抗氧劑及惰性氣體對依沙吖啶溶液穩(wěn)定性都有增強(qiáng)作用，3種因素對依沙吖啶溶液穩(wěn)定性的影響程度為惰性氣體>pH值>抗氧劑。為了繼續(xù)發(fā)揮依沙吖啶溶液刺激性小的優(yōu)勢，并且綜合考慮醫(yī)院制劑生產(chǎn)成本等經(jīng)濟(jì)效益問題，選擇只通氮?dú)狻⒉惶砑涌寡鮿?、呈酸性而較為緩和的處方A2B1C3作為本實驗得出的最優(yōu)選擇。實驗后期還應(yīng)設(shè)計補(bǔ)充性實驗，尋找醫(yī)院配制依沙吖啶溶液的最優(yōu)方案。

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