西藏野生靈芝高效日光溫室馴化栽培*

謝 榮 熊衛(wèi)萍 洛 桑 張君麗

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西藏野生靈芝高效日光溫室馴化栽培*

謝 榮 熊衛(wèi)萍 洛 桑 張君麗

（西藏農牧科學院蔬菜研究所，西藏 拉薩 850032）

對分離自西藏米林縣、波密縣的野生靈芝菌株，采用脫袋全埋式覆土栽培方法，自動間歇噴霧增濕、蕾期加強通風等技術措施，在西藏拉薩國家農業(yè)科技示范園區(qū)高效日光溫室馴化栽培成功。

西藏；野生靈芝；溫室；馴化栽培

靈芝（）屬于多孔菌科靈芝屬，是一種名貴的藥用真菌。靈芝中含有多種活性成分，如多糖、甾類、三萜類、核苷等。靈芝有調節(jié)免疫、抗腫瘤、改善血液循環(huán)、扶正固本等功效。

西藏地區(qū)野生靈芝資源豐富，分布廣泛。保育促培，有序采挖，對于保護西藏野生靈芝種群及生物遺傳多樣性有重要意義。而通過利用現(xiàn)代園藝設施進行野生靈芝的馴化栽培，則是實現(xiàn)資源化開發(fā)利用的重要途徑?，F(xiàn)將我們的馴化栽培試驗探索初步結果報道如下。

1 菌株來源

以組織分離法分離米林縣南伊鄉(xiāng)、波密縣札木鎮(zhèn)野生靈芝。

2 菌種制作

2.1 母種 PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL）：將馬鈴薯切片加水煮沸30 min，8層紗布過濾后定容至1 000 mL，在濾液中加入瓊脂、葡萄糖，分裝到180×180（mm）試管中，121 ℃滅菌0.5 h后擺斜面。

母種分離：選取野外采摘的幼嫩靈芝子實體，用無菌水清洗表面，再用75%酒精棉球進行表面消毒，用手術刀將靈芝菌蓋從中間切開，將菌蓋內部菌肉分割成0.5 cm2的小塊，用滅菌的鑷子將菌塊接種到PDA斜面培養(yǎng)基上。接種后置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，3～5天后可見菌塊周圍長出白色菌絲并開始在培養(yǎng)基上蔓延生長。去除雜菌污染的試管，10～15天后可長滿試管斜面，即為母種M0代。

篩選出菌絲潔白濃密且均勻的試管斜面，轉管用于母種M1代培養(yǎng)或作菌種保藏。

2.2 原種 麥粒培養(yǎng)基：麥粒浸泡過夜，煮沸至麥粒裂開不白心，拌入闊葉木鋸末，以石灰、石膏調pH值至8.0，含水量60%～65%，裝瓶（250 mL），封0.5 cm厚闊葉木鋸末，壓實，加蓋，于126 ℃下滅菌2 h。

將生長正常的母種M1代試管斜面，在超凈工作臺上用滅菌的接種鏟將斜面分成若干1 cm2的小塊，均勻接種到麥粒培養(yǎng)基上，擰緊瓶蓋。1支180×180（mm）試管母種接5～6瓶原種。接種后放入25 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，查看萌發(fā)情況，去除雜菌污染的麥粒瓶，20～30天菌絲長滿至瓶底。

2.3 栽培種 木屑棉籽殼培養(yǎng)基（青岡木屑49%，棉籽殼49%，石灰1%，石膏1%），按照料水比1︰1～1.5混勻，機械攪拌培養(yǎng)料，調pH至8.0，含水量60%～65%，以手握緊培養(yǎng)料指縫不連續(xù)滴水為宜。裝袋（170 mm×330 mm），采用無棉蓋體封口，于126 ℃下滅菌2～3 h。

在超凈工作臺內用滅菌的接種鏟刮去原種麥粒表面老化的菌皮，攪動松散麥粒，盡量均勻接種于袋料培養(yǎng)基袋肩位置，切勿在封口位置留下麥粒，以防接種點污染。接種后保持在18～23 ℃下培養(yǎng)，查看萌發(fā)情況，50～60天菌絲發(fā)滿至袋底。去除雜菌污染的菌包。

3 栽培方法和技術措施

制袋時間為2012年12月下旬，400余袋菌包于4月上旬定植于高效日光溫室的棚槽內，直接利用上茬藏藥材栽培壤土，每個栽培槽內分4列，每列15余包，臥式嵌入壤土，沙土過篩拌石灰覆蓋菌皮，厚度2 cm左右，表面用霧水噴濕，用黑色地膜覆蓋保濕，每天揭蓋，5～7天土壤表面有菌絲生成；用黑色遮陽網覆蓋保濕15～20天。

間歇微噴霧系統(tǒng)。在高過栽培槽表面1 m，架設噴嘴向上的微噴霧系統(tǒng)，噴管間距1 m，根據(jù)溫室內溫度日變化需要，白天高溫時段（32 ℃以上）短時（1 h）間斷噴霧，中溫時段（25 ℃）長時（1.5 h）間斷噴霧0.5～1 min，夜間放下棉被，不噴霧。

遮陽處理。2013年雨季自4月開始，6月上旬經歷短時高溫，因夏季太陽高度角最高，在日光溫室頂至腰部上位外用高密度遮陽網遮陽；腰部上位至腰風口上位內用低密度遮陽網遮陽。

通風。自5月初開始現(xiàn)蕾，因6月上旬經歷短時高溫，有出現(xiàn)呈“葫蘆”狀的蕾。遇晴天，于上午10時以后開頂風口，同時掀起腰風口開至下午5時。

4 結果與討論

4.1 不同菌株和栽培方式的靈芝子實體產量西藏野生靈芝高效日光溫室脫袋全埋式覆土栽培，4月上旬至6月初覆土，極端低溫15 ℃，極端高溫28 ℃；6月至8月，極端高溫35 ℃，極端低溫25 ℃；因2013年雨季提早，持續(xù)期長，每天平均空氣相對濕度不低于50%。覆土孕蕾期4月中旬至5月初，約15天；現(xiàn)蕾展芝期5月至6月下旬，約40天；成熟轉色期，6月下旬至8月初，約35天，全生育期90天。制袋時間冬末春初，覆土時間春末夏初，采收時間夏末秋初，在拉薩適合推廣夏秋靈芝栽培。

此次馴化栽培試驗充分利用了西藏豐富的光熱資源和溫室效應，滿足了靈芝這一高溫型菌類生長發(fā)育所需的溫度條件；選擇拉薩夏秋季雨量充沛的時段栽培，并采用微噴霧和自然通風辦法，解決了拉薩因干燥缺氧，靈芝在室內因通風不良而易形成“鹿角芝”這個瓶頸問題。

由表1、2可以看出，在西藏拉薩經高效日光溫室脫袋覆土栽培的野生靈芝生物學效率略高于在米林縣南依鄉(xiāng)的拱棚袋栽。在拉薩地區(qū)通過現(xiàn)代園藝設施環(huán)境調控，能實現(xiàn)非典型生態(tài)優(yōu)勢區(qū)域的特色食用菌的馴化栽培。

表1 不同野生靈芝菌株生物學效率

表2 野生靈芝不同栽培方式生物學效率

4.2 野生與馴化栽培的靈芝子實體活性物質含量

從表3檢測（委托廣東省微生物研究所完成）結果看，西藏拉薩高效日光溫室馴化栽培的野生靈芝，比原生境同種野生靈芝在其生理活性物質多糖和三萜含量均有不同程度的提高。通過栽培基質改良、環(huán)境調控等措施實現(xiàn)產量突破、質量保證，應是下一步努力的目標。

表3 野生與馴化栽培的靈芝子實體生理活性物質含量

注：多糖檢測方法參照NY/T 1676-2008，三萜檢測方法參照DB44/T496-2008。

國家食用菌產業(yè)技術體系拉薩試驗站（CARS-24）

謝榮，男，助理研究員，主要從事西藏野生食用菌資源研究與利用及栽培技術推廣工作，E-mail：xr-20082004@163.com。

S567.3

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2095-0934（2014）01-055-02