小茴香根皮化學(xué)成分研究

林健博， 古麗娜·沙比爾,2

(1新疆特有藥用資源利用國家重點(diǎn)實(shí)驗室培育基地， 中國科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所, 烏魯木齊 830011；2新疆中藥民族藥研究所, 烏魯木齊 830002)

小茴香根皮是傘型科植物小茴香(FoeniculumvulgareMill)的干燥根皮，全國各地均有栽培，亞洲、歐洲各國也多有栽培，收載于部頒標(biāo)準(zhǔn)維吾爾藥分冊[1]。小茴香根皮單方和復(fù)方均具有散祛寒氣、溫?zé)崮I胃、利濕、保肝、消腫止痛的功效，用于寒性胃腹痛、腸梗阻、膀胱及尿道結(jié)石、陰囊腫痛、疝氣、小便不利、咳嗽及氣管炎等疾病[2-5]。關(guān)于其化學(xué)成分的研究報道較少，主要為小茴香籽的揮發(fā)油類成分[6]。本研究通過對小茴香根皮中化學(xué)成分的研究，以期為開發(fā)利用新疆維吾爾傳統(tǒng)民族藥資源提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1儀器與試藥BUCHI Melting Point B-540 熔點(diǎn)儀(溫度未校正)，F(xiàn)TS165型紅外光譜儀(美國Perkin-Elmer公司)，Micromass ZQ型ESI-MS質(zhì)譜儀(美國Waters公司)，ZAB-HS 型EI-MS質(zhì)譜儀(英國VG公司)，Varian inova-600和Varian GEMINI-2000 (300MHz) 型核磁共振儀(內(nèi)標(biāo)為TMS，美國Varian公司)。柱色譜硅膠(200～300目)、硅膠H和薄層硅膠 GF254(青島海洋化工產(chǎn)品)；Sephadex LH 20 (Pharmacia公司)，其余試劑均為分析純。小茴香根皮(cortexradicisfoeniculi)藥材購于新疆和田墨玉縣，由中國科學(xué)院新疆生態(tài)地理研究所沈觀冕教授鑒定為傘型科植物小茴香(FoeniculumvulgareMill)的干燥根皮。

1.2提取與分離小茴香根皮10 kg，70%乙醇回流提取3次，提取液減壓濃縮得浸膏，懸浮于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。取正丁醇部分(250 g)，硅膠(200～300目)柱色譜分離，依次以石油醚/乙酸乙酯(100%、90%、70%、50%、30%、10%、1%)、乙酸乙酯/乙醇(100%、90%、70%、50%、30%、10%、1%)和氯仿/甲醇(100%、90%、70%、50%、30%、10%、1%) 進(jìn)行梯度洗脫，得到15個組分(F1～F35)。F3經(jīng)硅膠柱色譜(200～300目)，丙酮/石油醚(3%)洗脫，分離得到化合物Ⅳ(10 mg)。F6 經(jīng)反復(fù)柱層析，甲醇/水(100%、90%、70%) 洗脫。再用Sephadex LH20 凝膠柱色譜以氯仿/甲醇(50%)分離得到化合物Ⅰ(10 mg)、Ⅱ(25 mg)、Ⅲ(34 mg)。F8經(jīng)硅膠柱層析(200～300目)，氯仿-甲醇(9∶1)洗脫，得到化合物Ⅴ(25 mg)。F13 經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析并重結(jié)晶得到化合物Ⅵ(1 g)。

2 結(jié)果

2.1結(jié)構(gòu)鑒定化合物Ⅰ 淡黃色針狀晶體(甲醇)，mp：202～204℃。IR vKBrmax 3250，1706，1653，1563， 1460，114，924，822。ESI-MS m/z：191[M-H]-。1H NMR (600 MHz，CDCl3) δ：7.61(1H， d，J=9.6 Hz，H-4)，6.92(1H，s，H-5)，6.84(1H，s，H-8)，6.28(1H，d，J=9.6 Hz)，3.95(3H，s，-OCH3)。13C NMR (125 MHz，CDCl3) δ：161.44(C-2)，150.22(C-7)，149.66(C-9)，143.98(C-4)，143.30(C-6)，113.40(C-3)，111.48(C-10)，107.45(C-5)，103.17(C-8)，56.40(-OCH3)。綜合以上光譜數(shù)據(jù)并與文獻(xiàn)[7]對照，確定其為7-羥基-6-甲氧基香豆素(東莨菪素，copoletin)。

2.2結(jié)構(gòu)鑒定化合物Ⅱ 淡黃色油狀物，IR vKBrmax 3396，1674，1519。EI-MS m/z：126[M]+。1H NMR (300 MHz，CD3OD) δ：9.54 (1H，s，H-6)，7.39 (1H，d，H-3)，6.59 (1H，d，H-4)，4.61(2H，s，H-7)，4.49(2H，s，7-OH)。13C NMR (75 MHz，CD3COD) δ：179.9 (C-6)，163.7 (C-5)，154.4 (C-2)，125.3 (C-3)，111.4 (C-4)，58.1 (C-7)。綜合以上光譜數(shù)據(jù)并與文獻(xiàn)[8]對照，確定其為5-羥甲基糠醛(5-Hydroxymethylfurfural)。

2.3結(jié)構(gòu)鑒定化合物Ⅲ 淡黃色油狀物，EI-MS m/z：157[M+H]+。1H NMR (300 MHz，CD3OD) δ：7.05 (1H，br s，-NH)，4.30-4.20 (1H，m，H-2)，4.20 (2H，q，J=6.9 Hz，H-1’)，2.52-2.42 (1H，m，H-3)，2.37-2.30 (2H，m，H-4 )，2.20-2.11 (1H，m，H-3)，1.28 (3H，t，J=6.9 Hz，H-2’)，13C NMR (75 MHz，CD3COD) δ：181.6 (C-5)，174.5 (C-6)，63.0 (C-1’)，57.6 (C-2)，30.8 (C-3)，26.4 (C-4)，14.9 (C-2’)。綜合以上光譜數(shù)據(jù)并與文獻(xiàn)[9]對照，確定其為焦谷氨酸乙酯(5-oxo-2-pyrrolidinecarboxylic acid; (±)-form,ET ester)。

2.4結(jié)構(gòu)鑒定化合物Ⅳ 白色粉末(CHCl3-MeOH)，mp：294～297℃。Molish反應(yīng)陽性。與 β-胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)共薄層，Rf值一致，且混熔點(diǎn)不下降，故鑒定為 β-胡蘿卜苷(Daucosterol)。

2.5結(jié)構(gòu)鑒定化合物Ⅴ 無色針狀晶體(石油醚)，mp：126～128 ℃。與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，Rf值一致，且混熔點(diǎn)不下降，故確定其為 β-谷甾醇 (β-Sitosterol)[10]。

2.6結(jié)構(gòu)鑒定化合物Ⅵ 白色方晶，易溶于水，mp：168～170℃。與AR級蔗糖共紙層，Rf值一致，且熔點(diǎn)不下降，故確定為蔗糖。

3 討論

已有文獻(xiàn)報道東莨菪素 (Scopoletin) 有祛風(fēng)、抗炎、止痛、祛痰、平喘、抗腫瘤等作用[10]。傅紫琴等[11]經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)5-羥甲基糠醛對小鼠CCl4肝損傷模型和血管內(nèi)皮細(xì)胞均有保護(hù)作用，抗氧化作用是其保護(hù)作用的機(jī)制之一。結(jié)合衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)維吾爾藥分冊中小茴香根皮臨床療效的描述，推測東莨菪素和5-羥甲基糠醛可能是小茴香根皮中的有效成分之一。

本研究從小茴香根皮中分離得到的6種單體化合物，經(jīng)NMR波譜解析，并與相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比對，確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)分別為7-羥基-6-甲氧基香豆素(Ⅰ)、5-羥甲基糠醛(Ⅱ)、焦谷氨酸乙酯(Ⅲ)、胡蘿卜苷 (Ⅳ)、β-谷甾醇 (Ⅴ)、蔗糖(Ⅵ)。其中化合物Ⅰ～Ⅲ為首次從茴香屬植物中分離得到，為新疆小茴香化學(xué)成分的進(jìn)一步研究提供理論依據(jù)。

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