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    無(wú)花果多糖的純化及其抗氧化活性研究

    2014-03-01 09:56:03李文婕楊小明張赫男李世超方洋洋江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院江蘇鎮(zhèn)江03江蘇大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院江蘇鎮(zhèn)江03
    食品工業(yè)科技 2014年14期
    關(guān)鍵詞:能力

    李文婕,楊小明,*,張赫男,李世超,方洋洋(.江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,江蘇鎮(zhèn)江03;.江蘇大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,江蘇鎮(zhèn)江03)

    無(wú)花果多糖的純化及其抗氧化活性研究

    李文婕1,楊小明1,*,張赫男1,李世超1,方洋洋2
    (1.江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,江蘇鎮(zhèn)江212013;2.江蘇大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,江蘇鎮(zhèn)江212013)

    目的:探討無(wú)花果多糖(Ficus carica polysaccharides,F(xiàn)CPS)的分離純化及其抗氧化活性。方法:采用水提醇沉法提取,Sevage法除蛋白、膜過(guò)濾后凍干得到無(wú)花果多糖,再經(jīng)DEAE-52纖維素柱純化;以UV等方法考察多糖的理化性質(zhì),高效凝膠色譜測(cè)定多糖的純度和相對(duì)分子質(zhì)量分布;并研究其抗氧化活性。結(jié)果:經(jīng)水提醇沉、膜過(guò)濾后得到的FCPS為混合酸性多糖,不含蛋白質(zhì)、核酸,分子量范圍在5.92×105~2.0×106u之間;DEAE-52柱分級(jí)得到FCPS的三個(gè)餾分:FCPS1、FCPS2和FCPS3,高效凝膠色譜分析顯示FCPS2為一對(duì)稱峰,分子量約為2.61×106u??寡趸钚詫?shí)驗(yàn)顯示清除超氧負(fù)離子能力IC50FCPS2為430滋g/mL,F(xiàn)CPS為620滋g/mL;清除羥基自由基IC50FCPS2為1000滋g/mL,F(xiàn)CPS為4780滋g/mL。在濃度為1000滋g/mL時(shí),F(xiàn)CPS2和FCPS的還原能力分別為0.055和0.133。結(jié)論:FCPS經(jīng)純化后得到的組分FCPS2較FCPS表現(xiàn)出更好的清除超氧負(fù)離子和清除羥基自由基的能力,但還原能力有所降低。

    無(wú)花果多糖,分離純化,抗氧化

    抗氧化作用一直以來(lái)是醫(yī)學(xué)研究的重要環(huán)節(jié),許多慢性病如心腦血管疾病、糖尿病、高血壓以及腫瘤等疾病,主要是由于人體內(nèi)過(guò)量的自由基引發(fā)氧化應(yīng)激,從而造成細(xì)胞損傷所致。天然抗氧化活性成分能夠清除自由基,避免細(xì)胞由于自由基的作用而被老化、損傷或產(chǎn)生DNA突變,從而達(dá)到保護(hù)機(jī)體的作用[1]。因此研究食物中的抗氧化活性成分,對(duì)于有效地指導(dǎo)人們合理利用膳食、提高人體抗病能力、促進(jìn)人類健康和延長(zhǎng)人類壽命具有重要意義。

    無(wú)花果是一種可食率高達(dá)92%以上的漿果,含有豐富的糖類、蛋白、氨基酸、不飽和脂肪酸、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),其中以多糖的功效尤為引人關(guān)注。據(jù)目前已有的研究表明,無(wú)花果多糖具有抗腫瘤[2]、提高免疫力[3]、降血糖[4]、降血脂[4]等功效。楊小明等[5]發(fā)現(xiàn)無(wú)花果粗多糖顯示出良好的抗氧化活性。為了深入了解無(wú)花果多糖中的抗氧化活性組分,本研究擬對(duì)無(wú)花果多糖進(jìn)行分級(jí)純化,并檢測(cè)其抗氧化活性。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    無(wú)花果 由江蘇省豐縣中研無(wú)花果開(kāi)發(fā)有限公司提供,品種為日本紫果,壓榨取汁后得到殘?jiān)?,?jīng)45℃烘干,粉碎過(guò)20目篩備用;DEAE-52纖維素交換樹(shù)脂(柱層析用) 上海國(guó)藥集團(tuán)進(jìn)口分裝;NBT、NADH、濃硫酸、無(wú)水乙醇、石油醚、氯仿、正丁醇、丙酮、NaCl、NaOH、HCl等試劑 上?;瘜W(xué)試劑有限公司;提取用水 為二次蒸餾水;分析用水 為娃哈哈純凈水。

    高效液相系統(tǒng) ProStar210泵、ProStar 355 RI檢測(cè)器,美國(guó)VARIAN公司;BS-124S電子分析天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;RE-52C型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHZ-D型循環(huán)水式多用真空泵、HH-S型水浴鍋 鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司;Pellicon小型超濾系統(tǒng) 美國(guó)Millipore公司;ALPHA2-4型冷凍干燥機(jī) 德國(guó)CHRIST公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 無(wú)花果多糖的提取 根據(jù)文獻(xiàn)[6]的實(shí)驗(yàn)方法略加修改:50g干燥無(wú)花果渣粉以石油醚脫脂三次后加入500mL蒸餾水,于100℃提取180min,過(guò)濾,濾渣重復(fù)提取一次,合并濾液。將濾液濃縮至原體積的1/4后,Sevage法除蛋白,經(jīng)6次脫蛋白后,在攪拌條件下,緩慢加入四倍體積的無(wú)水乙醇沉淀,于4℃靜置12h,離心分離,收集沉淀,即得無(wú)花果粗多糖。

    無(wú)花果粗多糖加水溶解,用截留分子量為10ku的平面纖維素超濾膜超濾(ΔP=0.1MPa,T=25℃),收集分子量大于10ku部分,在60℃以下濃縮至原體積的1/4,攪拌下慢慢加入無(wú)水乙醇至75%濃度,4℃靜置12h,離心(3000r/min,20min)分離,沉淀以無(wú)水乙醇、丙酮洗滌,冷凍干燥,得無(wú)花果多糖(FCPS)。

    1.2.2 無(wú)花果多糖理化性質(zhì)分析

    1.2.2.1 無(wú)花果多糖性狀及理化性質(zhì) 參照文獻(xiàn)[6]對(duì)無(wú)花果多糖進(jìn)行外觀及溶解性、碘-碘化鉀反應(yīng)、Molish試劑反應(yīng)、茚三酮反應(yīng)、紫外光譜檢測(cè)等驗(yàn)證分析。

    總糖含量測(cè)定采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)單糖;蛋白含量測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)法,以牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn)蛋白。

    1.2.2.2 無(wú)花果多糖等當(dāng)點(diǎn)測(cè)定 準(zhǔn)確稱取105℃干燥恒重的無(wú)花果多糖樣品0.15g于100mL的三角燒瓶中,加入20mL蒸餾水及0.057mol/L標(biāo)準(zhǔn)HCl溶液20mL,在室溫下溶解。磁力攪拌下用0.054mol/mL標(biāo)準(zhǔn)NaOH滴定。每滴入1mL NaOH溶液測(cè)定pH一次。以加入的NaOH溶液體積為橫坐標(biāo),測(cè)得的pH為縱坐標(biāo)繪圖,找出曲線突躍點(diǎn)對(duì)應(yīng)的pH即為無(wú)花果多糖的等當(dāng)點(diǎn)。

    1.2.3 無(wú)花果多糖的分級(jí)分離 取150mg無(wú)花果多糖溶于10mL熱蒸餾水中,充分溶解后離心,取上清液加入層析柱(Φ1.0×50cm,DEAE-52高45cm)上,洗脫梯度為蒸餾水、0.1、0.2、0.3、0.4mol/L NaCl溶液,流速0.3mL/min,每30min收集一管,苯酚-硫酸法跟蹤檢測(cè)多糖洗脫情況,以管號(hào)為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制洗脫曲線。根據(jù)洗脫曲線,合并同一洗脫峰的洗脫液。透析(10ku cut-off)脫鹽,真空干燥(45℃、≥0.095MPa)。

    1.2.4 無(wú)花果多糖的純度鑒定及分子量分布測(cè)定 凝膠色譜條件:糖柱為T(mén)SK-GEL G4000PW(TOSOH CORPORATION)。流動(dòng)相:娃哈哈純凈水,流速0.5mL/min,柱溫(35±0.1)℃。

    用標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖Dextran T系列(分子量104、4×104、7×104、5×105和2×106u標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后根據(jù)多糖樣品在相同的色譜條件下的洗脫體積或保留時(shí)間,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出該樣品的分子量。

    1.2.5 無(wú)花果多糖及其餾分抗氧化活性研究

    1.2.5.1 清除超氧負(fù)離子的能力 采用PMS-NADHNBT體系[7]。反應(yīng)體系:1.5mL不同濃度樣品溶液(溶解于Tris-HCl,pH8.0,16mmol/L),0.5mL氯化硝基四氮唑NBT(300μmol/L溶解于Tris-HCl,pH8.0,16mmol/L),0.5mL還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH(468μmol/L溶解于Tris-HCl,pH8.0,16mmol/L),加入0.5mL吩嗪硫酸二甲酯PMS(60μmol/L)啟動(dòng)反應(yīng),25℃水浴5min,空白對(duì)照為樣品代替為緩沖溶液(Tris-HCl,pH8.0,16mmol/L)反應(yīng)完成于560nm測(cè)定,結(jié)果計(jì)算按以下公式進(jìn)行。

    式中:SE-清除超氧負(fù)離子的能力(Scavenging effect);A1-樣品測(cè)試值;A0-空白值(緩沖液代替樣品)。

    1.2.5.2 清除羥基自由基的能力[8-9]取1mL 0.75mmol/L鄰二氮菲無(wú)水乙醇溶液于試管中依次加入2mL 0.2mol/L磷酸鹽緩沖溶液(PBS,pH7.40)和1mL蒸餾水,充分混勻后,加入1mL 0.75mmol/L硫酸亞鐵溶液(FeSO4),混勻后,加入1mL 0.01%雙氧水(H2O2),于37℃水浴60min后,在536nm測(cè)其吸光值,所測(cè)得的數(shù)據(jù)為損傷管的吸光值A(chǔ)損。未損傷管以1mL蒸餾水代替損傷管中1mL 0.01%的雙氧水(H2O2),操作方法同損傷管,可測(cè)得536nm未損傷管的吸光值A(chǔ)未。樣品管以1mL樣品代替損傷管中的1mL蒸餾水,操作方法同損傷管,可測(cè)得536nm樣品管的吸光值A(chǔ)樣。清除率I的計(jì)算公式:

    1.2.5.3 還原能力[10-11]1mL樣品測(cè)試液,加入2.5mL PBS(0.2mol/L,pH6.6)和2.5mL鐵氰化鉀(1%),混合均勻,50℃反應(yīng)20min。接著加入2.5mL三氯乙酸(10%),進(jìn)行離心(2000r/min,10min),吸取上清液2.5mL與0.5mL FeCl3(0.1%)混合,在700nm處測(cè)定吸光度。溶液的吸光度越高,表示還原能力越強(qiáng)。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 無(wú)花果多糖的理化性質(zhì)

    2.1.1 無(wú)花果多糖表觀性狀 無(wú)花果粉末經(jīng)水提醇沉、脫蛋白、脫除小分子雜質(zhì)、冷凍干燥,得到無(wú)花果多糖,其外觀為淺灰色疏松狀粉末,無(wú)味,易溶于水,水溶液pH4.2,難溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙醚等有機(jī)溶劑。碘-碘化鉀反應(yīng)呈陰性,說(shuō)明所得產(chǎn)品中不含淀粉;茚三酮反應(yīng)呈陰性,說(shuō)明所得產(chǎn)品中不含有蛋白質(zhì);其紫外光譜驗(yàn)證,無(wú)花果多糖在260、280nm處沒(méi)有蛋白質(zhì)、核酸的特征吸收;192nm處有明顯的吸收峰,表現(xiàn)為糖的特征吸收(見(jiàn)圖1)。Molish反應(yīng)呈陽(yáng)性,說(shuō)明所得產(chǎn)品中含有糖類物質(zhì)。根據(jù)公式計(jì)算得無(wú)花果多糖的得率為4.1%,按苯酚-硫酸法測(cè)得總糖含量為91%。

    圖1 無(wú)花果多糖的紫外光譜Fig.1 UV Spectrum of FCPS

    2.1.2 等當(dāng)點(diǎn)測(cè)定[12]等當(dāng)點(diǎn)(equivalent point)是當(dāng)?shù)渭拥臉?biāo)準(zhǔn)溶液和被測(cè)物質(zhì)恰好反應(yīng)時(shí),這一時(shí)刻稱為等當(dāng)點(diǎn)。測(cè)定多糖的等當(dāng)點(diǎn)可以更好地了解多糖的酸堿性。

    圖2 FCPS等當(dāng)點(diǎn)滴定曲線Fig.2 The titration curve of determine FCPS equivalent point

    在酸堿中和滴定中,到達(dá)等當(dāng)點(diǎn)時(shí)溶液不一定都是中性的,有時(shí)呈酸性、有時(shí)呈堿性,這要看中和后生成鹽的性質(zhì)。強(qiáng)酸和強(qiáng)堿的中和滴定,在等當(dāng)點(diǎn)時(shí)溶液呈中性;強(qiáng)堿滴定弱酸,因生成的鹽又要水解,在等當(dāng)點(diǎn)時(shí)溶液呈堿性;同理,強(qiáng)酸滴定弱堿,在等當(dāng)點(diǎn)時(shí)溶液呈酸性。FCPS等當(dāng)點(diǎn)測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖2,可知FCPS等當(dāng)點(diǎn)為6.92,因此FCPS是弱酸性的多糖。

    2.1.3 分子量測(cè)定 分別采用分子量為104、4×104、7×104、5×105和2×106u標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖按分析條件進(jìn)樣,記錄各分子量葡聚糖的保留時(shí)間RT,以分子量對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),RT為橫坐標(biāo)作圖(見(jiàn)圖3),采用最小二乘法回歸得到葡聚糖分子量M與RT的對(duì)應(yīng)回歸方程:LgM=9.6188-0.3246RT,r=0.9947。

    將FCPS樣品在同樣條件下進(jìn)樣,其分析圖譜呈現(xiàn)出現(xiàn)一系列高低不等的峰值,這表明FCPS是混合多糖。將其最初及最終出峰時(shí)間,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算,得知無(wú)花果多糖的分子量分布范圍在5.92×105~2.0×106u之間。

    圖3 排阻色譜法分子量分布測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線(Mean±SD,n=3)Fig.3 The calibration curve of the dextran series in HPGPC(Mean±SD,n=3)

    2.2 無(wú)花果多糖的分級(jí)純化

    由于FCPS為混合多糖,為了獲得FCPS的均一性組分,采用DEAE-52離子交換樹(shù)脂對(duì)FCPS進(jìn)行分離,采用0、0.1、0.2、0.3和0.4mol/L的NaCl溶液進(jìn)行梯度洗脫,洗脫液以苯酚-硫酸法追蹤多糖,分析結(jié)果見(jiàn)圖4。從圖4可知,當(dāng)NaCl濃度為0、0.1和0.2mol/L時(shí),分別有一多糖餾分出現(xiàn),各自標(biāo)記為FCPS1、FCPS2和FCPS3;NaCl洗脫液濃度達(dá)到0.3和0.4mol/L時(shí),未見(jiàn)由多糖洗脫峰出現(xiàn)。

    圖4 FCPS經(jīng)DEAE-52柱層析色譜圖(Mean±SD,n=3)Fig.4 Elution curve of FCPS on DEAE-52(Mean±SD,n=3)

    2.3 FCPS2高效液相凝膠色譜分析和分子量測(cè)定

    采用高效液相凝膠色譜(HPGPC)對(duì)FCPS的三個(gè)餾分進(jìn)行分析,結(jié)果可知在純化得到的三個(gè)餾分中,僅FCPS2在高效液相凝膠色譜分析圖中出現(xiàn)單一且基本對(duì)稱的單峰,如圖5所示,若要進(jìn)一步確定FCPS2為均一多糖組分,可采用高壓電泳、超離心等方法來(lái)輔助驗(yàn)證,這一實(shí)驗(yàn)待以后進(jìn)一步完成。FCPS2的保留時(shí)間約為9.866min,帶入分子量標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算得知FCPS2分子量為2.61×106u。

    2.4 FCPS2的體外抗氧化研究

    2.4.1 清除超氧陰離子自由基的能力的測(cè)試 超氧陰離子自由基是常見(jiàn)的自由基之一,具有較強(qiáng)的氧化能力,在檢驗(yàn)抗氧化物質(zhì)的活性時(shí)經(jīng)常把清除超氧陰離子自由基作為其中一個(gè)重要的指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)的原理是PMS與NADH作用產(chǎn)生超氧陰離子,NBT再利用其還原生成在560nm處有最大吸收的物質(zhì),考察560nm吸光度的變化來(lái)得知超氧陰離子的被清除率,吸光值越低,表示清除率越高。

    FCPS2對(duì)超氧陰離子的清除活性如圖6所示。在終濃度為500滋g/mL時(shí)對(duì)超氧陰離子的清除效率約為50.3%,其IC50為430滋g/mL,根據(jù)本實(shí)驗(yàn)組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,F(xiàn)CPS清除超氧陰離子的IC50為620滋g/mL。結(jié)果表明純化后得到的多糖組分FCPS2清除超氧陰離子能力比FCPS強(qiáng)。

    圖5 FCPS2的HPGPC色譜圖Fig.5 HPGPC chromatograms of FCPS2

    圖6 FCPS2、FCPS清除超氧陰離子自由基的能力(Mean±SD,n=3)Fig.6 Scavenging activity of FCPS2 and FCPS on superoxide anion radicals(Mean±SD,n=3)

    2.4.2 清除羥基自由基能力的測(cè)試 羥基自由基(·OH)是一種十分活潑的活性氧,氧化能力很強(qiáng)。因鄰二氮菲-Fe2+溶液(橙紅色)被反應(yīng)生成的·OH氧化成鄰二氮菲-Fe3+,在536nm波長(zhǎng)處的最大吸收峰消失,故可以根據(jù)用鄰二氮菲-Fe2+的褪色程度來(lái)衡量·OH的清除率。

    將FCPS2配成不同濃度,根據(jù)1.2.5.2的方法測(cè)定其對(duì)羥基自由基的清除率,結(jié)果如圖7所示。可知,F(xiàn)CPS2在體外有一定的清除羥基自由基能力,并隨著其濃度的增加清除能力逐漸增強(qiáng),其IC50約為1000滋g/mL,而根據(jù)本實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)結(jié)果,無(wú)花果多糖清除羥基自由基的IC50為4780滋g/mL。表明純化后得到的多糖組分FCPS2清除羥基自由基能力比FCPS強(qiáng),這與清除超氧負(fù)離子能力測(cè)試結(jié)果一致。

    圖7 FCPS2、FCPS清除羥基自由基的能力(Mean±SD,n=3)Fig.7 Activity scavenging hydroxyl radical of FCPS2 and FCPS(Mean±SD,n=3)

    2.4.3 還原能力測(cè)試 多糖的還原能力與抗氧化活性有明顯關(guān)系??寡趸瘎┩ㄟ^(guò)自身的還原作用給出電子從而清除自由基。還原能力越強(qiáng),抗氧化活性越強(qiáng)。在鐵氰化鉀體系中,F(xiàn)e3+在抗氧化劑的促進(jìn)下被還原為Fe2+,形成的Fe2+在700nm處檢出。測(cè)定的吸光度值越大,還原能力越強(qiáng)。

    FCPS2的還原能力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖8。由圖8可見(jiàn),F(xiàn)CPS2顯示出一定的還原能力,并隨著濃度的增加,還原能力逐漸增強(qiáng)。在濃度為1000滋g/mL時(shí),F(xiàn)CPS2和FCPS的還原能力分別為0.055和0.133,F(xiàn)CPS2還原能力遠(yuǎn)低于FCPS。多糖的還原力與其單糖的還原末端暴露的多少有關(guān),我們推測(cè)純化后的單糖組分還原末端暴露估計(jì)很少,直接影響到了其還原能力。

    FCPS2具有還原鐵離子的能力,還原能力隨濃度的增加而增加,而且它還具有抑制自由基轉(zhuǎn)移電子的能力,能夠使自由基轉(zhuǎn)變成更穩(wěn)定的產(chǎn)物從而終止自由基一系列的反應(yīng)。

    通過(guò)清除超氧陰離子的能力的測(cè)試、清除羥基自由基能力的測(cè)試和還原能力測(cè)試三個(gè)方面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,純化后的FCPS2的抗氧化活性明顯強(qiáng)于FCPS。這是因?yàn)?,多糖的活性與分子量、溶解度、粘度、初級(jí)結(jié)構(gòu)和高級(jí)結(jié)構(gòu)有關(guān),多糖分子量越大,分子體積越大,不利于跨膜進(jìn)入生物體內(nèi)發(fā)揮生物學(xué)活性,小分子量的多糖更容易結(jié)合活性位點(diǎn),而分子量過(guò)低,又無(wú)法形成活性的聚合結(jié)構(gòu)。分子量適當(dāng)大小的多糖,其活性較高[13]。

    圖8 FCPS2、FCPS的還原能力(Mean±SD,n=3)Fig.8 Reducing power of FCPS2 and FCPS(Mean±SD,n=3)

    3 結(jié)論

    FCPS經(jīng)柱層析獲得三個(gè)組分:FCPS1、FCPS2、FCPS3,其中初步驗(yàn)證出FCPS2為均一性組分,分子量約為2.61×106u。實(shí)驗(yàn)研究了FCPS2的抗氧化活性,實(shí)驗(yàn)顯示清除超氧陰離子自由基能力IC50FCPS2為430滋g/mL,而FCPS為620滋g/mL;清除羥基自由基IC50FCPS2為1000滋g/mL,F(xiàn)CPS為4780滋g/mL。在濃度為1000滋g/mL時(shí),F(xiàn)CPS2和FCPS的還原能力分別為0.055和0.133。因此,F(xiàn)CPS2表現(xiàn)出了比FCPS更好的清除超氧陰離子自由基和清除羥基自由基的能力,但FCPS2的還原能力較FCPS低。

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    Study on purification and antioxidation of polysaccharides from Ficus carica

    LI Wen-jie1,YANG Xiao-ming1,*,ZHANG He-nan1,LI Shi-chao1,F(xiàn)ANG Yang-yang2
    (1.School of Food and Biological Engineering,Jiangsu University,Zhenjiang 212013,China;2.School of Chemistry and Chemical Engineering,Jiangsu University,Zhenjiang 212013,China)

    Objective:To purify the polysaccharides from Ficus carica L.fruit and investigate its antioxidant activity. Methods:Ficus carica polysaccharides(FCPS)was obtained by hot water extracting and ethanol precipitation,removing the protein by Sevage method.Then FCPS was purified by using cellulose DEAE-52.Physicochemical characteristic of polysaccharides was researched by UV and some other methods.HPGPC was used to study the purity and distribution range of relative molecular mass of polysaccharides.And the antioxidant activity of the polysaccharides was tested.Results:FCPS was a kind of mixed acidic polysaccharides which had no protein and nucleinic acid.The relative molecular mass was between 5.92×105and 2.0×106u.The three purified components FCPS1,F(xiàn)CPS2 and FCPS3 were obtained by DEAE-52 cellulose column Chromatography. After HPGPC analyses,F(xiàn)CPS2 showed a symmetrical peak and its molecular mass was 2.61×106u.As about antioxidation,scavenging superoxide anion radical(FCPS2:IC50=430滋g/mL,F(xiàn)CPS:IC50=620滋g/mL)and scavenging hydroxyl radical(FCPS2:IC50=1000滋g/mL,F(xiàn)CPS:IC50=4780滋g/mL)were also notedly improved,whereas,the reducing power was 0.055 and 0.133 respectively when their concentrations were 1000滋g/mL.Conclusions:The homogeneous polysaccharides FCPS2 which had been purified showed a better ability to remove superoxide anion and hydroxyl radicals,while its reducing power decreased.

    Ficus carica polysaccharides;separation and purification;antioxidant activity

    TS201.1

    A

    1002-0306(2014)14-0161-05

    10.13386/j.issn1002-0306.2014.14.027

    2013-11-06 *通訊聯(lián)系人

    李文婕(1989-),女,碩士研究生,研究方向:天然產(chǎn)物提取與純化。

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