吳靜芳 魏 星 裘華森
1浙江醫(yī)院外科 杭州 310006 2浙江省中醫(yī)院外科
術(shù)后腸麻痹是外科術(shù)后常見(jiàn)并發(fā)癥,其具體發(fā)病機(jī)制尚未明確,一直缺乏特異有效的治療手段。近年來(lái),中醫(yī)藥促術(shù)后胃腸動(dòng)力有較好的臨床療效,是該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。我們采用電針針刺大鼠足三里及上巨虛穴對(duì)大鼠腹部術(shù)后腸麻痹進(jìn)行治療,觀察墨汁推進(jìn)率和血清胃動(dòng)素(motilin,MTL)水平,探討電針治療對(duì)大鼠腹部術(shù)后腸動(dòng)力的影響。
1.1 動(dòng) 物 健康清潔級(jí)SD雄性大鼠56只,浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。合格證號(hào):SCXK(滬)2008-0016,購(gòu)自上海山西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號(hào)20101130);10%水合氯醛、生理鹽水、75%酒精(浙江省中醫(yī)院);10%水合氯醛(批號(hào)090909);10%EdTA 二鈉、95%酒精、明膠、活性炭粉(浙江中醫(yī)藥大學(xué)分子生物學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供,購(gòu)于杭州微生物試劑有限公司);10%EdTA二鈉產(chǎn)品(批號(hào)12811531216)。
1.3.1 動(dòng)物分組 取健康清潔級(jí)SD大鼠72只,通過(guò)隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為模型組、電針組、假手術(shù)組,每組24只,各組按照隨機(jī)原則再分為24、72、120h組,每組各8只。
1.3.2 動(dòng)物模型制備[1]術(shù)前24h各組大鼠禁食,自由飲水。在無(wú)菌操作下,取腹部正中切口打開(kāi)腹腔,將小腸翻向左側(cè),置于生理鹽水浸濕的紗布上,用生理鹽水浸濕的捋腸器沿小腸的長(zhǎng)軸自十二指腸直至回盲部推擠,力量以剛好推動(dòng)腸內(nèi)容物為宜,模擬臨床上常見(jiàn)的全小腸探查操作。假手術(shù)組僅行開(kāi)腹翻腸不進(jìn)行推擠操作。然后將小腸按順序還納,腹腔內(nèi)灑少量溫生理鹽水,雙層連續(xù)縫合關(guān)閉腹腔。手術(shù)后,大鼠均置于暖燈下保溫。模型組和電針組大鼠手術(shù)時(shí)間均在10min左右,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
1.3.3 治療方法 電針組:根據(jù)《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[2]造模成功后2h于大鼠后肢雙側(cè)取足三里及上巨虛穴,直刺,進(jìn)針深度5mm左右,捻轉(zhuǎn)有緊滯感后針柄接電針治療儀,右側(cè)接正極,左側(cè)接負(fù)極。刺激參數(shù):疏密波(疏波 4Hz,密波 50Hz),強(qiáng)度定于該治療儀“1”檔左右,以大鼠雙下肢輕微抖動(dòng)為宜。留針30min,1天2次,至觀察結(jié)束。
1.3.4 墨汁灌胃 采用墨汁計(jì)算小腸推進(jìn)率,各組大鼠在各觀察時(shí)間點(diǎn)用灌胃針給予墨汁灌胃(0.5mL/只)。
1.3.5 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法 ①血清MTL:灌胃后30min脫頸處死,開(kāi)腹,從下腔靜脈采血1mL,置于含30μL 10%EDTA二鈉的1.5mL離心管中混勻,4℃下在離心機(jī)中離心15min(3500r/min),用微量移液器取血清置于另一1.5mL離心管中,置于-20℃冰箱保存。用ELISA法測(cè)血清中MTL含量。②小腸墨汁推進(jìn)率:灌胃后30min脫頸處死。打開(kāi)腹腔分離腸系膜,剪取上端自幽門(mén)、下端至回盲部的腸管,置于托盤(pán)上,輕輕將小腸拉成直線。測(cè)量腸管長(zhǎng)度為“小腸總長(zhǎng)度”,從幽門(mén)至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度”。墨汁推進(jìn)率計(jì)算公式[2-3]:墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度(cm)/小腸總長(zhǎng)度(cm)×100%。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料用(x±s) 表示,計(jì)量資料的多個(gè)樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)(若方差齊性,則采用LSd法;若方差不齊,則采用Tamhane,sT2法);計(jì)數(shù)資料的多個(gè)樣本均數(shù)比較采用非參數(shù)法(Nonparame-tric Tests-2 Independent Samples),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。模后 24、72h時(shí)間點(diǎn)明顯低于假手術(shù)組(P<0.01),在120h點(diǎn)兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。電針組24、72h時(shí)間點(diǎn)明顯低于假手術(shù)組(P<0.05,P<0.01),120h點(diǎn)兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。電針組72h點(diǎn)明顯高于模型組(P<0.05),其余時(shí)間點(diǎn)兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。電針組墨汁推進(jìn)率隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,72、120h優(yōu)于24h(P<0.01),120h 又優(yōu)于 72h(P<0.05)。見(jiàn)表 1。
表1 三組大鼠小腸墨汁推進(jìn)率比較(x±s) %
2.2 三組血清MTL比較 模型組血清MTL含量24、72h點(diǎn)明顯低于假手術(shù)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),120h點(diǎn)也低于假手術(shù)組(P<0.05)。電針組24h點(diǎn)低于假手術(shù)組(P<0.05),其余時(shí)間點(diǎn)兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。電針組72h和120h點(diǎn)明顯高于模型組(P<0.01,P<0.05),24h 點(diǎn)兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。電針組血清MTL含量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,72、120h明顯高于24h(P<0.05)。72h與120h比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。
表2 三組血清MTL比較(x±s) ng/L
2.1 三組墨汁推進(jìn)率比較 模型組墨汁推進(jìn)率在造
術(shù)后腸麻痹是外科術(shù)后、特別是腹部手術(shù)后常見(jiàn)的但目前尚無(wú)法避免的臨床難題。其臨床表現(xiàn)主要為腹痛、腹脹、肛門(mén)停止排氣排便、腸鳴音減弱或消失,嚴(yán)重者可致術(shù)后腸管積液擴(kuò)張,菌群失調(diào)移位,導(dǎo)致吻合口瘺、切口裂開(kāi)、甚至多器官功能衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥,延長(zhǎng)患者住院時(shí)間和增加住院費(fèi)用。Kraft[3]報(bào)道美國(guó)因術(shù)后胃腸功能障礙每年需花費(fèi)14.7億美元。隨著快速康復(fù)外科的廣泛開(kāi)展,目前多數(shù)學(xué)者已認(rèn)識(shí)到,術(shù)后腸麻痹是影響患者術(shù)后康復(fù)的核心環(huán)節(jié),早期干預(yù)對(duì)其進(jìn)行預(yù)防和治療尤為重要[4]。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)到術(shù)后胃腸動(dòng)力的重要性,主要從完善術(shù)前準(zhǔn)備、提高手術(shù)技術(shù)以減少創(chuàng)傷和刺激、術(shù)后胃腸減壓和維持電解質(zhì)平衡等措施加以預(yù)防,但是缺乏主動(dòng)干預(yù)促進(jìn)術(shù)后胃腸動(dòng)力快速恢復(fù)的方法。大量臨床與實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)[5],中醫(yī)藥應(yīng)用對(duì)術(shù)后胃腸功能的快速恢復(fù)具有優(yōu)勢(shì)。
中醫(yī)認(rèn)為,胃腸運(yùn)動(dòng)功能與脾胃氣機(jī)的升降傳輸密切相關(guān)。腹部手術(shù)擾亂了體內(nèi)正常的氣機(jī)運(yùn)行,且損耗胃腸氣血,臟器失于疏泄,脾胃失于運(yùn)化。針刺調(diào)整胃腸功能療效良好,且操作方便,不受禁食的影響,不必改變體位。取四肢遠(yuǎn)端穴位治療,通過(guò)刺激經(jīng)絡(luò)穴位而激發(fā)機(jī)體潛在的自我調(diào)節(jié)機(jī)能,促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)恢復(fù)。足三里穴有全身性強(qiáng)壯作用,能“理脾胃”、“和腸道消滯”、“通調(diào)經(jīng)絡(luò)氣面”,為臨床治療腹腔內(nèi)臟病的要穴,以“肚腹三里留”著稱。上巨虛調(diào)和腸胃,行氣化瘀,常用于腹痛、腹脹、痢疾、便秘、腸痛等。兩穴用于術(shù)后腸麻痹治療,有較好的臨床療效[6]。
墨汁推進(jìn)率是反映大鼠腸蠕動(dòng)功能的一個(gè)最客觀、直接的指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,各時(shí)間點(diǎn)模型組墨汁推進(jìn)率明顯低于模型組,提示模擬臨床上常見(jiàn)的全小腸探查操作,對(duì)小腸行推擠操作確實(shí)能抑制腸蠕動(dòng),成功制備術(shù)后腸麻痹模型。術(shù)后針刺72h小腸推進(jìn)率較模型組明顯提高,顯示大鼠術(shù)后電針刺激在術(shù)后3天體現(xiàn)最佳療效。
MTL與胃腸平滑肌細(xì)胞上受體有著高度的親和力,能夠刺激上消化道的機(jī)械運(yùn)動(dòng)和生理性肌電活動(dòng)的作用[7]。手術(shù)創(chuàng)傷可刺激體內(nèi)兒茶酚胺的分泌,兒茶酚胺可通過(guò)抑制MTL和胃泌素的分泌而影響胃腸功能,低水平的MTL和胃泌素可直接導(dǎo)致術(shù)后胃腸功能紊亂,動(dòng)力減弱。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,電針組術(shù)后72、120h血清MTL水平較模型組明顯提高(P<0.05,P<0.01),而在 24h 時(shí)間點(diǎn)并無(wú)明顯差異,可見(jiàn)電針治療術(shù)后腸麻痹起效時(shí)間在術(shù)后3天,并有一定的持續(xù)改善作用。
總之,電針治療術(shù)后腸麻痹具有顯著的臨床療效,但其作用機(jī)制并不明確,值得進(jìn)一步研究。
[1]崔生輝,李業(yè)鵬,李玉偉,等.抑制腸蠕動(dòng)的小鼠模型的建立[J].衛(wèi)生研究,2000,29(6):385-386.
[2]鄧春雷,殷克敬.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1998:147-148.
[3] Kraft MD.Methylnaltrexone,a new peripherally acting muopioid receptor antagonist being evaluated for the treatment of postoperative ileus[J].Expert Opin Investig Drugs,2008,17:1365-1377.
[4]江志偉,李寧,黎介壽.術(shù)后腸麻痹臨床表現(xiàn)及病理生理機(jī)制[J].中國(guó)實(shí)用外科雜志,2007,27(5):682-683.
[5]顧媛媛,李春婷.中藥促胃腸動(dòng)力作用研究概述[J].實(shí)用中醫(yī)藥雜志,2010,26(3):21.
[6]牛亞清,吳寧霞.針灸治療腹部手術(shù)后腹脹的體會(huì)[J].新疆中醫(yī)藥,2007,25(4):62.
[7] Gao Z,Muller MH,Karpitschka M,et al.Role of the vagus nerve on the development of postoperative ileus[J].Langenbecks Arch Surg,2010,395:407-411.