采前3種殺菌劑噴施對櫻桃番茄采后品質(zhì)的影響及啶菌噁唑殘留檢測

奉代力，鄭紀(jì)慈，陳文學(xué)，蔡磊明，徐明飛，仇厚援,*，王 強(qiáng)

（1.海南大學(xué)食品學(xué)院，海南 海口 570228；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所，農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥殘留檢測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地“浙江省植物有害生物防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室”，浙江 杭州 310021）

采前3種殺菌劑噴施對櫻桃番茄采后品質(zhì)的影響及啶菌噁唑殘留檢測

奉代力1,2，鄭紀(jì)慈2，陳文學(xué)1，蔡磊明2，徐明飛2，仇厚援1,*，王 強(qiáng)2

（1.海南大學(xué)食品學(xué)院，海南 海口 570228；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所，農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥殘留檢測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地“浙江省植物有害生物防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室”，浙江 杭州 310021）

以金珠櫻桃番茄為試材，研究采前殺菌劑噴施對采后櫻桃番茄發(fā)病率、質(zhì)量損失率和食用品質(zhì)的影響，并測定櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留變化。結(jié)果表明：采前噴施殺菌劑顯著降低了金珠櫻桃番茄采后發(fā)病率，提高了櫻桃番茄果實(shí)中VC和可溶性固形物含量，減緩了VC和可溶性固形物含量貯藏期間的損失；但對質(zhì)量損失率和可滴定酸含量的影響不顯著（P＜0.05）。對櫻桃番茄采后貯藏保鮮效果最好的殺菌劑為啶菌噁唑，噴施質(zhì)量濃度為0.4 g/L。采前噴施啶菌噁唑后，櫻桃番茄中啶菌噁唑殘留在采前和采后均呈下降趨勢；且采后櫻桃番茄中啶菌噁唑殘留下降的速度比采前下降的慢，貯藏溫度越低，下降越慢。

采前殺菌劑噴施；櫻桃番茄；品質(zhì)；啶菌噁唑殘留

櫻桃番茄（Lyc apersicon esculentum var. cerasiforme Alef.）又名微型番茄、迷你番茄、小番茄等，是茄科番茄屬番茄栽培亞種中的一個(gè)變種[1]。櫻桃番茄果實(shí)采后的各種生理[2]、物理[3]或病理[4]上的因素是造成番茄采后品質(zhì)下降和采后損耗的主要原因。Atherton等[5]認(rèn)為，番茄采后主要病害為鏈格胞菌（Alternaria solani）、灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、根霉屬菌（Rhizopus）和有機(jī)械傷和生理障礙引起的霉變及細(xì)菌性軟腐?。‥rwinia carotovora）。但事實(shí)上引起番茄采后病理性腐爛的遠(yuǎn)不止這些 病原菌，如疫霉屬（Ph ytophthora）、殼針孢屬（Septoria）、葉點(diǎn)霉屬（Phyllosticta）、炭疽菌（Colletotrichum nigrum）等導(dǎo)致番茄田間病害的常見病原[6-7]，都能引起番茄果實(shí)采后病理性腐爛。采前藥劑處理[8]是采前處理保鮮的重要方向，保鮮藥劑種類主要有：殺菌劑[9-10]、礦質(zhì)元素[11]、抗性誘導(dǎo)劑[8]、植物生長調(diào)節(jié)劑[12]等。采前田間殺菌劑處理可減少果實(shí)上病原菌的基數(shù)，還能調(diào)節(jié)植物代謝，誘導(dǎo)植物抗病性，提高了果蔬的抗病性、耐貯性，減慢其生理代謝，對果實(shí)的采后品質(zhì)也有較好的保持作用，與采后處理相比，還減少了化學(xué)農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)[13]，國外學(xué)者已開始研究采前殺菌劑處理應(yīng)用于番茄等果蔬采后保鮮的效果及其作用機(jī)理[14-15]。

本實(shí)驗(yàn)通過采前田間不同殺菌劑噴施處理，研究了采前田間殺菌劑噴施對櫻桃番茄采后不同貯藏條件下發(fā)病率、質(zhì)量損失率、貯藏期品質(zhì)的影響，同時(shí)測定了在不貯藏溫度條件下櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留的變化，以期為減少櫻桃番茄采后病理性腐爛提供更為簡便采前處理方法，并初步了解櫻桃番茄采后貯藏過程中農(nóng)藥殘留量變化。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

金珠櫻桃番茄種植于浙江紹興市春-夏季大棚；25%啶菌噁唑乳油 沈陽科創(chuàng)化學(xué)品有限公司；8×109CFU/mL枯草芽孢桿菌水劑 新沂中凱農(nóng)用化工有限公司；2×108CFU/g木霉菌液體可懸浮劑 山東泰諾藥業(yè)有限公司；啶菌噁唑標(biāo)準(zhǔn)品（純度為95.8%）沈陽化工研究院有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

MLR-350HT人工氣候箱 日本三洋公司；SXLK16背負(fù)式手動(dòng)噴霧器 市下控股有限公司；SPS402F電子天平（感量0.01 g）、PL203-JC電子天平（感量0.001 g） 梅特勒-托利多 儀器（上海）有限公司；FA1004電子天平（感量0.1 mg） 上海天平儀器廠；Varian-920LC高效液相色譜儀（配有紫外檢測器） 美國Varian公司；SunfireTMC18柱（250 mm×4.6 mm）美國Waters公司。

1.3 采前田間殺菌劑噴施

將啶菌噁唑、枯草芽孢桿菌、木霉菌按表1的噴施量用清水稀釋，分別于采前7 d用手動(dòng)背負(fù)式噴霧器噴灑櫻桃番茄葉片和果實(shí)表面，以清水噴灑為空白對照，每個(gè)處理3個(gè)平行。噴灑7 d后采收，成熟度約為八成熟，當(dāng)日運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。貯藏條件為20、12、5 ℃，用聚乙烯食品保鮮袋（35 cm×25 cm）分裝，貯藏時(shí)間為21 d。

表 1 供試藥劑噴施量Table 1 Spaying doses of fungicides

1.4 指標(biāo)測定

1.4.1 發(fā)病率與質(zhì)量損失率

貯藏21 d后統(tǒng)計(jì)各處理發(fā)病率和質(zhì)量損失率，每個(gè)處理重復(fù)3次，每個(gè)處理20個(gè)果實(shí)；櫻桃番茄發(fā)病以果實(shí)表面出現(xiàn)可見病斑為依據(jù)，發(fā)病率計(jì)算如公式（1）[16]所示：

質(zhì)量損失率測定采用稱質(zhì)量法[17]。

1.4.2 品質(zhì)指標(biāo)

貯藏21 d后分別測定各處理金珠櫻桃番茄中VC、可滴定酸（total acid，TA）、總可溶性固形物（total soluble solids，TSS）含量。VC含量測定：采用2,6-二氯靛酚滴定法[18]；TA含量測定：采用中和法[19]；TSS含量測定：采用手持測糖儀測定[20]。VC、TA、TSS各指標(biāo)每個(gè)處理重復(fù)測定3次，取平均值。

1.4.3 啶菌噁唑殘留

分別測定啶菌噁唑噴施后2 h，噴施后7 d櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留量；櫻桃番茄貯藏后，分別在3、6、9、15、21 d測定櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留量變化。所有測定重復(fù)3次，取平均值。啶菌噁唑殘留檢測參考韓平等[21]的方法，并作一定的修改。

1.4.3.1 樣品制備

取待測番茄樣品500 g，用干凈紗布擦去表面附著物，采用對角線分割法，分別取果實(shí)對角部分，約200 g，將其切碎，直接放入勻漿機(jī)中搗成勻漿。勻漿后放入聚乙烯瓶中，于-20 ℃保存。樣品測定前于室溫條件下解凍。

1.4.3.2 樣品預(yù)處理

提?。悍謩e稱取20 g待測樣品置于100 mL三角瓶中，加入50 mL乙酸乙酯，30 ℃恒溫振蕩60 min，布氏漏斗抽慮，將濾液轉(zhuǎn)移至裝有3～5 g無水氯化鈉的100 mL具塞量筒內(nèi)，劇烈振蕩2 min，室溫靜置30 min，使有機(jī)相與水相充分分層。分別從上述100 mL具塞量筒中吸取25 mL 上層乙酸乙酯有機(jī)相，放入150 mL圓底燒瓶中，40 ℃減壓濃縮干。

凈化：將Cleanert C18-SPE小柱安裝在固相萃取的真空抽慮裝置上，依次用5 mL甲醇、5 mL預(yù)淋洗萃取柱，棄去全部預(yù)淋洗液；用10 mL淋洗液分兩次超聲溶解濃縮干的櫻桃番茄樣品，溶解后依次加入到固相萃取柱中，待淋洗液全部流出后（棄去淋洗液），再用10 mL的甲醇（分析純）分兩次洗脫，用150 mL圓底燒瓶收集全部洗脫液，40 ℃條件下減壓濃縮至近干，再用氮?dú)獯蹈?。? mL色譜甲醇超聲溶解，0.22 μm有機(jī)濾膜過濾，裝入液相進(jìn)樣小瓶，待測。

1.4.3.3 液相色譜分析條件

SunfireTMC18柱（250 mm×4.6 mm）；柱溫：常溫；檢測波長：220 nm；流動(dòng)相：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：50 μL；流動(dòng)相甲醇（B）∶水（A）為70∶30；啶菌噁唑試樣保留時(shí)間9.5 min。

1.4.3.4 結(jié)果計(jì)算

采用外標(biāo)法定量，峰面積為Z式和E式兩個(gè)異構(gòu)體峰面積之和。按式（2）計(jì)算櫻桃番茄果實(shí)試樣中啶菌噁唑含量：

式中：X為櫻桃番茄試樣中啶菌噁唑的的殘留含量/（mg/kg）；A為樣液的峰面積；ρs為標(biāo)準(zhǔn)工作液中啶菌噁唑的質(zhì)量濃度/（mg/L）；V為樣液最終的定容體積/mL；As為標(biāo)準(zhǔn)工作液中啶菌噁唑的峰面積；m為樣品稱樣質(zhì)量/g；50為乙酸乙酯提取液的體積/mL；25為提取后吸取出的體積/mL。

1.5 數(shù)據(jù) 處理

采用Excel軟件對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析與制圖，采用SPSS軟件顯著性差異分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 采前殺菌劑噴施對櫻桃番茄采后貯藏期發(fā)病率和質(zhì)量損失率的影響

采前田間殺菌劑噴施后的金珠櫻桃番茄樣品，在20、12、5 ℃條件下貯藏21 d，發(fā)病率和質(zhì)量損失率結(jié)果見圖1。

不同小寫字母表示差異顯著（P＜0.05）。下同。Fig.1 Effect of preharvest spraying with fungicides on disease incidence and weight loss of “Jinzhu” cherry tomato

由圖1可知，采前田間啶菌噁唑噴施后金珠櫻桃番茄的發(fā)病率顯著低于空白處理（P＜0.05）；枯草芽孢桿菌噴施和木霉菌噴施后發(fā)病率有所降低，但效果均不顯著。采前田間殺菌劑噴施金珠櫻桃番茄的質(zhì)量損失率均低于空白處理，但差異不顯著（P＞0.05）。

綜合上述結(jié)果，采前田間殺菌劑噴施后的金珠櫻桃番茄采后發(fā)病率均有所降低，采前田間啶菌噁唑噴施對降低櫻桃番茄采后20、12、5 ℃貯藏條件下發(fā)病率的效果顯著（P＜0.05）；采前田間殺菌劑噴施對金珠櫻桃番茄采后貯藏過程中質(zhì)量損失率的影響不大。

2.2 采前殺菌劑噴施對櫻桃番茄采后貯藏期品質(zhì)的影響

圖2 采前殺菌劑噴施對金珠櫻桃番茄中VC含量的影響Fig.2 Effect of preharvest spraying with fungicides on vitamin C content of “Jinzhu” cherry tomato

由圖2可知，采前田間殺菌劑噴施7 d后，各殺菌劑處理金珠櫻桃番茄中VC含量均高于對照，其中啶菌噁唑噴施對金珠櫻桃番茄中VC含量的提高顯著（P＜0.05）；金珠櫻桃番茄在20、12、5 ℃貯藏21 d后，各殺菌劑噴施金珠櫻桃番茄中VC含量均降低，啶菌噁唑和枯草芽孢桿菌噴施后金珠櫻桃番茄中VC含量均顯著高于空白對照（P＜0.05）；殺菌劑中，枯草芽孢桿菌噴施對金珠櫻桃番茄減少VC含量損失的效果較好。

圖3 采前殺菌劑噴施對金珠櫻桃番茄TA含量的影響Fig.3 Effect of preharvest spraying with fungicides on titratable acidity of “Jinzhu” cherry tomato

如圖3所示，采前田間殺菌劑噴施7 d后，各殺菌劑處理的金珠櫻桃番茄中TA含量有一定減少，但影響不顯著；20、12、5 ℃貯藏21 d后，各殺菌劑處理間金珠櫻桃番茄中TA含量差異不顯著（P＞0.05）。

由圖4可知，采前田間殺菌劑噴施7 d后，各殺菌劑處理金珠櫻桃番茄中TSS含量均有所升高，木霉菌噴施對金珠櫻桃番茄中TSS的含量影響顯著；20、12、5 ℃貯藏21 d后，各處理金珠櫻桃番茄中TSS含量的差異不顯著（P＞0.05）。

圖4 采前殺菌劑噴施對金珠櫻桃番茄TSS含量的影響Fig.4 Effect of preharvest spraying with fungicides on total soluble solid content of “Jinzhu” cherry tomato

綜合上述結(jié)果，采前田間殺菌劑噴施提高了金珠櫻桃番茄中VC含量和TSS含量，對減緩櫻桃番茄采后貯藏過程中VC含量的損失有一定效果，其中效果較好的殺菌劑為啶菌噁唑和枯草芽孢桿菌。

2.3 櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留量的檢測

2.3.1 啶菌噁唑檢測方法的回收率和精密度

在櫻桃番茄空白樣品中，按照0.5、1.0、5.0 mg/kg 3個(gè)啶菌噁唑添加水平，測定得到回收率為88.69%～96.82%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.21%～3.03%；該方法最低檢出限為0.01 mg/kg。該方法滿足本實(shí)驗(yàn)櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留量檢測的要求。

2.3.2 櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留量的變化

圖5 金珠櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑的殘留量變化Fig.5 The dynamic change of SYP-Z048 residue in “Jinzhu”cherry tomato fruits

由圖5可知，田間噴施啶菌噁唑后的2 h～7 d，金珠櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留由2 h的1.19 mg/kg 迅速下降至7 d后的0.54 mg/kg；在櫻桃番茄采摘后的室內(nèi)貯藏過程中，啶菌噁唑殘留繼續(xù)降低，但變化趨勢變緩，貯藏21 d后，20 ℃貯藏櫻桃番茄中啶菌噁唑殘留降至0.04 mg/kg，12 ℃貯藏降至0.05 mg/kg，而5 ℃貯藏降至0.11 mg/kg。采前田間噴施后，櫻桃番茄中啶菌噁唑殘留在采前和采后呈下降趨勢，但在采后貯藏過程中下降速度比采前慢；采后貯藏櫻桃番茄中啶菌噁唑殘留下降與貯藏溫度有關(guān)，貯藏溫度越低，啶菌噁唑下降越慢。

3 結(jié)論與討論

殺菌劑的作用是抑制櫻桃番茄果實(shí)中致病菌生長和增殖，增強(qiáng)櫻桃番茄果實(shí)的抗病性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，采前殺菌劑噴施顯著減少了金珠櫻桃番茄采后貯藏期發(fā)病率，采前殺菌劑噴施對櫻桃番茄采后貯藏仍能起到防治的效果。但是采前殺菌劑噴施對櫻桃番茄果實(shí)中營養(yǎng)物質(zhì)的影響及農(nóng)藥殘留安全也是需要關(guān)注的一方面。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采前殺菌劑噴施后提高了櫻桃番茄中VC含量和TSS含量，但對TA含量的影響不顯著，而且對采后TA和TSS含量的作用也不顯著，還有待深入研究。

農(nóng)產(chǎn)品采后農(nóng)藥殘留量變化受到多種因素的影響，包括農(nóng)藥自身的揮發(fā)、滲透、代謝，還包括農(nóng)產(chǎn)品呼吸和微生物活性的降解作用，以及貯藏環(huán)境（特別是溫度）的影響[22-23]。本研究中，采后貯藏過程中櫻桃番茄中啶菌噁唑殘留量呈下降趨勢，但是與采前相比，下降速度減緩，這可能與櫻桃番茄采后貯藏的環(huán)境有關(guān)，但需進(jìn)一步研究證實(shí)。另外本研究發(fā)現(xiàn)，櫻桃番茄貯藏溫度下降時(shí)，啶菌噁唑殘留量的下降速度也是明顯降低的，因此貯藏溫度是影響采后櫻桃番茄果實(shí)中啶菌噁唑殘留量變化的重要因素之一，這與李莉等[23]的報(bào)道是一致的。目前，啶菌噁唑還沒有殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，本實(shí)驗(yàn)只能測定其在采后的殘留變化情況，不能對其殘留安全進(jìn)行評(píng)價(jià)，可為今后制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

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Effect of Preharvest Spraying with 3 Fungicides on Quality and SYP-Z048 Residues of Postharvest Cherry Tomato Fruits

FENG Dai-li1,2, ZHENG Ji-ci2, CHEN Wen-xue1, CAI Lei-ming2, XU Ming-fei2, QIU Hou-yuan1,*, WANG Qiang2
(1. College of Food Science, Hainan University, Haikou 570228, China; 2. State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Plant Pest Control, Key Laboratory for Pesticide Residue Detection, Ministry of Agriculture, Institute of Quality Standards for Agricultural Products, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, China)

“Jinzhu” cherry tomato was used to investigate the effect of preharvest fungicide spraying on the incidence of diseases, weight loss, eating quality and SYP-Z048 residues of postharvest fruits. The results showed that pre-harvest fungicide spraying dramatically reduced the disease incidence of postharvest “Jinzhu” cherry tomato, increased the contents of vitamin C and total soluble solids (TSS) and delayed their loss during postharvest storage, but did not significantly affect weight loss and the content of TA (P < 0.05). The best pre-harv est fungicide was SYP-Z048 at a concentration of 0.4 g/L. SYP-Z048 residues revealed a declining trend both in preharvest cherry tomato fruits and in postharvest ones, declining slower in postharvest fruits. Moreover, lower storage temperature resulted in a slower declining rate.

preharvest fungicide spraying; cherry tomato; quality; SYP-Z048 residues

S641.2

A

1002-6630（2014）06-0224-05

10.7506/spkx1002-6630-201406048

2013-04-28

杭州市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（20110232B25）

奉代力（1984—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏。E-mail：zyyfdl23@163.com

*通信作者：仇厚援（1953—），男，教授，本科，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏。E-mail：qiuhouyuan@sohu.com