河南千里光根莖化學(xué)成分研究

陳玉海

（河南省宛西制藥股份有限公司，河南 南陽 474550）

千里光（Senecio scandens Buch，-Ham.）為菊科千里光屬多年生草本植物，又名九里明、九里光、黃花母等。全草可入藥，全年均可采收，除去雜質(zhì)，陰干[1]。我國約有 100多種，生于山坡、疏林下、林邊、路旁、溝邊草叢中。主要分布于我國浙江、江蘇、安徽等地，河南、廣西、云南也有分布。多年生蔓性草木，長2～5米。根狀莖圓柱形，土黃色，下生多條粗壯根及少量須根。千里光為常用草藥，具有清熱解毒，清肝明目，殺蟲止癢、散瘀消腫、驅(qū)風(fēng)除濕之功效。用于治療風(fēng)熱感冒、目赤腫痛、泄瀉痢疾、皮膚濕疹瘡癤等。民間廣泛用于治療各種炎癥和皮膚病，是我國應(yīng)用歷史悠久的常用中藥。

多年來，國內(nèi)外學(xué)者對千里光化學(xué)成分、藥理作用、分析方法、毒理、臨床應(yīng)用等方面均有研究，但國內(nèi)學(xué)者對其化學(xué)成分的研究較少，陳錄新等[2]和史輯等[3-4]均從該植物中分離出數(shù)種化合物。陳錄新等[5]曾對千里光的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，認(rèn)為其化學(xué)成分主要含有黃酮類、酚酸類、揮發(fā)油、生物堿等。王秀坤等[6]曾對其毒性進(jìn)行研究，不同產(chǎn)地千里光毒性不同，廣西、湖北產(chǎn)千里光未見明顯毒性，江蘇、浙江、四川和河南產(chǎn)千里光具有一定毒性；其中以河南千里光毒性最強(qiáng)。千里光的毒性成分作用部位、物質(zhì)基礎(chǔ)研究及作用機(jī)制尚有待更深一步的探討。梁愛華等[7]對千里光毒性成分研究進(jìn)展也進(jìn)行了綜述。根據(jù)其殺菌、消毒、止癢等功能，王浩貴[8]發(fā)明了千里光洗滌制品。

《中國藥典》一部收載的菊科植物“千里光”的使用部位是地上部分。本文對河南千里光根莖進(jìn)行研究，為進(jìn)一步探明千里光的化學(xué)成分，為其藥材的質(zhì)量控制及后續(xù)研究應(yīng)用奠定基礎(chǔ)，對河南的千里光根莖進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究。

1 儀器與材料

JHBE-50S型閃式提取器（河南金鼐科技發(fā)展有限公司）；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；ZF-1型三用紫外線分析儀（上海山連試驗(yàn)設(shè)備有限公司）；KQ-C型玻璃儀器氣流烘干器（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；SHZ-D（Ⅲ）型循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；KQ3200DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；FW 177型中草藥粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）。

千里光根莖于2009年1月采自河南省濟(jì)源市，由鄭州大學(xué)藥學(xué)院王彩芳博士鑒定為千里光的根莖。

2 提取與分離

取千里光根莖730 g，中草藥粉碎機(jī)粉碎。于閃式提取器中用95%乙醇2 500 m L提取3次，減壓蒸餾濃縮回收乙醇，得浸膏1。藥渣再用75%乙醇2 500 m L閃式提取2次，減壓蒸餾濃縮回收乙醇，得浸膏2。將浸膏1和浸膏2合并，得浸膏約80 g。用乙酸乙酯萃取，從中分離出有機(jī)相和水相，保留有機(jī)相。

有機(jī)相過硅膠柱（Φ8 cm×120 cm），用石油醚-乙酸乙酯（1∶0→20∶1→10∶1→6∶1→2∶1→1∶1）梯度洗脫，得洗脫液五部分，分別用洗脫液Fr.1、洗脫液 Fr.2、洗脫液 Fr.3、洗脫液 Fr.4、洗脫液Fr.5表示。另外，F(xiàn)r.1為洗脫液的編號，F(xiàn)r.1.1為洗脫液Fr.1經(jīng)再處理所得的洗脫液，其他類似。

將洗脫液 Fr.2部分硅膠拌樣，過硅膠柱（Φ 2 cm×35 cm），硅膠柱長28 cm，樣品帶長1.8 cm，用石油醚-乙酸乙酯（20∶3）洗脫得洗脫液Fr.2.2。Fr.2.2洗脫液母液過硅膠柱 （Φ2 cm×29 cm），用石油醚-乙酸乙酯（20∶1.5）洗脫，得晶體，洗凈，點(diǎn)樣鑒別，紫外和磷鉬酸顯色斑點(diǎn)都只有1個(gè)，推斷其為純品，編號為化合物1。

Fr.3部分有晶體析出，無色透明針狀。將母液拌樣，樣品約0.6 g，過硅膠柱（Φ2.5 cm×33 cm），然后用Fr.2.2洗脫液的石油醚-乙酸乙酯回收混合液平衡柱子，之后用石油醚-乙酸乙酯（7:1）洗脫，得大量晶體，洗凈，點(diǎn)樣鑒別，紫外和磷鉬酸顯色斑點(diǎn)都只有1個(gè)，推斷其為純品，編號為化合物2。

Fr.5部分過 Sephadex LH-20柱 （Φ3 cm× 60 cm），甲醇洗脫，得洗脫液五部分（分別用 Fr. 5.1、Fr.5.2、Fr.5.3、Fr.5.4、Fr.5.5表示）。Fr.5.2部分過Toyo柱 （Φ3 cm×35 cm），50%甲醇洗脫，得洗脫液三部分（Fr5.2.1、Fr5.2.2、Fr.5.2.3）。Fr.5. 2.1部分過硅膠柱（Φ6 cm×30 cm），氯仿-甲醇（2∶1）洗脫，并用水將洗脫劑飽和，有無色透明方晶析出。重結(jié)晶后發(fā)現(xiàn)瓶口密封膠上有層黏性物質(zhì)，刮下點(diǎn)樣，丙二醇甲醚醋酸酯（PMA）顯色為單一斑點(diǎn)，初步推斷為純品，編號為化合物3。

3 化合物結(jié)構(gòu)鑒定

3.1 化合物1

化合物1為白色固體?；衔?的核磁共振氫譜（1H-NMR）（CDCl3，500.13MHz）中，化學(xué)位移δ為 0.88（3H，t），說明有 1個(gè)甲基，1.25～ 1.33（42H，n個(gè)CH2）說明有21個(gè)亞甲基，1.63（2H，m），與不飽和碳間接相連的亞甲基，2.35（2H，t），與不飽和碳直接相連的亞甲基。核磁共振碳譜（13C-NMR）（CDCl3）測定的化學(xué)位移 δ為 177.9，羧基上的碳信號是 33.7，31.9，29.5（n×CH2），24.7，22.7，14.1，1H-NMR和 13C-NMR結(jié)合起來分析，此數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]中二十五碳酸的數(shù)據(jù)吻合，綜上鑒定化合物1為二十五碳酸，其分子式為C25H50O2。結(jié)構(gòu)式見圖 1。

圖1 化合物1的結(jié)構(gòu)式

3.2 化合物2

化合物2為無色透明針晶，與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品薄層色譜法（TLC）檢測在多種展開劑系統(tǒng)中Rf值相同，混合熔點(diǎn)不下降，所以鑒定該化合物為β-谷甾醇，結(jié)構(gòu)式見圖2。

圖2 化合物2的結(jié)構(gòu)式

3.3 化合物3

化合物3為無色透明方晶，易溶于水。化合物3的核磁共振碳譜13C-NMR（CDCl3，125 MHz）中出現(xiàn)12個(gè)碳信號，數(shù)據(jù)見表1。核磁共振氫譜（1H-NMR）顯示有2個(gè)糖的端基質(zhì)子5.26（1H，d，J=3.8Hz）和 4.06(1H，d，J=8.8Hz)，由 2個(gè)糖端基質(zhì)子偶合常數(shù)可知D-吡喃葡萄糖的C-1為α構(gòu)型，D-呋喃果糖的 C-2為 β構(gòu)型，其核磁共振（NMR）數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]中蔗糖的數(shù)據(jù)吻合，故鑒定化合物3為蔗糖，結(jié)構(gòu)式見圖3。

4 結(jié)論

通過色譜方法從河南千里光根莖中分離得到3個(gè)化合物，經(jīng)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定，分別為二十五碳酸、β-谷甾醇和蔗糖，為該藥材的質(zhì)量控制及后續(xù)研究應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

表1 化合物3的核磁共振波譜數(shù)據(jù)

圖3 化合物3的結(jié)構(gòu)式

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2010版）一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：32.

[2] 陳錄新，馬鴻雁，張勉，等.千里光化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，2006，31（22）：40-43.

[3] 史輯，張芳，馬鴻雁，等.千里光化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，2007，32（15）：110-112.

[4] Shi Ji，Yang Li，Wang CH，et al.A new lactone from Senecio scandens[J].Biochem，Sys Eco，2007，35：901-904.

[5] 陳錄新，李寧，張勉，等.千里光的研究進(jìn)展[J].海峽藥學(xué)，2006，18（4）：17-20.

[6] 王秀坤，趙雍，梁愛華，等.不同產(chǎn)地千里光急性毒性實(shí)驗(yàn)研究[J].藥物不良反應(yīng)雜志，2008，10（2）：11-15.

[7] 梁愛華，葉祖光.千里光屬植物的毒性研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志，2006，31（2）：7-11.

[8] 王浩貴.千里光洗滌制品[S].中國專利.CN1670150，2005-09-21.

[9] Gusi AG，Makar’eva TN，Svetashev VI，et al.New ceram ides from sea sponge Oceanapia sp[J].Bioorg Khim，2006，32（3）：288-294.

[10] 馮衛(wèi)生，王彥志，鄭曉珂.中藥化學(xué)成分結(jié)構(gòu)解析[M].北京：科學(xué)出版社，2008：80-81.