色譜樣品的制備方法

摘要：本文根據(jù)色譜樣品制備技術(shù)的發(fā)展趨勢，通過對色譜樣品制備方法的簡要介紹，提出了色譜樣品制備的注意事項，從而達到更好地完成色譜分析工作的目標。

關(guān)鍵詞：色譜；樣品；制備方法

中圖分類號：O657.75 文獻標識碼： A 文章編號： 1674-0432（2014）-02-22-1

環(huán)境污染物在食品成分中的存在，有自然背景和人類活動影響兩方面的原因。其中，無機環(huán)境污染物在一定程度上受食品產(chǎn)地的地質(zhì)地理條件所左右，更為普遍的污染源主要是工業(yè)、采礦、能源、交通、城市排污及農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等帶來的，通過環(huán)境及食物鏈而危及人類飲食健康。這就需要一種或幾種特殊的樣品前處理方法把污染物質(zhì)從農(nóng)產(chǎn)品中提取出來。

1 色譜分析法概述

色譜分析方法作為一種分離技術(shù)與方法，目前廣泛地應(yīng)用于環(huán)境保護監(jiān)測、生物樣品分析、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測、食品分析、香料組成分析、農(nóng)藥與農(nóng)藥殘留分析等領(lǐng)域。色譜分析方法主要包括氣相色譜、液相色譜（包括離子色譜）、平面色譜及相關(guān)的聯(lián)用技術(shù)。如：氣相色譜—質(zhì)譜、液相色譜—質(zhì)譜、色譜—紅外光譜等的聯(lián)用分析技術(shù)。色譜分析方法具有分離效率高、成本低、易于與其他儀器裝置聯(lián)用等特點。

2 色譜樣品的制備方法

色譜樣品制備技術(shù)是隨著分離科學(xué)的發(fā)展而發(fā)展的，目前主要使用膜分離、固相萃取、吸附—熱解吸等新方法來分離預(yù)測定組分和干擾組分。

2.1 溶劑萃取方法

溶劑萃取法是利用有機溶劑將樣品中的有機毒物如農(nóng)藥、真菌毒素等提取出來加以純化、濃縮供檢測用的一種分離方法，通常也叫液—液萃取。常用于樣品中被測物質(zhì)與基質(zhì)分離，在兩種不相溶液體互相之間通過分配對樣品進行分離而達到被測物質(zhì)純化和消除干擾物質(zhì)的目的。通常，分析化學(xué)家首先在有機溶劑中分離出感興趣的被測物質(zhì)，然后，由于常用的溶劑具有較高的蒸氣壓，可以通過蒸發(fā)的方法將溶劑除去，以便濃縮這些被測物質(zhì)的目的。

2.2 固相萃取方法

固相萃取方法廣泛被應(yīng)用于樣品處理中，主要用來對即將進行分析的樣品進行濃縮和純化處理。固相萃取方法的分離機制與液相色譜方法相同，分離方式主要分為離子交換、吸附、正相和反相。

固相萃取所用的吸附劑也與液相色譜常用的固定相相同，只是在粒度上有所區(qū)別。使用固相萃取法能避免液-液萃取所帶來的許多問題。比如，易于乳化，不完全的相分離，較低的定量分析回收率，昂貴易碎的玻璃器皿和大量的有機廢液。與液—液萃取相比，固相萃取更有效，容易達到定量萃取，快速和自動化，一般說來固相萃取所需要時間為1/2，而費用為液—液萃取的1/5。固相萃取通常是用于液體樣品的準備和不易或不揮發(fā)樣品的萃取，但是也用于能預(yù)先提取到溶液里的固體樣品。其缺點是：目標化合物的回收率和精密度要低于液—液萃取。

2.3 微波萃取技術(shù)

在傳統(tǒng)的萃取過程中，能量首先無規(guī)則地傳遞給萃取劑，然后萃取劑擴散進入基體物質(zhì)，再從基體溶解或夾帶多種成分擴散出來，即遵循加熱—滲透基體—溶解或夾帶滲透出來的模式。微波萃取是利用微波能來提高萃取效率的一種新技術(shù)。微波溶出法主要適合于固體或半固體樣品，樣品制備的整個過程需要經(jīng)粉碎、與溶劑混合、微波輻射、分離萃取等步驟。

2.4 微波萃取的特點

傳統(tǒng)的萃取過程中能量積累和滲透過程以無規(guī)則的方式發(fā)生，萃取的選擇性很差，有限的選擇性只能通過改變?nèi)軇┑男再|(zhì)或延長溶劑萃取時間來獲得，前者由于同時受溶解能力和擴散系數(shù)的限制，選擇面很窄；后者則大大降低了萃取效率和速度。微波萃取由于能對萃取體系中的不同組分進行選擇性加熱，因而成為至今唯一能使目標組分直接從基體分離的萃取過程，具有較好的選擇性，同時提高了萃取效率。

2.5 衍生化技術(shù)

衍生化技術(shù)對提高檢測的靈敏度與懸著性、改善色譜分離、提高理化穩(wěn)定性、分離結(jié)構(gòu)近似的組分和輔助定性有重要作用。衍生化反應(yīng)過程中要注意在使用一些對水“敏感”的衍生化試劑時一定要對樣品和使用的溶劑進行脫水，并在反應(yīng)過程中避免水汽干擾。用反應(yīng)容器特別是密封墊片的材料應(yīng)絕對不含目標化合物，衍生化試劑和所用溶劑也要進行純化，不能含目標化合物。當(dāng)生成衍生物產(chǎn)物是易揮發(fā)化合物時應(yīng)用密封的衍生化容器或低溫冷凍處理防止目標化合物的流失。衍生化反應(yīng)完成后應(yīng)及時驚醒色譜縫隙，如不能及時分析，要將衍生化產(chǎn)物妥善存放，并盡快進行分析。

3 色譜樣品制備注意事項

物理方法制備色譜樣品時要注意防止欲測組分的丟失；化學(xué)方法制備色譜樣品時，除了要注意防止欲測組分丟失，還要注意化學(xué)反應(yīng)的回收率和有無副反應(yīng)。為此，在色譜樣品制備時，要作回收率的實驗，以校正最后的實驗結(jié)果。

在色譜樣品制備時還要注意所有使用的裝置、容器、化學(xué)試機、水等樣品所能接觸的物品，是否會給制備的色譜樣品帶來污染，所以在制備色譜樣品的同時要作空白對照，以檢驗色譜樣品制備的過程是否引入對欲測定組分測定有干擾物質(zhì)。在色譜樣品制備時，最好是將采集到的一個樣品分成兩份，同時植被兩個色譜分析用樣品，以檢測色譜樣品的可靠性。也可將采集到的一個樣品分成兩份后，在其中的一份中加入已知量的欲測組分，然后同時制備這兩個色譜分析用樣品，以計算色譜樣品制備的回收率。

總之，好的制備技術(shù)不但能最大限度的發(fā)揮現(xiàn)在色譜一起的分析測定功能，而且利用這些技術(shù)同樣也提高了用色譜儀器測定各種樣品的綜合術(shù)，以便在處理具體的樣品時可以準確、可靠和有效地完成色譜分析樣品的制備技術(shù)，完成好色譜分析測定任務(wù)。

作者簡介：趙珊珊，錦州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗檢測中心，助理農(nóng)藝師，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測。