蛤仔橙色和白色背景殼色的遺傳分析及雜種優(yōu)勢的研究

梁健，董克遜，閆喜武，霍忠明，吳云霞，楊鳳

(大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院遼寧省貝類良種繁育工程技術(shù)研究中心，遼寧大連116023)

在遺傳學(xué)上，雜交 (hybridization)是指基因型不同的個體之間進行的交配。而在分子生物學(xué)上，把兩條單鏈DNA或RNA的堿基配對稱為雜交。一般情況下，兩個近交系間的雜交會產(chǎn)生遺傳上相同的后代，這些后代的有害基因座大多處于雜合狀態(tài)，這樣便會產(chǎn)生具有雜交活力的子一代，即表現(xiàn)出雜種優(yōu)勢［1］。雜交是育種工作的重要手段，目前在農(nóng)作物 (水稻［2］、玉米［3］、小麥［4］、大豆［5］)及陸生家禽類 (豬［6］、牛［7］、羊［8］)中得到廣泛應(yīng)用。在水產(chǎn)動植物(魚［9］、蝦［10］、藻［11］、參［12］)的品種改良和生產(chǎn)中也發(fā)揮了重要的作用，并取得了一定效果。近些年來，海洋雙殼類貝殼顏色的多態(tài)現(xiàn)象得到了一些學(xué)者的重視并有一些相關(guān)報道［13-14］。蛤仔貝殼的殼面顏色變化各異，閆喜武等［15-16］、霍忠明等［17］對不同殼色品系的蛤仔進行了研究，發(fā)現(xiàn)其生長和存活存在一定的差異，而這種差異主要來源于遺傳差異，這為不同殼色蛤仔間的雜交奠定了基礎(chǔ)。本研究中，利用海洋橙和珍珠白兩個蛤仔Ruditapes philippinarum品系為材料，開展了2×2的雙列雜交試驗，通過對不同殼色蛤仔間雜種優(yōu)勢的計算，準確地評估雜交效果，統(tǒng)計雜交后代的殼色分離比，進而分析殼色遺傳機制，旨在為蛤仔種質(zhì)的改良、新品種的培育提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗親貝均為2齡的海洋橙品系第四代和珍珠白品系第五代蛤仔。海洋橙品系抗逆性強，殼面呈橙色，其表面有4條深色的不連續(xù)狀放射條帶;而珍珠白品系殼面呈白色，其左殼的背部有一條深色放射條帶，但右殼表面無任何花紋或條帶。2012年4月將兩品系試驗親貝裝入20目網(wǎng)袋 (40 cm×60 cm)中，在莊河貝類苗種場促熟，促熟期間，水溫為11～24℃，鹽度為26～29，pH為7．65～8．65。

1.2 方法

1．2．1 試驗設(shè)計 于2012年7月，取性腺成熟的親貝放于室內(nèi)，將其陰干8 h，將陰干后的親貝進行1 h的流水刺激，隨后放入新鮮海水中，親貝于3 h后逐漸產(chǎn)卵排精。挑出上述親貝，其表面的精卵用淡水清洗干凈后，放入塑料桶中，桶內(nèi)裝有1．0 L新鮮海水，10～15 min時親貝開始產(chǎn)卵排精。收集橙色品系 (O)3個雌性個體的卵子于一個小桶中，3個雄性個體的精子于另一個小桶中。同樣收集珍珠白品系 (W)的卵子、精子。采用2×2雙列雜交的方式建立4個試驗組 (表1)，每個試驗組均設(shè)2個平行。

表1 2×2雙列雜交試驗設(shè)計Tab.1 Design of 2×2 diallel cross experiment for Manila clam with various shell colors

1．2．2 幼蟲及稚貝的培育 幼蟲培育期間，水溫為24～29 ℃，鹽度為26～28，pH 為 7．68～8．62。每兩天換水一次，每次換水為全量換水，換水的篩絹網(wǎng)單獨使用以防交叉污染。幼蟲期餌料為等鞭金藻Isochrysis galbana，每天投喂兩次，投喂量為2500～4500 cells/mL;隨著幼蟲的生長，幼蟲的培育密度由6～8個/mL逐漸減少為2～3個/mL。適當調(diào)整密度以保持各個試驗組密度基本一致。待幼蟲附著后，混合投喂等鞭金藻和小球藻Chlorella vulgaris(體積比為1∶1)，投喂量為1×104～2×104cells/mL。

將40日齡的稚貝以每袋500粒分裝于80目網(wǎng)袋 (40 cm×60 cm)進行中間育成，并對網(wǎng)袋中的稚貝做好對應(yīng)的標記。稚貝培育期間，水溫為19～25 ℃，鹽度為27～29，pH 為7．8～8．4。根據(jù)稚貝的殼長更換適合的網(wǎng)袋，通過調(diào)整密度使各組密度基本保持一致。

1.3 數(shù)據(jù)處理

分別測量各試驗組 3、6、9、12、15、30、60、90日齡時蛤仔的殼長和存活率。用100倍顯微鏡測量殼長區(qū)間小于300 μm的幼蟲或稚貝，用40倍顯微鏡測量殼長區(qū)間為300 μm～2．0 mm的稚貝，用游標卡尺測量殼長大于2．0 mm的稚貝 (精確度為0．01 mm)。每次測量設(shè)置3個重復(fù)，每個重復(fù)隨機測量30個幼蟲個體。

幼蟲存活率為單位體積內(nèi)幼蟲數(shù)與D形幼蟲數(shù)的百分比;稚貝存活率為不同日齡存活稚貝的數(shù)量與變態(tài)稚貝數(shù)的百分比。

將測得的殼長換算成常用對數(shù) (lg x)的形式以減小方差齊性的影響［18］，將測得的存活率換算成反正弦函數(shù) (arcsin x)的形式［19］。利用 SPSS 17．0軟件對數(shù)據(jù)進行處理分析，采用單因素方差分析法 (One-way ANOVA)對各試驗組數(shù)據(jù)進行差異性檢驗，顯著性水平設(shè)為0．05。

參照鄭懷平等［20］對雜種優(yōu)勢的計算，公式如下:

其中:OO、OW、WW、WO分別代表各試驗組在相同日齡時的表型值 (殼長、存活);H為中親雜種優(yōu)勢;HOW、HWO分別為雙列雜交中正、反交組的單親雜種優(yōu)勢。

參照 Cruz等［21］、Zhang 等［22］的方法，采用雙因子分析模型檢測卵源效應(yīng)及配對策略對雜交組幼蟲表型性狀的影響，計算公式為

其中:Yijk為k個重復(fù)i個卵源j種配對方式下的表型值;u為常數(shù);EOi為表型值的卵源效應(yīng) (母本效應(yīng));MSj為表型值的配對效應(yīng);(EO×MS)ij為卵源與配對策略的交互作用;eijk為隨機誤差。

2 結(jié)果與分析

2.1 浮游期幼蟲的雜種優(yōu)勢

浮游期各試驗組幼蟲的殼長和生長優(yōu)勢見表2。其中WO組的殼長最大，OO組的殼長最小，二者之間有顯著性差異 (P＜0．05);OW組和WW組幼蟲的殼長居中，與其他試驗組無顯著性差異(P＞0．05)。這表明浮游期間，幼蟲表現(xiàn)出了一定的中親生長優(yōu)勢，正反交組的幼蟲也表現(xiàn)出了較強的單親生長優(yōu)勢，其中WO組的單親生長優(yōu)勢更加明顯一些。

浮游期各試驗組幼蟲的存活率和存活優(yōu)勢見表3。其中WW組的存活率最低，顯著低于OO組和OW組 (P＜0．05)，除9日齡外與WO組無顯著性差異 (P＞0．05)。在此期間，幼蟲存活率表現(xiàn)出一定的中親存活優(yōu)勢，且WO組表現(xiàn)出一定程度的單親存活優(yōu)勢，但OW組在3、6日齡時的存活優(yōu)勢為負數(shù)，在9日齡時才表現(xiàn)出微弱的單親存活優(yōu)勢。

卵源 (EO)與配對策略 (MS)對浮游期幼蟲生長與存活的方差分析結(jié)果見表4。幼蟲生長的雜種優(yōu)勢主要受卵源與交配策略交互作用的影響，卵源的影響次之，交配策略的影響最小;幼蟲存活的雜種優(yōu)勢主要受卵源的影響，交配策略的影響作用次之，卵源與交配策略交互作用的影響最小。

表2 浮游期各試驗組幼蟲的殼長和生長優(yōu)勢Tab.2 Shell length and growth heterosis of larvae in each experimental group during the pelagic stage

表3 浮游期各試驗組幼蟲的存活率和存活優(yōu)勢Tab.3 Survival rate and survival heterosis of larvae in each experimental group during the pelagic stage

表4 卵源 (EO)與配對策略 (MS)對浮游期幼蟲生長與存活率影響的方差分析Tab.4 Variance analysis of egg origin(EO)and mating strategy(MS)effects on shell length and survival during the pelagic stage

2.2 變態(tài)期幼蟲的生長和存活

變態(tài)期各試驗組幼蟲的殼長和生長優(yōu)勢見表5。其中WO組的殼長最大，顯著大于OO組 (P＜0．05)。由于幼蟲進入變態(tài)階段，各日齡之間的殼長基本沒有變化。此期間，幼蟲表現(xiàn)出一定程度的中親生長優(yōu)勢，且正反交組也顯現(xiàn)出較強的單親生長優(yōu)勢。

變態(tài)期各試驗組幼蟲的存活率和存活優(yōu)勢見表6。其中OW組的存活率最高，WW組最低，二者之間有顯著性差異 (P＜0．05)。幼蟲的中親存活優(yōu)勢和正反交組的單親存活優(yōu)勢均為正值。

變態(tài)期各試驗組幼蟲的變態(tài)時間、變態(tài)率和其雜種優(yōu)勢結(jié)果見表7。變態(tài)時間基本在18 d左右，各試驗組的變態(tài)率之間并無顯著性差異 (P＞0．05)，但其幼蟲變態(tài)率的中親雜種優(yōu)勢和正反交組的單親雜種優(yōu)勢分別為 10．57%、10．74%、10．41%，表現(xiàn)出較為強烈的雜種優(yōu)勢。

卵源 (EO)與配對策略 (MS)對變態(tài)期幼蟲生長與存活的方差分析結(jié)果見表8。幼蟲生長與存活的雜種優(yōu)勢主要影響因素均是卵源效應(yīng)，其次是卵源與交配策略的交互作用，交配策略幾乎未起到任何作用。

表5 變態(tài)期各試驗組幼蟲的殼長和生長優(yōu)勢Tab.5 Shell length and growth heterosis of larvae in each experimental group during the metamorphic stage

表6 變態(tài)期各試驗組幼蟲的存活率和存活優(yōu)勢Tab.6 Survival rate and survival heterosis of larvae in each experimental group during the metamorphic stage

表7 變態(tài)期各試驗組幼蟲的變態(tài)時間、變態(tài)率和雜種優(yōu)勢Tab.7 Metamorphic time，metamorphic rate and heterosis of larvae in each experimental group during the metamorphic stage

表8 卵源 (EO)與配對策略 (MS)對變態(tài)期幼蟲生長與存活率影響的方差分析Tab.8 Variance analysis of egg origin(EO)and mating strategy(MS)effects on shell length and survival during the metamorphic stage

2.3 稚貝期稚貝的生長與存活

稚貝期各試驗組稚貝的殼長和生長優(yōu)勢見表9。此期間，稚貝表現(xiàn)出一定程度的中親生長優(yōu)勢，且WO組的單親生長優(yōu)勢為正值，但OW組并未出現(xiàn)單親生長優(yōu)勢。稚貝的中親生長優(yōu)勢和WO組的單親生長優(yōu)勢隨日齡的增加呈下降的趨勢。

稚貝期各試驗組稚貝的存活率和存活優(yōu)勢見表10。各日齡中存活率最高的依然為OW組，最低的為WW組，二者之間有顯著性差異 (P＜0．05)。稚貝的中親存活優(yōu)勢和正反交組的單親存活優(yōu)勢均為正值。WO組的單親存活優(yōu)勢最高，平均值為9．07%。

卵源 (EO)與配對策略 (MS)對稚貝期稚貝生長與存活率的方差分析結(jié)果見表11。稚貝生長的雜種優(yōu)勢主要影響因素是卵源效應(yīng)，交配策略是影響稚貝生長的次要因素，卵源和交配策略的交互作用對稚貝生長的影響最小。而稚貝存活率的雜種優(yōu)勢主要影響因素是卵源效應(yīng)，卵源和交配策略的交互作用為次要因素，交配策略的影響最小。

表9 稚貝期各試驗組稚貝的殼長和生長優(yōu)勢Tab.9 Shell length and growth heterosis of juveniles in each experimental group during the juvenile stage

表10 各試驗組稚貝期幼蟲的存活率和存活優(yōu)勢Tab.10 Survival rate and survival heterosis of juveniles in each experimental group during the juvenile stage

表11 卵源 (EO)與配對策略 (MS)對稚貝期幼蟲生長與存活率影響的方差分析Tab.11 Variance analysis of egg origin(EO)and mating strategy(MS)effects on growth and survival during the juvenile stage

2.4 各試驗組稚貝的殼色分離比

各試驗組稚貝的殼色及其數(shù)量見表12。2個橙色品系自交系出現(xiàn)了2種不同的殼色分離 (圖1)，主要表現(xiàn)在殼面背景顏色上，出現(xiàn)了橙色和白色的分離，OO1分離比(橙色∶白色)為 3．11∶1，OO2為3．15∶1，符合3∶1的分離比 (表12)，說明橙色對白色為顯性，而橙色品系所特有的4條點狀條帶并未出現(xiàn)分離。珍珠白品系的2個自交系后代的殼面背景顏色均為白色，WW1出現(xiàn)不規(guī)則的條帶，而WW2均帶有珍珠白品系所特有的1條深色放射條帶。說明在殼面背景顏色方面兩試驗組的親本為純合子，在殼面花紋或條帶方面WW1的親本為雜合子。

表12 各試驗組稚貝的殼色及其數(shù)量Tab.12 Shell colors and numbers of juveniles in each experimental group

圖1 殼面背景顏色為白色 (左)和橙色 (右)Fig.1 Shell colors of white(left)line and orange(right)line

圖2 珍珠白 (左)和海洋橙 (右)對比Fig.2 White line(left)and orange line(right)

從殼面背景顏色上分析正反交組的后代，其表現(xiàn)出橙色和白色兩種不同的殼色 (圖3)，試驗組OW1、OW2和WO1的殼色分離比 (橙色∶白色)分別為1．01∶1、0．97∶1、1．07∶1，符合1∶1 的分離比 (表12)。從殼面花紋或條帶上分析，OW1、OW2、WO1的殼色從左到右依次分別為白色4條點狀條帶、白色1條深色放射條帶、橙色1條深色放射條帶、橙色4條點狀條帶，而WO2的殼色從左到右分別為白色1條深色放射條帶、橙色1條深色放射條帶 (圖3)。正反交組后代表現(xiàn)出2種條帶類型:1條深色放射條帶 (同珍珠白)和4條點狀條帶 (同海洋橙)，但各試驗組之間的分離比并不相同且差異很大，說明殼面花紋或條帶的遺傳機制比較復(fù)雜。

圖3 試驗組OW1、OW2、WO1、WO2的殼色Fig.3 Shell colors of OW1，OW2，WO1，and WO2lines

3 討論

3.1 雜種優(yōu)勢

雜種優(yōu)勢主要是由于優(yōu)良顯性基因互補作用和群體中雜合子頻率的增加，導(dǎo)致不良基因的作用得到抑制和減弱，從而使整個群體的平均顯性效應(yīng)和上位效應(yīng)得到提高［23］。在動植物中主要表現(xiàn)在生活力、耐受力、抗病力和繁殖力等性能的提高，餌料轉(zhuǎn)化率和生長速度等方面優(yōu)于親本。但有的時候，某些等位基因間的相互作用可能產(chǎn)生負的顯性效應(yīng)，導(dǎo)致基因所控制的性狀表現(xiàn)出雜交群體表型值低于雙親表型值或雙親中一方的現(xiàn)象，即表現(xiàn)出“劣勢”。閆喜武等［15-16］、霍忠明等［17］對不同殼色品系的蛤仔研究發(fā)現(xiàn)，其生長和存活率存在一定的差異，海洋橙品系存活率較高，具有較強的抗性，經(jīng)過兩代個體選擇的選育，其生長性狀也得到了顯著提高;而珍珠白品系最大的優(yōu)點是生長速度快，但其存活性狀較差，抗性較弱。從本試驗的生長結(jié)果來看，雜交組WO獲得了一定程度上的單親生長優(yōu)勢，雜交組OW在浮游期和變態(tài)期表現(xiàn)出生長優(yōu)勢，在稚貝期卻表現(xiàn)出了生長劣勢。但正反交組總體上獲得了一定程度的中親生長優(yōu)勢。這種正反交組之間及同一試驗組不同日齡之間的生長優(yōu)勢表現(xiàn)程度不同的現(xiàn)象，與其他貝類不同遺傳群體或品系間的雜交結(jié)果相同［24-26］。在存活率方面，正反交組的中親存活優(yōu)勢和雜交組WO的單親存活優(yōu)勢均表現(xiàn)出積極的一面。雜交組OW除了在3、6日齡時表現(xiàn)出一定的單親存活劣勢外，在其他日齡時均表現(xiàn)出存活優(yōu)勢。在變態(tài)期，正反交組的變態(tài)率表現(xiàn)出一定的中親及單親雜種優(yōu)勢。綜合生長、存活率和變態(tài)率三方面來看，正反交組的雜種優(yōu)勢大小順序為WO＞OW。通過雜交的手段有效地提高了蛤仔雜交后代的存活率、變態(tài)率，增強了其對環(huán)境的抗性，進而為高產(chǎn)的新品種選育提供了基礎(chǔ)。

3.2 卵源效應(yīng)

卵源效應(yīng)即母本效應(yīng)，是指子代的某些外貌特征、生理性狀和生產(chǎn)性能受到其母本直接影響的一種生理現(xiàn)象，其表現(xiàn)不僅受到其自身遺傳基礎(chǔ)的影響，還與其生活環(huán)境有著十分密切的關(guān)系。在動物早期的生長和存活等方面，母本效應(yīng)是一個非常重要的影響因素［27］。母本效應(yīng)包括細胞質(zhì)遺傳、母本營養(yǎng)環(huán)境等多個方面。母本營養(yǎng)環(huán)境主要影響個體的早期發(fā)育階段，主要是由于母本個體的營養(yǎng)積累程度、卵徑大小、攜帶的卵內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)不同所造成，這種影響會隨著個體的發(fā)育逐漸減弱或消失。國外學(xué)者對比目魚［28］、長牡蠣［29］、太平洋牡蠣［30］和海灣扇貝群體間［25］的研究發(fā)現(xiàn)，雜交個體生長和存活的母本效應(yīng)在幼蟲期顯著存在，而隨著個體的生長而消失。在本試驗中，雜交組生長和存活的雜種優(yōu)勢主要受到母本效應(yīng)的影響，且母本效應(yīng)不僅存在于幼蟲期，還貫穿于變態(tài)期和稚貝期，說明本試驗中雜交組的母本效應(yīng)主要受細胞質(zhì)遺傳所控制，這也與蛤仔其他雜交試驗的結(jié)果相類似［31］。在本試驗所用的親本中，海洋橙品系具有較強的存活性，珍珠白品系具有較快的生長性，并且它們都已經(jīng)過了多代的自繁，相關(guān)的優(yōu)良基因得到了一定程度的純化，因此，親本把優(yōu)良基因傳遞給子代并表達出來的可能性就大，子代雜種優(yōu)勢得到充分表達，并且這種由基因控制的雜種優(yōu)勢會伴隨著生物體的整個生活史。

3.3 殼色分析

海洋雙殼貝類的殼面顏色在過去一直被認為是分泌的產(chǎn)物，主要受環(huán)境的影響。但最近的研究發(fā)現(xiàn)，貝類的殼面顏色不僅與它們的生態(tài)行為、生長、存活性狀有關(guān)，而且還能夠穩(wěn)定地遺傳給后代［32-33］。Innes 等［13］和 Newkirk［14］通過雜交的方法研究了貽貝的殼色遺傳機制，指出其殼色是由簡單的遺傳基因控制，棕色和黑色相對于其他顏色是顯性。鄭懷平等［20］對海灣扇貝殼色遺傳的研究中指出，海灣扇貝的殼面背景顏色由單基因控制，橙色對白色為顯性。在本試驗中，2個橙色品系自交系出現(xiàn)了2種不同的殼面背景顏色，即橙色和白色的分離，分離比 (橙色∶白色)OO1為 3．11∶1，OO2為3．15∶1，符合3∶1的分離比，說明橙色對白色為顯性，親本的基因型為Ow。珍珠白品系的2個自交系后代的殼面背景顏色均為白色，說明其親本為隱性純合子，基因型為ww。這兩種品系雜交后代的殼面背景顏色分離比 (橙色∶白色)基本符合1∶1，這種結(jié)果正好遵循孟德爾遺傳定律，即Ow(橙色) ×ww(白色)的后代基因型為 Ow(橙色)和ww(白色)，表型性狀分離比 (橙色∶白色)為1∶1，殼面背景顏色是由簡單的遺傳基因控制。本研究中，從殼面花紋或條帶的分析來看，雜交后代的條帶分離比例并未有什么規(guī)律可言，這可能是由于殼面花紋或條帶的遺傳機制比較復(fù)雜，通過一代的雜交并不能分析出規(guī)律，需要對其進行更加深入地研究才能了解其遺傳規(guī)律和本質(zhì)。但通過對雜交后代出現(xiàn)白色4條點狀條帶、白色1條深色條帶、橙色4條點狀條帶、橙色1條深色條帶四種表現(xiàn)型可以分析出，殼面背景顏色和殼面花紋或條帶的控制基因并不處于同一對同源染色體上，彼此之間不存在基因連鎖或其他的聯(lián)系。

［1］Winter P C，Hickey G I，F(xiàn)letcher H L．謝雍，譯．遺傳學(xué)［M］．北京:科學(xué)出版社，2006:204-205．

［2］Devanand P S，Rangaswamy M，Ikehashi H．Identification of hybrid sterility gene loci in two cytoplasmic male sterile lines in rice［J］．Crop Science，2000，40(3):640-646．

［3］Ininda J，Njuguna J G M，Gichuru L，et al．Performance of threeway cross hybrids for agronomic traits and resistance to maize streak virus disease in Kenya［J］．African Crop Science Journal，2006，14(4):287-296．

［4］Reynolds M，Manes Y，Izanloo A，et al．Phenotyping approaches for physiological breeding and gene discovery in wheat［J］．Annals of Applied Biology an International Journal of the AAB，2009，155(3):309-320．

［5］Perez E O，Cianzio S R，Wiley H，et al．Insect-mediated crosspollination in soybean［Glycine max(L．)Merrill］:I．a(chǎn)gronomic performance［J］．Field Crops Research，2007，101(3):259-268．

［6］李瓊?cè)A，覃小榮，殷進炎．陸川豬二元、三元雜交組合對提高商品豬生產(chǎn)性能的研究［J］．廣西畜牧獸醫(yī)，2008，24(5):259-261．

［7］陳濤，楊光勇．三元雜交母?；亟辉囼炑芯浚跩］．中國畜牧獸醫(yī)，2008，35(8):141-142．

［8］賈存靈，魏澤輝，孔祥浩，等．薩陶寒三元雜交肉羊主要經(jīng)濟性狀表型相關(guān)及回歸分析［J］．湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，47(2):203-206．

［9］樓允東，李小勤．中國魚類遠緣雜交研究及其在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用［J］．中國水產(chǎn)科學(xué)，2006，13(1):151-158．

［10］姚雪梅，黃勃，賴秋明，等．凡納濱對蝦自交系與雜交系早期生長和存活的比較［J］．水產(chǎn)學(xué)報，2006，30(6):791-795．

［11］陳昌平，徐燕，紀德華，等．壇紫菜品系間雜交藻體選育及經(jīng)濟性狀的初步研究［J］．水產(chǎn)學(xué)報，2007，31(1):97-104．

［12］許芳．青島雜交參新種集26種海參品質(zhì)［J］．水產(chǎn)科技情報，2009(3):155．

［13］Innes D J，Halev L E．Inheritance of a shell-color polymorphism in the mussel［J］．Journal of Heredity，1977，68(3):203-204．

［14］Newkirk G F．Genetics of shell color in Mytilus edulis L．a(chǎn)nd the association of growth rate with shell color［J］．Journal of Experimental Marine Biology and Ecology，1980，47(1):89-94．

［15］閆喜武，張國范，楊鳳，等．菲律賓蛤仔莆田群體兩個殼色品系生長發(fā)育的比較［J］．大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報，2005，20(4):266-269．

［16］閆喜武，張國范，楊鳳，等．菲律賓蛤仔莆田群體與大連群體生物學(xué)比較［J］．生態(tài)學(xué)報，2005，25(12):3329-3334．

［17］霍忠明，閆喜武，張躍環(huán)，等．菲律賓蛤仔(Ruditapes philippinarum)大連群體家系建立及生長比較［J］．海洋與湖沼，2010，43(1):57-61．

［18］Neter J，Wasserman W，Kutner M．Applied linear statistical models［M］．Chicago:McGraw-Hill Irwin，1985:1127．

［19］Rohlf F J，Sokal R R．Statistical tables［M］．New York:W H Freeman and Company，1981:219．

［20］鄭懷平，張國范，劉曉，等．海灣扇貝雜交家系與自交家系生長和存活的比較［J］．水產(chǎn)學(xué)報，2004，28(3):267-272．

［21］Cruz P，Ibarra A M．Larval growth and survival of two catarina scallop(Argopecten circularis，Sowerby，1835)populations and their reciprocal crosses［J］．Journal of Experimental Marine Biology and Ecology，1997，212:95-110．

［22］Zhang H B，Liu X，Zhang G F，et al．Growth and survival of reciprocal crosses between two bay scallops，Argopecten irradians concentricus Say and A．irradians irradians Lamarck［J］．Aquaculture，2007，272(Suppl．1):88-93．

［23］包振民，萬俊芬，王繼業(yè)，等．海洋經(jīng)濟貝類育種研究進展［J］．青島海洋大學(xué)學(xué)報，2002，32(4):567-572．

［24］Hedgecock D，Mcgoldrick D J，Manahan D T，et al．Quantitative and molecular genetic analyses of heterosis in bivalve mollusks［J］．J Exp Mar Biol Ecol，1996，203:49-59．

［25］Cruz P，Ibarra M．Larval growth and survival of two catarina scallop(Argopecten circularis，Sowerby，1835)populations and their reciprocal crosses［J］．Journal of Experimental Marine Biology and Ecology，1997，212(1):95-110．

［26］Manzi J J，Hadley N H，Dillon R T．Hard clam，Mercenaria mercenaria，broodstocks:growth of selected hatchery stocks and their reciprocal crosses［J］．Aquaculture，1991，94(1):17-26．

［27］張國范，鄭懷平．海灣扇貝養(yǎng)殖遺傳學(xué)［M］．北京:科學(xué)出版社，2009:89．

［28］Solemdal P．Maternal effects—a link between the past and the future［J］．Journal of Sea Research，1997，37(3/4):213-227．

［29］Soletchnick P，Huvet A，le Moine O，et al．A comparative field of growth，survival and reproduction of Crassostrea gigas，C．a(chǎn)ngulata and their hybrids［J］．Aquatic Living Resources，2002，15(4):243-250．

［30］Hedgecock D．Hybrid vigor is pervasive in crosses among inbred lines of Pacific oysters［J］．Journal of Shellfish Research，1996，15(2):511．

［31］閆喜武，張躍環(huán)，孫煥強，等．菲律賓蛤仔(Ruditapes philippinarum)海洋橙品系兩個世代的雜交與近交效應(yīng)［J］．海洋與湖沼，2011，42(2):309-316．

［32］張躍環(huán)，閆喜武，姚托，等．菲律賓蛤仔2個殼色品系群體雜交的研究［J］．南方水產(chǎn)，2008，4(3):27-32．

［33］閆喜武，張躍環(huán)，霍忠明，等．不同殼色菲律賓蛤仔品系間的雙列雜交［J］．水產(chǎn)學(xué)報，2008，32(6):864-875．