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    EGFR在150例子宮內(nèi)膜病變中表達(dá)的研究

    2014-02-14 07:49:09
    關(guān)鍵詞:陽性細(xì)胞腺癌分化

    羅 紅

    中國醫(yī)科大學(xué)四平醫(yī)院病理科,吉林 四平 136000

    EGFR在150例子宮內(nèi)膜病變中表達(dá)的研究

    羅 紅

    中國醫(yī)科大學(xué)四平醫(yī)院病理科,吉林 四平 136000

    目的本研究檢測表皮生長因子受體家族中EGFR在子宮內(nèi)膜腺癌、不典型增生子宮內(nèi)膜及復(fù)雜增生子宮內(nèi)膜及正常增生期子宮內(nèi)膜等病變中的表達(dá)意義,并分析了EGFR與子宮內(nèi)膜腺癌之間的關(guān)聯(lián)性。

    表皮生長因子受體;子宮內(nèi)膜病理學(xué);免疫組織化學(xué)

    研究顯示在多種腫瘤組織和相關(guān)血清表達(dá)中EGFR均顯示異常[1]。同時(shí)其和與腫瘤的轉(zhuǎn)移存在一定的相關(guān)性[2]。目前我國對于EGFR與子宮內(nèi)膜癌之間的聯(lián)系尚無從良性子宮內(nèi)膜病變進(jìn)行等級相關(guān)研究的報(bào)道。本文針對EGFR與子宮內(nèi)膜腺癌之間的發(fā)生發(fā)展進(jìn)行了如下研究。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    收集2010年~2014年我院就診的婦科患者,所有患者均通過病理診斷確診為子宮內(nèi)膜癌。150例患者,CH(子宮內(nèi)膜復(fù)雜型增生)、NE(正常增生期的子宮內(nèi)膜組織)各30例,AH(子宮內(nèi)膜非典型增生)患者30例,EC(子宮內(nèi)膜癌)患者60例。150例患者的治療方法主要為手術(shù)方式,排除激素治療患者、放療患者以及化療患者。根據(jù)婦產(chǎn)科FIGO臨床分級標(biāo)準(zhǔn),可將150例患者分為Ⅰ期的患者17例、Ⅱ期的患者19例、Ⅲ期的患者14例、Ⅳ期的患者10例;組織學(xué)分級,G1(高分化)、G2(中分化)、G3(低分化)分別為25 例、18 例、17例;所有患者均存在子宮內(nèi)膜病變情況。

    1.2 檢測方法

    標(biāo)本采集后,應(yīng)保持相同的保存環(huán)境,免疫組化試劑盒為PV9000試劑盒,準(zhǔn)備工作完成后即可進(jìn)行染色。對患者進(jìn)行免疫組化學(xué)檢測時(shí),可采用以下方法進(jìn)行,具體步驟為:先對切片進(jìn)行包埋處理,一般可選擇石蠟進(jìn)行包埋,將包埋厚度控制在3 μm范圍內(nèi);然后采用梯度乙醇及二甲苯對切片進(jìn)行水化處理和脫蠟處理,采用過氧化氫3%凈化室內(nèi)空氣,保持10 min的相同室溫,以此降低內(nèi)源性過氧化物酶活性;采用PH值為9.0的緩沖液EDTA進(jìn)行抗原修復(fù),保持高壓高溫狀態(tài),滴加鼠抗人EGFR單克隆抗體(1∶50),室溫保濕盒中孵育60 min;先后滴加放大系統(tǒng)試劑1和試劑2,分別在室溫保濕孵育20 min和30 min,上述步驟均采用PBS進(jìn)行漂洗。當(dāng)DAB出現(xiàn)明顯的顯色反應(yīng)后,復(fù)染蘇木素,然后進(jìn)行脫水處理,待呈透明狀后,進(jìn)行封片處理。設(shè)置分組,分別設(shè)為陰性組及陽性組,陰性組為PBS患者,陽性組為陽性患者。

    1.3 評分方法

    經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn),EGFR染色主要呈棕黃色,陽性定位主要包括細(xì)胞漿及細(xì)胞膜兩種。選擇雙盲法進(jìn)行檢測時(shí),如隨機(jī)選擇高倍鏡視野10個(gè),腫瘤細(xì)胞及腺上皮陽性細(xì)胞數(shù)不少于1000個(gè),那可分為以下幾種評分方法[3]:第一種,按照顯色反應(yīng)進(jìn)行評分,根據(jù)是否出現(xiàn)顯色現(xiàn)象、顯色深淺等情況評價(jià)染色的強(qiáng)度。無顯色反應(yīng)為0分,淺黃色、棕黃色、棕褐色分別為1分、2分、3分;第二種,按照陽性細(xì)胞數(shù)量算出比例,然后進(jìn)行評分。陰性為0分,陽性細(xì)胞小于或等于10%為1分,陽性細(xì)胞為11%至50%為2分,陽性細(xì)胞為51%至75%為3分,陽性細(xì)胞大于75%為4分。兩種評分之間相乘多得結(jié)果為每例患者的染色積分,若患者則積分大于或等于3分,則可評價(jià)為免疫反應(yīng)陽性。

    1.4 統(tǒng)計(jì)處理

    本研究采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS14.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,采用Spearman等級相關(guān)分析方法,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.01。

    2 結(jié)果

    2.1 EGFR 在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)情況

    EGFR 在NE組、CH組、AH組及EC組的表達(dá)呈現(xiàn)遞增趨勢,具有顯著的等級相關(guān)性,spearman等級相關(guān)系數(shù)為0.579,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表1。

    2.2 EGFR對于各類型子宮內(nèi)膜病變的表達(dá)意義

    在本組60例患者中,經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),當(dāng)患者病理分期出現(xiàn)增高現(xiàn)象時(shí),EGFR陽性率也會(huì)隨之增高,當(dāng)患者的腫瘤分化出現(xiàn)降低現(xiàn)象時(shí),EGFR陽性率會(huì)隨之降低,分化程度可分為G1、G2、G3以及病理分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的陽性表達(dá)spearman等級相關(guān)系數(shù)分別為0.460和0.336,其表達(dá)增加有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表2。

    2.3 EGFR 在CH及NE中的表達(dá)

    見圖A與圖B,在AH及CH中的表達(dá)見圖C與圖D。

    A.正常增生;B.復(fù)雜增生;C.非典型增生;D.子宮內(nèi)膜腺癌

    3 討論

    EGFR屬于原癌基因c-erbB1中的一種表達(dá)產(chǎn)物,可以說是表皮生長因子受體中的一份子。對于細(xì)胞來說,在細(xì)胞生理過程中ER家族可以說是占據(jù)了極為重要的角色。EGFR的分布較為廣泛,尤其是在哺乳動(dòng)物身上,無論是其廣上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,還是膠質(zhì)細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞等,在細(xì)胞表面都存在EGFR,因?yàn)閷τ诩?xì)胞來說,EGFR信號通路有著極為重要的作用,其低于細(xì)胞的生長、增殖及分化等有一定的影響[3]。本文研究顯示,當(dāng)正常子宮內(nèi)膜出現(xiàn)轉(zhuǎn)化傾向時(shí),EGFR會(huì)出現(xiàn)逐漸上升現(xiàn)象。且比EC、AH、CH、NE之間的EGFR對比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,并有等級相關(guān)性(P<0.01)。有研究表明EGFR的異常表達(dá)可能與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[4]。可作為判斷子宮內(nèi)膜癌浸潤和轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)。EGFR 在低分化腺癌組的表達(dá)明顯高于高分化腺癌組(P<0.01)。

    表1 EGFR在NE、CH、AH、EC各組中的表達(dá)

    表2 EGFR陽性率與腫瘤分化程度

    綜上所述,在子宮內(nèi)膜腺癌病變過程中,該蛋白具有明顯的促癌作用,是腫瘤惡化的原因之一。相關(guān)研究顯示抑制EGFR基因表達(dá)可部分逆轉(zhuǎn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)基因的表達(dá)。臨床使用EGFR抑制劑可有效地抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖。

    [1]孟麗榮,李田,李小毛. PTEN和EGFR與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生和發(fā)展研究的最新進(jìn)展[J].腫瘤,2010,10(5):162-163.

    [2]楊唯寧,艾志宏,滕銀成. EGFR過表達(dá)對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展,2011,04(10):208-209.

    [3]王卓然,宋巍,孫壯狀. TGF-β1與EGFR在子宮內(nèi)膜癌患者內(nèi)膜組織中的表達(dá)及意義[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2010,14(7):68-69.

    [4]陳晶晶,陳柯,王曉秋. 子宮內(nèi)膜癌組織中Id-1、VEGF-C和EGFR的表達(dá)及臨床意義[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2010,04(2):102-103.

    R737.33

    B

    1674-9316(2014)09-0061-03

    10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.09.035

    方法采用免疫組化染色法,對正常EC(子宮內(nèi)膜癌組織)、AH(子宮內(nèi)膜非典型增生組織)、CH(子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生組織)及NE(正常增生期子宮內(nèi)膜組織)共150例中的EGFR 表達(dá)進(jìn)行檢測。

    結(jié)果EGFR在EC、AH、CH、NE這幾種子宮內(nèi)膜病變中具有陽性表達(dá)率逐漸升高且存在等級相關(guān)性,spearman等級相關(guān)系數(shù)為0.579,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。EGFR 的表達(dá)與腫瘤的組織分化程度、病理分期等級相關(guān),spearman等級相關(guān)系數(shù)分別為0.460和0.336,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

    結(jié)論EGFR 與子宮內(nèi)膜腺癌的發(fā)生及腫瘤的病理學(xué)行為相關(guān),過度表達(dá)提示預(yù)后不良。

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