光學(xué)法檢測(cè)大血小板的臨床應(yīng)用價(jià)值分析

陳言偉，王朝鑫

(解放軍第152中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南平頂山467000)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

光學(xué)法檢測(cè)大血小板的臨床應(yīng)用價(jià)值分析

陳言偉，王朝鑫

(解放軍第152中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南平頂山467000)

血小板計(jì)數(shù)；血細(xì)胞分析儀；阻抗法；光學(xué)法

低值血小板計(jì)數(shù)一直是檢驗(yàn)和臨床的一個(gè)難點(diǎn)，目前血小板計(jì)數(shù)多使用各類血液分析儀完成,其計(jì)數(shù)原理多為經(jīng)典的電阻抗法。近年來(lái)，雖然血細(xì)胞自動(dòng)分析儀不斷的更新?lián)Q代，但是大多是限于在白細(xì)胞分類的技術(shù)上的改進(jìn)，對(duì)于紅細(xì)胞和血小板的計(jì)數(shù)大多停留在傳統(tǒng)的阻抗法上面，并且是在同一通道進(jìn)行檢測(cè)。SysmexXT-4000i血細(xì)胞分析儀采用了阻抗法和光學(xué)法對(duì)血小板進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，光學(xué)法的應(yīng)用在血小板數(shù)量減少和形態(tài)異常的計(jì)數(shù)上具有更重要的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 患者，女性，47歲。急診以左拇指開(kāi)放傷入院。

1.2 儀器與試劑日本Sysmex公司XT-4000i型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及原裝配套試劑，XT-4000i原裝質(zhì)控。湖南省瀏陽(yáng)市醫(yī)用儀具廠提供的EDTA-K2抗凝管，日本OLYMPUS CX-41顯微鏡。血小板工作液(1%草酸銨稀釋液)、瑞氏-姬姆薩染液按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版配置后保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 方法使用SysmexXT-4000i的“CBC+DIFF+ RET”模式，對(duì)患者EDTA-K2抗凝標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行阻抗法(PLT-I)與光學(xué)法(PLT-O)檢測(cè)3次取均值，顯微鏡法血小板計(jì)數(shù)(PLT-M)由兩位中級(jí)職稱檢驗(yàn)專業(yè)工作人員嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版操作，用雙盲法分別計(jì)數(shù)取均值作為參考方法。同時(shí)手工涂片瑞姬氏染色鏡檢，觀察血小板與紅細(xì)胞形態(tài)。所有在標(biāo)本采集后2h內(nèi)檢測(cè)完畢。

2 結(jié)果

阻抗法血小板計(jì)數(shù)(PLT-I)均值為17×109/L，光學(xué)法血小板計(jì)數(shù)(PLT-O)均值為44×109/L,顯微鏡法血小板計(jì)數(shù)(PLT-M)均值為48×109/L。阻抗法血小板直方圖走勢(shì)低平，幾乎呈一條直線，尾部快速上升，可信度低。血片染色后油鏡下可見(jiàn)多數(shù)為大或者巨大血小板，其中有的體積與紅細(xì)胞相近(如圖1、圖2所示)。由此可見(jiàn)阻抗法血小板計(jì)數(shù)時(shí)誤把大或者巨大血小板當(dāng)作了紅細(xì)胞，從而導(dǎo)致血小板的真實(shí)計(jì)數(shù)降低。

圖1 大血小板(瑞姬氏染色×1000)

圖2 巨大血小板(瑞姬氏染色×1000)

3 討論

SysmexXT-4000i血細(xì)胞分析儀光學(xué)法檢測(cè)血小板的優(yōu)勢(shì)在于其檢測(cè)原理不同于阻抗法，通過(guò)對(duì)血小板核酸熒光染色激光散射原理，分別用前向散射光和側(cè)向散射光對(duì)血小板的內(nèi)部核酸成份進(jìn)行分析，利用與其他細(xì)胞熒光強(qiáng)度的不同從質(zhì)的層面分析計(jì)數(shù)，不受細(xì)胞體積大小的影響。從而避免了阻抗法檢測(cè)血小板時(shí)出現(xiàn)小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、大血小板及其他“非血小板顆粒”的干擾，彌補(bǔ)了阻抗法單就通過(guò)檢測(cè)顆粒的體積大小區(qū)分血小板和其他細(xì)胞的弊端。

低值血小板計(jì)數(shù)的精密度和準(zhǔn)確度一直是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)非常重視的話題，也是評(píng)價(jià)一臺(tái)血細(xì)胞分析儀性能最重要的指標(biāo)，其計(jì)數(shù)的正常與否可以直接影響到外科病人是否能實(shí)施手術(shù)進(jìn)行治療，當(dāng)血小板計(jì)數(shù)低于20×109/L時(shí)，病人發(fā)生出血的風(fēng)險(xiǎn)就會(huì)加大，特別是腦出血對(duì)于患者會(huì)有致命的危險(xiǎn)，這也是臨床醫(yī)生選擇輸注血小板的醫(yī)學(xué)決定水平。當(dāng)阻抗法血小板計(jì)數(shù)低于正常參考范圍下限，特別是低于20×109/L時(shí)，我們一定要提高警惕，充分考慮可能影響血小板計(jì)數(shù)的干擾因素。光學(xué)法復(fù)檢方便、快捷，并將血小板進(jìn)行核酸染色，能將血小板與“非血小板顆?！狈珠_(kāi),很大程度上提高了對(duì)血小板識(shí)別的特異性，使其計(jì)數(shù)更加準(zhǔn)確。由于目前光學(xué)法檢測(cè)血小板的試劑成本較高，因此常規(guī)工作中我們可以先用阻抗法檢測(cè)血小板，當(dāng)發(fā)現(xiàn)血小板低于100×109/L、血小板直方圖出現(xiàn)分布異常、儀器提示血小板聚集、紅細(xì)胞碎片等出現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)可疑時(shí)要進(jìn)行光學(xué)法血小板計(jì)數(shù)，必要時(shí)推片染色鏡檢或者顯微鏡手工計(jì)數(shù)，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。

[1]劉志華,李丹華,彭祥云.臨床不合格血液標(biāo)本原因分析和持續(xù)改進(jìn)措施[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(5):476-477.

[2]王建中,屈臣雪.三種流式細(xì)胞術(shù)計(jì)數(shù)血小板方法的比較研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2003,26(1):8-12.

[3]叢玉隆,樂(lè)家新.現(xiàn)代血細(xì)胞分析技術(shù)與臨床[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2005:96.

[4]叢玉隆.血液分析儀應(yīng)用中的幾個(gè)問(wèn)題[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 1994,17(6)：325.

[5]伍柏青,傅新文.當(dāng)代五分類血細(xì)胞分析儀技術(shù)原理分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(4):391-394.

R446.11+1

B

1674-1129(2014)05-0643-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.071

2013-10-23；

2014-05-30)